超声引导下经直肠前列腺系统12点穿刺活检术对早期前列腺癌的诊断价值

目的评价经直肠超声引导下前列腺系统12点穿刺活检术的临床价值。方法对临床高度怀疑前列腺癌149例患者进行经直肠超声引导下前列腺系统12点穿刺活检。结果成功进行12点系统穿刺活检者149例,获取组织满意.病理诊断为前列腺癌36例,前列腺增生80例,不典型增生4例,前列腺内皮瘤4例,前列腺慢性炎症9例,鳞状上皮化生3例,结核1例。前列腺平滑肌肉瘤7例,前列腺囊肿5例。结论经直肠超声定位下系统12点穿刺法成功率高,无严重并发症。在临床早期诊断前列腺癌很有价值。

基于CRISPR-Cas12a系统的鼠伤寒沙门氏菌可视化检测方法的建立

为了建立一种特异性强、灵敏度高的鼠伤寒沙门氏菌可视化检测方法,试验将聚合酶链式反应(PCR)与成簇的有规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeats-CRISPR-associated, CRISPR-Cas)系统相结合,首先根据鼠伤寒沙门氏菌的spy基因序列3′末端的保守区设计crRNA及靶标序列扩增引物,根据可视化检测原理设计单链DNA(single-stranded DNA, ssDNA)荧光报告探针;然后对靶标序列进行PCR扩增,将扩增产物加入CRISPR-Cas12a系统,在蓝光下通过肉眼观察是否产生绿色荧光实现对靶标的检测;最后进行特异性试验和灵敏度试验。结果表明:建立的方法仅能检测到鼠伤寒沙门氏菌,检测不到除鼠伤寒沙门氏菌外其他血清型的沙门氏菌及大肠杆菌、巴氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌,能检测到循环数为14个的PCR产物和0.53 copies/μL的重组质粒,灵敏度优于常规PCR方法和实时荧光定量PCR方法。说明本试验建立的方法可以实现鼠伤寒沙门氏菌的可视化检测,具有特异性强、灵敏度高的特点。

NoV GⅡ.2亚型RT-RPA-CRISPR/Cas12a检测方法的建立

近年来,一种新的诺如病毒GⅡ.2亚型(norovirus GⅡ.2,NoV GⅡ.2)通过牡蛎等生食海鲜感染人群,引发急性胃肠炎,并在全球广泛传播。为实现NoV感染的现场诊断和快速疫情响应,亟需建立快速便捷的NoV GⅡ.2亚型核酸检测方法。本研究通过设计引物、crRNA,经优化反应条件后,建立了NoV GⅡ.2亚型RTRPA-CRISPR/Cas12a检测方法。结果显示:利用引物NoV-GⅡ.2-F1B和NoV-GⅡ.2-R1对NoV GⅡ.2标准RNA进行RT-RPA扩增,结合crRNA1介导的CRISPR/Cas12a报告体系,能在40 min内完成NoV GⅡ.2核酸检测;该方法检测灵敏度为10 copies/μL,且与轮状病毒、腺病毒、星形病毒、人副肠孤病毒、博卡病毒和札如病毒无交叉反应;应用该方法和qRT-PCR法,分别对30份临床模拟样本进行检测,发现总符合率达96.67%。结果表明,本研究建立的NoV GⅡ.2亚型RT-RPA-CRISPR/Cas12a检测方法无需依赖昂贵设备,具有灵敏度高、特异性强、操作便捷快速等特点,为NoV GⅡ.2感染的现场检测和防控提供了新方法。

