α1-抗糜蛋白酶基因、早老素1基因与阿尔茨海默病的相关分析

目的探讨中国汉族人中α１抗糜蛋白酶（ＡＡＣＴ）基因、早老素１（ＰＳ１）基因多态性与阿尔茨海默病（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓｄｉｓｅａｓｅ，ＡＤ）的相关情况。方法应用ＰＣＲＲＦＬＰ方法，在１２３例患者和１４０例正常人中观察ＡＡＣＴ信号肽和ＰＳ１基因多态性的分布，进行关联分析。结果１ＡＤ患者与ＰＳ１基因等位基因１正关联，与等位基因２和基因型２／２负关联，但与１／１基因型无关；２ＡＡＣＴ信号肽基因多态性与ＡＤ无关联；３在三种ＰＳ１基因型中，ＡＡＣＴ信号肽基因多态性与ＡＤ均无关；４在ＡＡＣＴ基因ＡＡ、ＴＴ基因型中，ＰＳ１基因多态性与ＡＤ负关联，而ＴＡ型中ＰＳ１基因与ＡＤ无显著相关。结论中国人群中，ＡＤ与ＰＳ１基因２／２型负关联，而与ＡＡＣＴ信号肽基因多态性无关；ＡＡＣＴ信号肽和ＰＳ１基因多态性之间也无明显的相互影响。

蚊抗药性相关糜蛋白酶基因稳定转染细胞系的建立与表达鉴定

目的建立抗药性相关糜蛋白酶基因稳定转染细胞系。方法采用PCR方法,以淡色库蚊抗药性品系cD NA文库为模板,扩增出抗药性品系高表达的糜蛋白酶基因编码区;经T/A克隆测序鉴定后,亚克隆到真核表达载体pIE13,构建重组昆虫细胞表达载体pIE13/chy,经酶切和PCR鉴定后,与带有筛选标记的pIE1neo质粒共转染蚊细胞C6/36,通过G418选择培养,建立转染细胞系;用RT PCR、Westernblotting鉴定糜蛋白酶基因的转录表达。结果成功构建了真核表达载体pIE13/chy,证明糜蛋白酶基因已转入C6/36细胞,建立了稳定转染细胞系,表达产物分子质量单位约30ku,与理论值相符。结论稳定转染细胞系的建立和基因表达为进一步研究糜蛋白酶基因与抗药性的关系奠定了基础。

心脏糜蛋白酶A基因-1903AA基因型延缓肥厚型心肌病患者的发病

目的探讨血管紧张素转换酶基因(ACE)16内含子的插入/缺失(I/D)、血管紧张素Ⅱ受体1型基因(AGTR1)1166A/C、醛同酮合成酶基因(CYP11B2)-344C/T、心脏糜蛋白酶A基因(CMA)-1903A/G、肿瘤坏死因子α基因(TNFα)-308G/A和C蛋白β3亚单位基因(GNB3)825C/T等多态对HCM临床表型的影响。对象和方法研究对象为在中国医学科学院阜外心血管病医院就诊的93例无血缘关系的HCM病人,82例性别、年龄匹配的健康人作为正常研究对照。设计特异引物,PCR扩增包含ACE I/D、AGTR1 1166A/C、CYP11B2-344C/T、CMA-1903A/G、GNB3 825C/T、TNF-α- 308G/A等多态的目的片断,根据PCR产物的长度或PCR产物限制性酶切后的长度来判定上述多态。结果4．3%的HCM患者携带CMA-1903AA基因型,其发病(65．5±7．9岁,n=4)晚于携带AG (37．3±12．5岁,n=36,P＜0．01)和GG(40．1±15．3岁,n=53,P＜0．01)基因型的HCM患者。ACE I/D、AGTR1 1166A/C、CYP11B2-344C/T、GNB3 825C/T、TNF-α-308G/A等多态不影响HCM表型。结论携带CMA-1903AA基因型的HCM患者发病明显晚于AG和GG基因型的患者,可能AA基因型具有保护作用。

广东汉族人α1-抗糜蛋白酶信号肽基因的多态性

目的 了解广东汉族人α1-抗糜蛋白酶信号肽基因的分布特点 ,并与其它地区人群进行比较。方法 应用聚合酶链反应技术对正常人α1-抗糜蛋白酶信号肽基因进行扩增以BstNI进行限制性酶切图谱分析。结果 广东汉族人α1-抗糜蛋白酶信号肽基因中 ,表现型T/T频率是 5 0 0 % ,表现型T/A是 37 2 % ,表现型AA是 12 8%。α1-抗糜蛋白酶信号肽基因T频率是 0 6 2 2 ,基因A频率是 0 378。结论 广东汉族人α1-抗糜蛋白酶信号肽基因的分布与其它地区及人种有不同。

