血清凝集蛋白-1、可溶性基质裂解素2、单核细胞趋化蛋白1对心肌梗死患者经皮冠脉介入术后并发心力衰竭的预测价值

目的探讨心肌梗死(MI)患者经皮冠脉介入术(PCI)术后并发心力衰竭(HF)的影响因素及血清凝集蛋白-1(ITLN-1)、可溶性基质裂解素2(sST2)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的预测价值。方法将郑州大学第一附属医院2021年1月至2022年6月收治的388例MI患者作为研究对象,根据PCI术后随访1年发生HF情况分为HF组(92例)和非HF组(296例)。分析MI患者PCI术后并发HF的影响因素及血清ITLN-1、sST2、MCP-1对MI患者PCI术后并发HF的预测价值。结果多因素logistic回归分析结果显示,在排除其他因素的干扰后,血清sST2、MCP-1水平较高,均为MI患者PCI术后并发HF的危险因素(P<0.05),而血清ITLN-1水平较高,为MI患者PCI术后并发HF的保护因素(P<0.05)。将血清ITLN-1、sST2、MCP-1按照并联试验的方法对样本进行联合预测,结果显示,联合预测的灵敏度为94.56%,预测的漏诊率为5.5%。虽然联合预测的特异度(45.61%)、Kappa(0.254)均较低,且预测MI患者PCI术后并发HF的曲线下面积值与三者单独检测比较差异无统计学意义(P>0.05)。但该病临床需要高灵敏度,即漏诊率较低,联合诊断敏感度显著提高(P<0.05),符合临床实际需要。结论MI患者PCI术后并发HF的独立危险因素包括年龄较大、有高血压病、有2型糖尿病、发病至血运重建时间较长、血清sST2、MCP-1水平较高,其保护因素为应用IABP、血清ITLN-1水平较高,同时血清ITLN-1、sST2、MCP-1联合有助于提高对MI患者PCI术后并发HF的预测敏感度。

大麻素2型受体在加速正畸牙移动中的作用

目的 探讨大麻素2型受体(CB2)在正畸过程中对小鼠正畸牙移动(OTM)速率和压力侧牙周组织改建的作用。方法 筛选CB2^(-/-)和同窝WT型各30只雄性小鼠,6周龄时建立牙齿移动模型,建模时间分别为0、3、7、14、21 d(n=6)后取材,经体视显微镜测量牙移动距离;HE染色观察根压力区牙周组织变化;TRAP染色统计根压力区破骨细胞数量;免疫组织化学染色观察根压力区基质金属蛋白酶-9(MMP-9)阳性单核细胞和多核细胞的数量变化。结果 正畸牙移动距离测量结果显示,在21 d内,随着时间延长,牙齿移动距离逐渐增加,且3、7、14、21 d时CB2^(-/-)组牙齿移动距离均较WT小鼠增加;HE染色显示OTM第14天时CB2^(-/-)小鼠压力区牙周膜间隙宽度大于WT小鼠(P<0.000 1);TRAP染色显示14 d时,在第一磨牙远中根压力区硬骨板处,CB2^(-/-)小鼠的破骨细胞数量大于WT小鼠(P<0.001);MMP-9免疫组织化学染色显示OTM 14 d时,在压力区牙周膜区域,CB2^(-/-)小鼠的MMP-9(+)单核细胞和MMP-9(+)多核细胞数量均大于WT小鼠(P<0.05)。结论 CB2可加速正畸力作用下牙齿移动速率。CB2缺失加速正畸牙移动是通过加速牙移动过程中压力侧骨吸收实现的。

血清可溶性人基质裂解素2、动脉血乳酸在脓毒性休克患者预后中的临床价值研究

目的:探讨血清可溶性人基质裂解素2(sST2)、动脉血乳酸(Lac)在脓毒性休克患者预后中的临床价值。方法:选取脓毒性休克患者79例为研究对象。入院治疗28 d后,根据预后情况将患者分为病死组(22例)和生存组(57例)。分析脓毒性休克患者预后的影响因素,分析sST2、Lac水平与序贯器官衰竭评分(SOFA)、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)和降钙素原(PCT)水平的相关性,分析sST2、Lac对脓毒性休克患者入院28 d病死风险的预测价值。结果:病死组APACHEⅡ评分和SOFA评分高于生存组(均P<0.05)。病死组sST2、Lac及PCT水平高于生存组(均P<0.05)。APACHEⅡ评分、SOFA评分、sST2、Lac、PCT是脓毒性休克患者病死的影响因素(均P<0.05)。脓毒性休克患者APACHEⅡ评分、SOFA评分、PCT与sST2、Lac水平呈正相关(均P<0.05)。sST2、Lac联合预测脓毒性休克患者入院28 d病死风险的曲线下面积(AUC)高于单独指标AUC(均P<0.05)。结论:sST2、Lac是脓毒性休克患者病死的影响因素,两者联合检测对脓毒性休克患者入院28 d病死风险的预测价值较高。