基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒快速检测方法的建立

[目的]本研究将CRISPR/Cas12a系统与反转录重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA)结合,拟建立一种基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)快速检测方法。[方法]分析不同基因型PRRSV全基因组序列,在3′-UTR端保守区设计重组酶介导等温核酸扩增技术(RAA)引物、crRNA及DNA报告底物分子,筛选RT-RAA最佳引物对。表达纯化AsCas12a蛋白,并以质粒为标准品,经RT-RAA扩增后,将产物加入CRISPR/Cas12a系统,建立PRRSV的CRISPR/Cas12a-RT-RAA检测方法,分别以PRRSV、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)核酸为模板验证建立方法的特异性,以不同浓度的pMD18T-PRRSV为模板验证建立方法的敏感性。以5.62×10^(6)、5.62×10^(3)、5.62拷贝数/μL的质粒为模板进行重复性试验,最后进行临床效果评价,将所建立的方法与实时荧光定量逆转录PCR方法进行比较。[结果]本研究成功表达并纯化获得具有良好剪切活性的AsCas12a蛋白,蛋白分子质量大小为196 ku;所建立的CRISPR/Cas12a-RT-RAA方法的检测下限可达5.62拷贝/μL;该方法具有良好的特异性,可特异性检测出PRRSV,不能检出其他猪病病毒PCV2、PEDV、CSFV和PRV,并具有良好的重复性。应用该方法对121份猪组织样品进行检测,与实时荧光定量逆转录PCR的阳性符合率为93.75%,阴性符合率为99.05%,总符合率为99.17%。[结论]本研究成功建立基于CRISPR/Cas12a-RT-RAA的PRRSV快速检测方法,该方法特异性强、灵敏性高、重复性好且不依赖复杂设备,可在现场和基层实验室使用。

某12英寸半导体超纯水工程工艺设计介绍及运行分析

文章介绍了江苏某12吋半导体芯片项目工厂超纯水系统的工程设计与运行情况。该系统共分三个工艺段,采用两床三塔离子交换预处理、RO反渗透及混床离子交换工艺的纯水后段制备系统、抛光混床以及膜脱气和终端超滤的抛光精处理系统,确保产水水质达到电子级高纯度纯水使用需求。该系统水平衡完整,满足同时考虑处理水量和自用水量,并且通过小流量循环的方式,能够适应用水量波动,有效降低系统能耗和药剂消耗的同时提升了整套系统超纯水供水的稳定性。系统在连续运行期间,超纯水离子浓度第三方检测合格,电阻率、颗粒度、TOC、DO、SiO2等指标连续在线监测合格,达到系统设计和使用要求。

YXSW-12现场岩体真三轴试验系统及其应用

介绍了长江科学院与长春朝阳试验仪器有限公司联合研制的YXSW–12现场岩体真三轴试验系统,该试验系统具有如下功能:(1)能够开展现场岩体真三轴试验(σ2≠σ3);(2)可以提供15 MPa稳定围压,最大轴压达80 MPa;(3)试样尺寸为50 cm×50 cm×100 cm,能表征现场大尺度岩体力学特征;(4)能实现复杂应力路径伺服控制;(5)能获取试样变形、破坏全过程曲线。将YXSW–12试验系统用于研究柱状节理玄武岩力学特性,取得良好的效果,成果如下:(1)获得不同应力水平下岩体各向异性变形参数;(2)得到原岩样在卸围压路径的峰值强度、屈服强度,获得试样在卸围压路径与加载路径下的残余强度,明确了不同类型强度参数之间的差异;(3)了解柱状节理玄武岩在三维应力状态下的破坏机制,认识到岩体的破坏形式主要是在柱状节理面基础上的进一步扩展和贯通。YXSW–12试验系统的成功研制,为深入研究工程岩体在高应力、复杂应力路径条件下的变形、强度及破坏特征提供新的手段。

过移相和欠移相对12脉波整流系统的影响及抑制措施

根据自耦变压器的绕组结构和电气量之间的关系,分析了移相角与绕组匝数的关系。定量分析了移相角与输入电流总谐波畸变率和输出电压纹波系数之间的关系,分析表明过移相和欠移相均会使输入电流总谐波畸变率和输出电压纹波系数增大;为抑制输入电流中的非特征次谐波,提出了谐波抑制电抗器和相间电抗器相结合的12脉波整流系统,该系统结构简单、对称性好。仿真和实验结果表明了理论分析的正确性,所提多脉波整流系统可有效抑制输入电流中的非特征次谐波,减少过移相和欠移相对12脉波整流系统的影响。