α1-抗糜蛋白酶信号肽基因与阿尔茨海默病相关性初步探讨

目的 探讨阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease ,AD)患者中的α1-抗糜蛋白酶基因多态性及其与AD的相关性 .方法 利用聚合酶链式反应 -限制性片段长度多态性 (PCR -RFLP)技术对 48例AD患者及 89例对照者的α1-抗糜蛋白酶信号肽基因进行分型 ,进而进行AD与α1-抗糜蛋白酶信号肽基因多态性的相关分析 .结果 ①AD病人α1-抗糜蛋白酶基因中 ,基因型A/T占 2 7.1% ,明显低于对照组的 5 1.7% (p <0 .0 1,RR =0 .3 5 5 ) ,T/T占 60 .4% ,明显高于对照组的 3 7.1% (p <0 .0 1,RR =2 .5 76) ,A/A占 12 .5 % ,与对照组 11.2 %无明显差异 (p >0 .0 5 ,RR =1.0 86) .②AD病人中α1-抗糜蛋白酶信号肽基因等位基因A的频率为 2 6.0 %、相对危险率 (RR)为 0 .5 94,T的频率为 74.0 %、RR为 1.683与对照组的A为 3 7.1%、T为 62 .9%差异无显著性意义 (p >0 .0 5 ) .结论 AD病人中α1-抗糜蛋白酶信号肽基因基因型T/T(AACT T/T)频率明显高于正常人 ,与AD存在正相关 ;而AACT A/T频率则明显低于正常人 。

西南地区汉族人群慢性胰腺炎糜蛋白酶C基因突变分析

目的分析西南地区汉族人群慢性胰腺炎(CP)糜蛋白酶C(CTRC)基因突变情况,从基因层面探讨西南地区汉族人群CP发病的机制。方法收集108例西南地区汉族CP患者(CP组)和150例健康对照者(对照组)的外周血,提取白细胞核DNA进行CTRC基因全外显子测序,在线分析比较测序结果,分析CTRC基因突变情况。建立显性遗传模型,根据临床资料分析遗传与吸烟、饮酒的相关性。结果 CP组CTRC基因外显子检出c. 611G> A、c. 703G> T、c. 736C> T杂合错义突变各1例,对照组外显子区域未检出CTRC基因突变。另外发现5个单核苷酸多态性(SNP)位点,均位于内含子区域,分别为c. 40+92T> A、c. 40+133G> A、c. 493+49G> C、c. 493+51C> A、c. 793-137A> G,其中CP组上述位点发生频率分别为0、12. 96%、19. 44%、7. 41%、16. 67%,对照组上述位点发生频率分别为2. 67%、5. 33%、7. 33%、6. 67%、16. 00%,CP组c. 40+133G> A、c. 493+49G> C位点发生频率高于对照组(P均<0. 05)。CP组SNP位点c. 40+133G> A、c. 493+49G> C基因型频率和等位基因频率均高于对照组(P <0. 05或<0. 01)。在显性模型下,CP组与对照组携带c. 40+133G> A位点或c. 493+49G> C位点改变的人群,CP患病风险均增加(P均<0. 05)。在吸烟因素存在的情况下,c. 493+49G> C位点改变的组间分布差异有统计学意义(OR=4. 667,95%CI为1. 341～16. 239,P <0. 05)。结论 c. 611G> A、c. 703G> T、c. 736C> T杂合错义突变可能与西南汉族人群CP发病有关,SNP位点c. 40+133G> A和c. 493+49G> C可能为西南地区汉族人群CP易感位点,有SNP位点c. 493+49G> C改变的吸烟者可能有CP发病倾向。

四川地区汉族人群慢性胰腺炎糜蛋白酶C基因突变的影响因素

目的慢性胰腺炎(CP)是胰腺实质不可逆损伤性疾病,糜蛋白酶C(CTRC)基因改变可能与CP发病有关。文章分析四川地区汉族CP人群CTRC基因的突变情况,探讨其与临床关系。方法采集106例CP患者以及148例健康对照者外周血,提取DNA进行CTRC基因全外显子测序,并分析临床相关性。结果发现1例c.611G>A杂合错义突变; 3个单核苷酸多态性(SNP)位点改变,包括1个新的SNP位点c.40+133G>A及2个已知的SNP位点改变(rs6679763和rs555015)。c.40+133G>A和rs6679763位点突变在病例组与对照组间分布差异有统计学意义(P=0.029、P=0.011)。临床基线资料表示吸烟(P=0.042)、胆道疾病(P=0.013)、血糖(P=0.017)组间差异有统计学意义。消除混杂因素,吸烟具有组间差异性(OR=2.817,95%CI:1.016～7.811,P=0.047),rs6679763突变位点分布病例组高于对照组(OR=4.893,95%CI:1.152～20.781,P=0.031)。未发现基因位点突变与环境存在相乘交互作用。结论吸烟、胆道疾病、血糖、c.611G>A,rs6679763和c.40+133G>A位点变异可能与CP有关,考虑吸烟及rs6679763位点变异是CP的独立危险因素;并初步验证了CTRC基因SNP位点rs6679763和c.40+133G>A以及点突变位点c.611G>A是四川地区汉族人群的易感基因位点。

血管紧张素转换酶抑制剂致干咳机制的研究进展

干咳是血管紧张素转换酶抑制剂类药物一种常见的不良反应,对患者的服药依从性和生活质量具有一定的影响。女性较男性更易发生,除此之外未发现更特异的环境变量或行为因素可以解释该不良反应的发生。基础研究提示其发生机制可能涉及激肽系统、花生四烯酸通路等。已有的少数候选基因研究主要涉及血管紧张素转换酶基因和缓激肽β_2受体基因等,但未得到一致的关联结果。今后的候选基因研究应该注意考虑基因与基因间、同一基因中不同变异位点间、以及性别与基因表达间的交互作用对干咳发生的影响。