卵巢浆液性肿瘤组织中转导蛋白β样1X相关蛋白1、睾素2表达对病人的预后价值

目的探究卵巢浆液性肿瘤组织中转导蛋白β样1X相关蛋白1(TBL1XR1)、睾素2蛋白表达水平及其与预后的关系。方法选取2015年4月至2017年4月南通大学附属肿瘤医院102例卵巢浆液性癌病人(恶性组),50例卵巢交界性浆液性肿瘤病人(交界组),48例卵巢良性浆液性肿瘤病人(良性组)。免疫组织化学法检测组织中TBL1XR1、睾素2蛋白表达。实时荧光定量PCR检测血清TBL1XR1、睾素2 mRNA表达水平。Kaplan-Meier分析TBL1XR1、睾素2蛋白不同表达情况与生存时间关系。Cox回归模型分析恶性组病人不良预后影响因素。受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清TBL1XR1、睾素2 mRNA对恶性组不良预后预测价值。结果恶性组TBL1XR1、睾素2蛋白高表达率高于交界组,交界组又高于良性组(P<0.05)。恶性组、交界组、良性组血清TBL1XR1(2.27±0.58,1.41±0.37,1.06±0.13)、睾素2 mRNA表达水平(2.66±0.67,1.58±0.40,1.09±0.15)逐次降低(P<0.05)。FIGO分期为Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移及组织学分级为高级别TBL1XR1、睾素2蛋白高表达率高于Ⅰ~Ⅱ期、淋巴结无转移及低级别(P<0.05)。生存分析显示,TBL1XR1、睾素2蛋白高表达组5年累积生存率分别低于TBL1XR1、睾素2低表达组(P<0.05)。Cox多因素回归分析,FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结发生转移、组织学分级为高级别、TBL1XR1高表达、睾素2高表达是卵巢浆液性癌病人不良预后危险因素(P<0.05)。恶性组死亡病人血清TBL1XR1(2.65±0.61比1.82±0.54)、睾素2 mRNA表达水平(3.10±0.76比2.15±0.57)高于生存病人(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清TBL1XR1、睾素2 mRNA预测恶性组病人不良预后的曲线下面积(AUC)都为0.84;二者联合预测不良预后的AUC为0.94,优于TBL1XR1、睾素2 mRNA单独预测(Z=2.24、P=0.025,Z=2.17、P=0.030)。结论卵巢浆液性癌组织及血清TBL1XR1、睾素2均为高表达,与FIGO分期、淋巴结转移、组织学分级及不良预后密切相关,血清TBL1XR1联合睾素2具有较高的预后预测价值。

斯钙素2在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的:探究斯钙素2(STC2)在宫颈癌组织中的表达情况,并评估其临床意义。方法:回顾性选取2022年1月至2023年5月东莞市人民医院宫颈癌患者(n=88)作为研究对象,应用免疫组织化学法测定患者宫颈组织中STC2表达情况,采用实时荧光定量PCR检测STC2,比较宫颈癌组织与癌旁组织STC2 mRNA,分析STC2在不同临床特征宫颈癌中的表达情况,对其相关性进行Logistic回归分析。结果:宫颈癌组织中STC2 mRNA明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌组织中STC2阳性表达在年龄、肿瘤直径、病理分型、不同浸润深度、分化程度、TNM分期中差异无统计学意义(P>0.05),STC-2表达与淋巴结转移相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,淋巴结转移是STC-2阳性的独立影响因素;STC2阳性组无进展生存期(PFS)明显低于STC2阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson分析显示STC2表达与PFS均呈负相关(r=-0.683,P<0.05),由于未达OS终点,目前无法计算以及对比OS差异,后续密切追踪跟进。结论:STC2在宫颈癌组织中表达量高,与年龄、肿瘤直径、病理分型、浸润深度、分化程度、TNM分期无关,与淋巴结转移有关,应予以高度重视。