VerifyNow-P2Y12系统评价氯吡格雷抵抗性对急性心肌梗死患者主要心血管事件影响的初步探索

目的初步探索氯吡格雷抵抗性与急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗或经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneous transluminal coronaryangioplasty,PTCA)后主要心血管事件(major adverse cardiovasular events,MACEs)发生率的关系。方法前瞻、连续入组2015年5月至2015年8月在广东省人民医院行PCI治疗或PTCA的AMI患者89例。MACEs定义为心源性死亡、非致死性心肌梗死、脑卒中、血运重建、急性心力衰竭。通过VerifyNow-P2Y12系统检测血小板功能,根据血小板反应单位(platelet reaction unit,PRU)(P2Y12反应单位,代表血小板残余活性)分为两组:氯吡格雷反应正常组(PRU<208)35例和氯吡格雷抵抗组(PRU≥208)54例。收集患者临床和6个月随访的资料,及部分患者CYP2C19基因型的资料,比较两组基线资料和半年MACEs发生率。结果 CYP2C19基因型检测提示中、快代谢型高达56.2%。正常组慢代谢型、中代谢型、快代谢型、未检测比例分比为3(5.5%)、13(24.1%)、19(35.2%)、19(35.2%),抵抗组为4(11.4%)、11(31.4%)、7(20.0%)、13(37.2%),两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组比较,抵抗组MACEs发生率有增高趋势,但两组比较差异无统计学意义(18.2%vs.7.5%,P=0.173);抵抗组急性心力衰竭的发生率比正常组高,差异有统计学意义(12.1%vs.0,P=0.019);两组心源性死亡、非致死性心肌梗死、卒中、血运重建发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PCI治疗或PTCA术后双联抗血小板治疗的AMI患者较高比例CYP2C19基因型为中、快代谢型;氯吡格雷抵抗患者的MACEs发生有增加趋势。

基于新型升压自耦变压器的12脉波整流系统

为扩展自耦变压器的应用范围,增大其升压比,通过分析多脉波整流系统对移相自耦变压器输出电压的要求,给出了新的移相自耦变压器移相角范围;设计了移相角为π/2的自耦变压器,将其应用于12脉波整流系统,并计算分析了系统输入电流、负载电压和磁性器件容量。理论分析、仿真结果和实验结果表明,移相角等于π/2时,自耦变压器容量仅为系统输出功率的63%,且自耦变压器具有结构对称性好和绕组个数少等优点。

HJ—12设备故障诊断系统及其应用

ＨＪ—１２设备故障诊断系统及其应用汪家铭（四川川化集团公司）１引言随着现代工业的高速发展，对设备管理和维修现代化的要求也越来越高。机器设备在运行中的状态是不断变化的，只有准确地掌握了设备的动态信号，才能有效地防止和减少设备事故的发生，而采用以计算机为...