心电图复极参数及血清可溶性人基质裂解素2水平对心肌梗死合并心力衰竭的诊断价值

目的:探讨心电图复极参数及血清可溶性人基质裂解素2(sST-2)水平对心肌梗死合并心力衰竭病人的诊断价值。方法:回顾性分析2019年3月—2022年5月北京积水潭医院收治的165例心肌梗死病人的临床资料,以是否合并心力衰竭分为研究组(76例,合并心力衰竭)与对照组(89例,未合并心力衰竭)。收集两组一般资料,所有病人均接受心电图检查,采用酶联免疫吸附法测定血清sST-2水平。比较两组一般资料、心电图复极参数、血清sST-2水平,分析心电图复极参数、血清sST-2水平对心肌梗死合并心力衰竭的诊断价值。结果:两组一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。研究组胸导联T波时间、胸导联QT间期及胸导联QTc间期长于对照组(P<0.05),血清sST-2水平高于对照组(P<0.001)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,胸导联T波时间、胸导联QT间期、胸导联QTc间期、血清sST-2水平及4者联合诊断心肌梗死合并心力衰竭的曲线下面积(AUC)值分别为0.792,0.803,0.822,0.814,0.896,且4者联合的AUC值高于单独指标(P<0.05)。结论:心电图复极参数、血清sST-2水平在诊断心肌梗死合并心力衰竭中具有重要价值,且4者联合具有更高的诊断价值。

血清高迁移率族蛋白B1、人β防御素2与腺病毒肺炎患儿闭塞性细支气管炎发生的关系

目的探讨血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、人β防御素2(hBD-2)与腺病毒肺炎(AP)患儿闭塞性细支气管炎(BO)发生的关系。方法选取193例AP患儿,根据出院3个月后是否发生BO将AP患儿分为BO组58例和非BO组135例。收集两组临床资料并用酶联免疫吸附试验检测血清HMGB1、hBD-2,用单因素及多因素Logistic回归分析AP患儿发生BO的影响因素,以受试者工作特征(ROC)曲线分析血清HMGB1、hBD-2对AP患儿发生BO的预测价值。结果BO组月龄小于非BO组,热程长于非BO组,低氧血症、机械通气发生比例及血液白细胞计数、血小板计数、C反应蛋白、降钙素原、HMGB1、hBD-2高于非BO组(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,低氧血症、机械通气和HMGB1、hBD-2升高为AP患儿发生BO的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清HMGB1、hBD-2联合应用预测AP患儿发生BO的曲线下面积为0.818,与血清HMGB1、hBD-2单独预测的曲线下面积(0.739、0.726)比较差异有统计学意义(P均<0.05)。结论血清HMGB1、hBD-2水平升高是AP患儿发生BO的危险因素,二者联合检测对AP患儿发生BO的预测价值较高。

血清信号转导抑制因子3、β防御素2对胸部创伤并发细菌感染诊断价值研究

目的探讨血清细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)、β防御素2(HBD2)对胸部创伤并发细菌感染的诊断价值。方法选取自2021年7月至2023年12月收治的胸部创伤(包括以胸部创伤为主的多发伤)患者152例为创伤组,并根据其是否并发细菌感染分为感染组(n=53)和无感染组(n=99),另选取同期在本院进行健康体检的志愿者152例为健康组。采用酶联免疫吸附法检测血清SOCS3、HBD2水平;采用Pearson相关分析感染组血清SOCS3与HBD2水平的相关性;采用多因素Logistic回归分析(逐步向前法)影响胸部创伤患者并发细菌感染的因素;采用受试者工作特征曲线分析血清SOCS3、HBD2对胸部创伤患者并发细菌感染的诊断价值,并采用Z检验比较其曲线下面积(AUC)。结果创伤组血清SOCS3、HBD2水平明显高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。感染组创伤严重程度评分(ISS)、机械通气时间明显高于无感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。感染组血清SOCS3、HBD2水平明显高于无感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。感染组血清SOCS3与HBD2水平呈正相关(r=0.579,P<0.05)。SOCS3、HBD2、ISS评分是影响胸部创伤患者并发细菌感染的因素(P<0.05)。血清SOCS3、HBD2联合诊断胸部创伤患者并发细菌感染的AUC为0.920(95%可信区间:0.878~0.961),SOCS3、HBD2单独诊断胸部创伤患者并发细菌感染的AUC分别为0.830(95%可信区间:0.763~0.897)、0.811(95%可信区间:0.741~0.881),二者联合诊断效能较SOCS3(Z=2.252,P=0.024)、HBD2(Z=2.615,P=0.009)单独诊断效能更高。结论胸部创伤并发细菌感染患者血清SOCS3、HBD2水平异常升高,二者联合诊断胸部创伤患者并发细菌感染的价值较高。

输尿管镜碎石术后发热性尿路感染危险因素及血清β防御素2高迁移率族蛋白B1 Toll样受体4早期预测价值

目的 探讨泌尿结石疾病采取输尿管镜碎石术治疗术后发生发热性尿路感染的相关危险因素,观察血清β防御素2、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)以及Toll样受体4(TLR4)对早期预测尿路感染的价值。方法 回顾性分析122例行输尿管镜碎石术治疗者的临床资料,根据术后是否发生发热性尿路感染分成感染组与未感染组,记录患者资料,分析危险因素,此外采集2组血液分离血清,测定血清β防御素2、HMGB1、TLR4水平。结果 术后35例(28.7%)发生发热性尿路感染,多因素分析显示年龄≥60岁、手术时间≥60 min、泌尿道手术史、合并糖尿病、导尿管留置时间≥72 h、住院时间≥7 d均是输尿管镜碎石术患者术后发热性尿路感染独立危险因素(P=0.023、0.014、0.016、0.019、0.008、0.011,OR值=2.154、3.021、2.451、2.331、2.025、2.415);感染组血清β防御素2、HMGB1、TLR4检测水平高于未感染组(t=10.48、28.47、22.86,P<0.05)。结论 输尿管镜碎石术,年龄、手术时间、泌尿手术室、合并糖尿管、导尿管留置与住院时间为术后发热性尿路感染的相关危险因素,需加强防范,术后通过检测血清β防御素2、HMGB1、TLR4水平对早期预测感染价值突出,值得推广。

肥胖对初诊2型糖尿病患者血清β抑制素2及胰岛素抵抗的影响

目的探讨肥胖对新诊断2型糖尿病(T2DM)患者血清β抑制素2及胰岛素抵抗的影响。方法选取2012年6—12月在本院内分泌科就诊的新诊断T2DM肥胖患者30例(T2DM肥胖组,BMI≥28 kg/m2)、新诊断T2DM非肥胖患者30例(T2DM非肥胖组,BMI<24 kg/m2)、体检健康者30例(对照组)。检测3组受检者空腹血清β抑制素2水平及其他实验室检查指标,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)和胰岛素敏感性指数(ISI)。多组间均数比较采用方差分析,β抑制素2相关因素分析采用Spearman相关分析。结果对照组、T2DM非肥胖组、T2DM肥胖组血清β抑制素2水平依次降低〔(341.5±14.4)、(332.4±17.7)、(319.1±15.8)ng/L,P<0.05〕。BMI与HOMA-IR呈正相关,与ISI呈负相关(P<0.01);β抑制素2与BMI、HOMA-IR呈负相关,与ISI呈正相关(P<0.01)。结论肥胖是影响T2DM患者血清β抑制素2水平及胰岛素抵抗的重要因素;肥胖的T2DM患者血清β抑制素2水平较体质量适中的T2DM患者降低,且胰岛素抵抗进一步加剧。

β防御素2对大鼠肺部炎症细胞因子的影响

目的探讨β防御素2(rBD2)对大鼠肺部炎症反应的影响及其可能机制。方法构建大鼠rBD2的cDNA慢病毒载体和RNA干扰载体,双向调节rBD2在大鼠肺组织内的表达水平,ELISA法检测肺组织中IL-1α、IL-1β、IL-4、IL-10的表达变化,Western blot检测肺组织中rBD2的表达,Real time PCR法检测肺组织中rBD2mRNA的表达。结果成功构建rBD2cDNA慢病毒和RNA干扰载体,并成功转染。大鼠肺部感染时,上调rBD2可降低IL-1α、IL-1β等促炎细胞因子的水平,提高抗炎细胞因子IL-4、IL-10的含量(P<0.01)。结论 rBD2可调节大鼠肺组织炎症相关细胞因子的水平,参与并抑制大鼠肺部炎症反应。