猫杯状病毒RAA-CRISPR/Cas12a-LFS检测方法的建立及初步应用

为建立猫杯状病毒(FCV)基于重组酶介导的等温核酸扩增(RAA)结合CRISPR-Cas12a系统及侧向流层析试纸条(LFS)(RAA-CRISPR/Cas12a-LFS)的快速检测的方法,本研究基于FCV衣壳蛋白(VP1)基因序列保守区设计RAA引物、4对针对VP1靶标的扩增引物、4对VP1-cr RNA扩增引物和1条报告探针。利用4对VP1-crRNA扩增引物经退火和T7 RNA聚合酶转录合成4条靶标crRNA:VP1-1/2/3/4-crRNA,利用4对VP1靶标扩增引物经退火合成4条靶标双链DNA:VP1-1/2/3/4,经EnGen Lba Cas12a (Cpf1)核酸酶试剂的切割反应和Cas12a试纸条检测,根据出现条带的强弱筛选最佳VP1-crRNA。结果显示,VP1-2-crRNA对应的T线条带最强且C线不完全切割的条带最弱。因此选择VP1-2-crRNA进行后续试验。分别以FCV VR-782株及6株分离的FCV RNA为模板,利用RAA引物扩增其VP1基因,并通过琼脂糖凝胶电泳检测并评估RAA引物的扩增效果;利用Cas12a (Cpf1)核酸酶,以上述RAA扩增的VP1基因(来自FCV VR-782株RNA)为模板,在37℃恒温水浴30 min进行CRISPR/Cas12a-LFS检测,评估RAA产物、Cas12a、VP1-2-crRNA和ss DNA报告基团对CRISPR/Cas12a-LFS检测体系的重要性。RAA扩增效果的评估结果显示,从FCV VR-782株及6株分离的FCV RNA中均扩增到282 bp的VP1基因目的条带。重要性评估结果显示,只有上述4种试剂全部存在时CRISPR/Cas12a-LFS检测体系才能有效扩增。利用该方法检测FCV、猫疱疹病毒I型、支气管败血波氏菌、猫细小病毒、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、F81细胞,结果显示,该方法仅能够特异性检测FCV,而其他病原的检测结果 均为阴性,且分别在42℃30 min内和37℃40 min内完成对FCV的RAA扩增及CRISPR/Cas12a-LFS检测;利用该方法检测10倍倍比稀释的重组质粒标准品p MD18T-FCV-VP1以评估其敏感性,结果显示,该方法的检测限为37.5拷贝/μL,与本研究室建立的Taq Man荧光定量PCR方法的敏感性相当;分别利用同一批次和3批次配置的RAA-CRISPR/Cas12a-LFS体系分别检测不同浓度的重组质粒标准品p MD18T-FCV-VP1,以评估该方法的重复性,结果显示,该方法批内和批间重复性检测结果均一致;利用该方法和Taq Man荧光定量PCR方法同时检测临床采集的76份猫呼吸道拭子样品。结果显示,该方法检测到37份FCV阳性样品,39份阴性样品;Taq Man荧光定量PCR检测到36份FCV阳性样品,40份阴性样品。二者的阳性符合率达97.30%,阴性符合率97.50%,总符合率98.68%。本研究初步建立的FCV RAA-CRISPR/Cas12a-LFS检测方法简单、快速,且特异性强、敏感性高、重复性好、不依赖昂贵设备,为现场FCV的检测提供新的技术手段。

C-12多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对肺癌的诊断价值

目的:研究C-12多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对肺癌的诊断价值。方法:采用C-12多肿瘤标志物蛋白质芯片检测系统检测80例肺癌患者以及72例肺良性病变患者血清中12种肿瘤标志物(CA199、NSE、CEA、CA242、Ferritin、β-HCG、AFP、f-PSA、PSA、CA125、CA153及HGH)的水平。结果:肺癌组的芯片阳性率为92.50%,显著高于良性肺病组(50.00%)和对照组(23.68%)(P<0.001);肺癌组中CA199、CEA、CA242、Ferritin、CA125和HGH6项肿瘤标志物的阳性率和血清水平要显著高于良性肺病组和对照组(P<0.05);乌鲁木齐CA199和HGH两项肿瘤标志物阳性率与长沙、广州和重庆相比均有显著性差异(P<0.05),其C-12芯片检测阳性率与长沙和重庆相比也均有显著行差异(P<0.001)。结论:C-12多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统的应用对肺癌的诊断具有较高的临床应用价值;CA199、CEA、CA242、CA125和HGH联合检测可能是一种既经济又有效的肺癌诊断组合。