线粒体融合素2在糖尿病大鼠心肌损伤中的变化

目的:探讨线粒体融合素2(mitofusin 2,Mfn2)在糖尿病大鼠心肌损伤中的变化。方法:腹腔注射55mg/kg链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型,分为正常组、糖尿病4周组和糖尿病8周组。测定血流动力学指标、大鼠心系数;自动生化分析仪测定血浆肌酸激酶同工酶(creatine kinaseisozyme,CK-MB)水平。RT-PCR检测左室心尖部组织Mfn2的表达。结果:与正常大鼠相比,糖尿病4周、8周大鼠左室发展压、左室最大上升和下降速率、心率、左室做功均明显下降(P<0.05,P<0.01),心室舒张末压上升(P<0.01),心系数(HW/BW)明显增加(P<0.01),血浆CK-MB水平升高(P<0.05,P<0.01),Mfn2mRNA的表达降低(P<0.01);与糖尿病4周相比,糖尿病8周大鼠左室发展压、左室最大上升速率和下降速率、心率及左室做功进一步下降(P<0.05,P<0.01),心室舒张末压升高(P<0.01),HW/BW、CK-MB水平持续性升高(P<0.01),Mfn2mRNA的表达进一步降低(P<0.01)。结论:随着糖尿病病程的延长,糖尿病大鼠心室功能进一步下降,其机制可能与Mfn2的表达降低有关。

阿托伐他汀通过下调线粒体融合素2表达抑制大鼠心肌缺血再灌注后细胞凋亡

目的研究阿托伐他汀对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤后细胞凋亡及线粒体融合素2表达的影响。方法选取雄性SD大鼠32只,随机分为假手术组(sham),缺血再灌注组(I/R),阿托伐他汀1组(statin 1)和阿托伐他汀2组(statin 2),每组8只。Statin 1组术前7 d开始每日给予阿托伐他汀10 mg/(kg·d)灌胃,statin 2组药物剂量为40 mg/(kg·d),I/R组以等体积蒸馏水灌胃,随后制备心肌I/R损伤模型。各组于再灌注3 h后剪取心脏I/R损伤区域,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,免疫印迹法检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达,免疫组化法检测线粒体融合素2的表达。结果与sham组相比,I/R组及statin 1组、statin 2组心肌细胞凋亡显著增加,p-Akt表达显著下降,线粒体融合素2表达显著增加(P<0.01);与I/R组相比,statin 1组、statin 2组心肌细胞凋亡和线粒体融合素2表达均显著降低(P<0.05),而p-Akt表达显著增高(P<0.05),且statin 2组较statin 1组变化更显著(P<0.05)。结论阿托伐他汀可抑制大鼠心肌缺血再灌注损伤后的细胞凋亡,其作用可能与抑制线粒体融合素2表达有关。

β-防御素2与下呼吸道感染患者全身炎症反应的关系

目的研究下呼吸道感染(LRTI)患者外周血β-防御素2(HBD-2)与全身炎症反应的关系。方法LRTI组纳入81例患者,包括社区获得性肺炎、COPD急性加重或(和)合并肺部感染、支气管扩张合并感染。同期20例健康人作为对照组。酶联免疫吸附法(ELISA)测定外周血HBD-2、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-8水平。常规进行血细胞分析等实验室检查。比较LRTI组及对照组上述指标的变化。按照采血时患病时间分为<7d组、7～14d组和>14d组,比较组间差别。对HBD-2与IL-1β、IL-8进行相关分析。结果LRTI组患者外周血HBD-2、IL-1β和白细胞总数(WBC)显著高于对照组(P均<0.05)。LRTI患者在患病时间<7d组和7～14d组的HBD-2和IL-1β水平均显著高于对照组(P均<0.05),>14d组患者的HBD-2和IL-1β基本恢复正常(P均>0.05)。不同患病时间的LRTI患者IL-8水平无显著差异(P均>0.05)。外周血HBD-2与IL-1β呈显著正相关(r=0.313,P=0.030);HBD-2与IL-8无显著相关性(P>0.05)。结论LRTI患者外周血HBD-2明显升高,HBD-2升高主要表现在疾病早期或相对早期。外周血HBD-2升高可能与全身炎症反应有关。

吸烟对慢性牙周炎患者龈沟液及牙龈组织中β防御素2、3的影响

目的 :探讨吸烟对慢性牙周炎患者龈沟液(gingival crevicular fluid,GCF)及牙龈组织中β防御素(human beta def-ensin,hBD)2、3表达的影响。方法 :将研究对象分为吸烟慢性牙周炎组和非吸烟慢性牙周炎组。采用酶联免疫吸附法(Elisa)检测hBD2、3的浓度;反转录多聚合酶链反应(RT-PCR)检测hBD2、3m RNA的表达,并做半定量分析。相关数据采用SPSS 17.0软件包进行统计学分析。结果:在GCF中,hBD2、3在吸烟组的水平表达均低于非吸烟组;hBD2、3在2组牙龈组织样本中均有m RNA表达,其中吸烟组较非吸烟组m RNA表达水平减弱。结论 :吸烟可使GCF及牙龈组织中hBD2、3的表达发生改变,提示吸烟可对牙周宿主免疫防御系统产生消极影响。

线粒体融合素2通过Ras-PI3K-Akt信号途径抑制缺血再灌注诱导的乳鼠心肌细胞凋亡

目的:研究线粒体融合素2(Mfn2)基因对缺血再灌注诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的影响及其相关的信号通路。方法:乳鼠心肌细胞经缺氧/复氧(H/Re)处理模拟心肌缺血再灌注损伤。用Mfn2基因的重组腺病毒(Adv-Mfn2)感染经缺氧复氧处理的乳鼠心肌细胞。采用TUNEL染色、ELISA、流式细胞术等方法检测Mfn2对缺血再灌注诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的影响。Western blot分析线粒体凋亡路径中Bcl-2蛋白、Bax蛋白、Caspase-9以及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达变化。结果:TUNEL染色发现Adv-Mfn2感染乳鼠心肌细胞后,细胞凋亡较H/Re组和Adv-LacZ组显著减少。ELISA和流式细胞仪检测结果表明,Adv-Mfn2组心肌细胞凋亡较H/Re组及Adv-LacZ组明显减少,且这一作用呈时间依赖性。Western blot结果显示,Adv-Mfn2组中Bcl-2蛋白表达较H/Re组和Adv-LacZ感染组上升,Bax蛋白表达下降,各组中Caspase-9的表达变化与Bax相同,Adv-Mfn2组的p-Akt蛋白表达水平则较H/Re组和Adv-LacZ感染组明显上升。结论:Mfn2基因主要通过正向调控RasPI3K-Akt信号通路,促进Akt的磷酸化水平,使Bcl-2蛋白表达量增加,Bax蛋白表达量降低,抑制Caspase-9活化,从而抑制缺血再灌注诱导的乳鼠心肌细胞凋亡。

睾素2(SPOCK2)基因多态性与昆明地区新生儿支气管肺发育不良相关性

目的探讨睾素2(SPOCK2)基因多态性与昆明地区新生儿支气管肺发育不良(BPD)的相关性。方法选取2017年1-12月在云南省第一人民医院新生儿科住院的早产儿。56例患有BPD的早产儿为BPD组(其中男30例,女26例)。选取同期入住云南省第一人民医院NICU无肺部疾病的早产儿76例作为对照组(其中男30例,女46例)。采用聚合酶链式反应(PCR)对SPOCK2基因多态性位点rs1245560和rs1049269进行检测。结果两组SPOCK2基因型频率均符合Hardy-Weinberg平衡,具有种群代表性。两组均以rs1245560 AC基因型和rs1049269 AG基因型的分布频率最高,但在两组人群中的分布差异均无统计学意义(P=0.249和P=0.060)。基因型分析显示,rs1245560的AA、CC和AC基因型在对照组和BPD组中的分布差异无统计学意义(分别为21.4%vs. 28.9%;17.9%vs. 21.1%;50.0%vs. 60.7%,P>0.05)。rs1049269的AA和GG基因型在两组中分布差异无统计学意义(分别为25.0%vs. 44.7%;32.1%vs.23.7%,均P>0.05);AG基因型在BPD组的分布频率明显高于对照组(42.9%vs.31.6%,P=0.039)。等位基因分析显示,rs1245560 A和C等位基因频率分布差异无统计学意义(48.2%vs. 46.1%,P=0.803);rs1049269 G等位基因频率在BPD组中明显高于对照组(53.6%vs. 39.5%,P=0.025)。结论 SPOCK2基因多态性位点rs1049269AG基因型和G等位基因频率和BPD有关,是BPD发病的高危易感因素。