CFC-12系统改型至HFC-134a系统的分析

从理论上分析了如何将原有的CFC -1 2汽车空调系统改型成HFC -1 3 4a系统 。

EASI 12导联心电监测系统的临床应用

目的探讨EASI12导联心电监测系统的临床意义。方法对CCU病房的530例(EASI12导联监测系统监测205例、传统单导联监测系统监测325例)患者持续心电监测24～72h,并对监测结果进行比较分析。结果应用EASI12导联监测系统监测的205例中,可见房性心律失常57例(27.8%),室性心律失常79例(38.5%),房室传导阻滞26例(12.7%),心肌缺血性ST段改变85例(41.5%),而应用传统单导联监测系统的325例中,可见房性心律失常56例(17.2%),室性心律失常82例(25.2%),房室传导阻滞22例(6.8%),心肌缺血性ST段改变81例(24.9%),前者检出率显著提高(χ2=6.103、6.898、4.218、10.456,P均<0.05)。结论EASI12导联监测系统为临床提供了即时和准确的数据,有助于及时发现心律失常和心肌缺血事件。

No.7信令系统负荷分担在S12中的实现

No.7信令网是电信网中用于传送No.7信令消息的专用数据网,它由信令点SP、信令转接点STP、信令链路SLK组成 我国的No.7信令网采用三级结构,第一级为高级信令转接点(HSTP),第二级为低级信令转接点(LSTP),第三级为信令点(SP) HSTP负责转接它所汇接的LSTP和SP的信令消息,LSTP负责转接它所汇接的SP的信令消息,SP是信令网中传送各种信令消息的源点或目的地点 目前,我国高级信令转接点(HSTP)和一级干线电话网中的长途局交换机以及许多本地网市话局交换机都采用S12程控交换系统,因此,为保证No.7信令网的安全可靠运行。

基于上转换发光共振能量转移的CRISPR/Cas12a生物传感系统用于HPV16 DNA双信号检测

传统的纯核结构的上转换纳米材料用于生物传感时,存在表面猝灭效应或者因发光共振能量转移(LRET)效率不高导致灵敏度低等缺点,对目标物的灵敏检测有一定的局限性.本文通过多步高温共沉淀,介导壳层外延成长法,合成了NaYF_(4)∶Yb^(3+),Er^(3+)(C-UCNPs)核层发光和NaYF_(4)@NaYF_(4)∶Yb^(3+),Er^(3+)@NaYF_(4)(CSS-UCNPs)内壳层发光能量限域型上转换纳米材料,并表征了材料的晶型、形貌、表面配体、元素组成和发光共振能量转移效率.结果表明,该材料具有表面猝灭效应低、发光共振转移效率较高的优势,随后将其与成簇规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas)12a-纳米金系统结合,实现了人乳头瘤病毒DNA(HPV16 DNA)的比色定性和上转换发光定量分析,检出限为69.8 pmol/L,双信号检测有效提高了检测结果的准确性.此外,本方法不仅特异性强,还能识别单碱基错配的HPV16 DNA,提高了DNA片段的容错率.

网联电动汽车12V电源系统管理策略研究

文章提出了一种基于主流电动汽车电器架构和互联网汽车技术的12 V电源系统管理策略,该策略集成蓄电池状态监测和预警、人机远程交互、车辆远程启动等功能,可有效解决电动汽车由于蓄电池亏电引起的无法启动问题。

C-12多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统在肺癌诊断中的价值

目的:评价C-12多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统在肺癌中的诊断价值。方法:采用C-12多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统检测67例肺癌患者、69例肺良性病变患者和70例健康对照者血清中12种标志物(CA199、NSE、CEA、CA242、Ferritin、Beta-HCG、AFP、Free-PSA、PSA、CA125、HGH、CA153)的水平。结果:肺癌组阳性率(79.10%)显著高于肺部良性病变组(30.43%)及对照组(18.57%)阳性率(P<0.01)。其中CEA、CA125、NSE、CA199、CA242项肿瘤标志物的水平和阳性率显著高于肺部良性病变组和对照组(P<0.05)。CEA阳性率以腺癌组最高,NSE以小细胞肺癌组最高。结论:C-12多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对提高肺癌诊断率有较高的临床价值。CEA、CA125、NSE、CA199、CA242联合检测是一种既经济又有效的诊断组合,而且对病情监测有一定应用价值。

S12系统数据管理分析

本文对S12系统数据管理的控制流程、安全机制以及重组过程作了较为详细的分析,并结合数据关系实例作了简单说明。