线粒体融合素2基因突变体对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究大鼠线粒体融合素2基因的蛋白激酶A磷酸化位点两种突变体对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及其相关的信号通路。方法利用两种携带蛋白激酶A磷酸化位点突变的线粒体融合素2基因重组腺病毒(Adv-Mfn2-alaPKA和Adv-Mfn2-asnPKA)和携带线粒体融合素2基因的重组腺病毒(Adv-Mfn2),感染培养的大鼠血管平滑肌细胞。水溶性四甲基偶氮唑盐法比较各组细胞增殖的变化;流式细胞术比较各组细胞周期的变化;免疫印迹法比较各组线粒体融合素2基因和磷酸化细胞外调节激酶1/2蛋白表达变化。结果感染重组腺病毒的三组细胞线粒体融合素2基因表达差异无显著性。与对照组相比,Adv-Mfn2-alaPKA和Adv-Mfn2组显著抑制细胞增殖(P<0.01),停滞于G0/G1期细胞比例显著增加(P<0.01),磷酸化细胞外调节激酶1/2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),且Adv-Mfn2-alaPKA作用更明显(P<0.01),而Adv-Mfn2-asnPKA组较对照组差异无显著性。结论Mfn2-alaPKA通过细胞外调节激酶1/2信号通路抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用较线粒体融合素2基因更明显;而Mfn2-asnPKA对血管平滑肌细胞无抑制增殖的作用,对细胞外调节激酶1/2信号通路也无作用。蛋白激酶A磷酸化位点是调控线粒体融合素2基因抗血管平滑肌细胞增殖的重要功能位点。

斯钙素2在高糖诱导的肝细胞炎症反应中的作用机制

目的研究斯钙素2(STC2)在糖尿病肝病中的作用机制。方法分析GEO数据库,筛选与糖尿病肝病模型相关的新颖分子。分析链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病模型小鼠肝脏的STC2的表达水平。高糖诱导处理LO2肝细胞,检测STC2表达变化,并分析TNF-α和IL-6的变化,评价STC2与TNF-α和IL-6的表达相关性。构建稳定高表达STC2的LO2细胞株,qRT-PCR分析高糖处理下过表达细胞与对照细胞中TNF-α和IL-6的表达。Western Blot分析STC2过表达细胞与对照细胞的STAT3和NF-κB的激活水平;MTT实验检测过表达STC2的LO2细胞的增殖能力。结果高脂饮食和STZ诱导糖尿病模型小鼠的肝组织STC2表达水平显著增加。在LO2肝细胞中,高糖能够诱导STC2的表达,并诱导炎症因子TNF-α和IL-6的表达,STC2与TNF-α和IL-6的表达存在正相关的关系。过表达STC2能够激活STAT3和NF-κB通路,并抑制肝细胞的增殖。结论在高糖环境下肝细胞的STC2被诱导表达,并且与促炎性因子TNF-α和IL-6存在正相关的关系。过表达STC2还能够激活STAT3和NF-κB通路,并抑制肝细胞的增殖。

去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的研究大鼠线粒体融合素2基因在去除蛋白激酶A磷酸化位点后对大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响及其相关的信号通路。方法利用携带去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因重组腺病毒(Adv-Mfn2-PKA(△))和携带线粒体融合素2基因的重组腺病毒(Adv-Mfn2),感染培养的大鼠血管平滑肌细胞。免疫印迹分析相关蛋白的表达;激光共聚焦显微镜观察其亚细胞定位;细胞凋亡酶联免疫吸附法比较其对细胞凋亡的影响;免疫印迹法分析磷酸化蛋白激酶B蛋白表达变化。结果外源基因转染后可表达特异性蛋白产物;激光共聚焦显微镜显示去除蛋白激酶A磷酸化位点后的线粒体融合素2基因表达产物主要分布于线粒体外膜;酶联免疫吸附法检测显示去除蛋白激酶A磷酸化位点后,线粒体融合素2基因诱导大鼠血管平滑肌细胞凋亡作用显著减弱(P<0.01),与空白对照组差异无显著性;免疫印迹检测表明Mfn2-PKA(△)组磷酸化蛋白激酶B表达较Mfn2组显著升高(P<0.01),与空白对照组差异无显著性。结论去除蛋白激酶A磷酸化位点的线粒体融合素2基因表达产物仍主要分布于线粒体外膜,但其诱导血管平滑肌细胞凋亡的作用丧失,对蛋白激酶B信号通路也无抑制作用。这表明蛋白激酶A磷酸化位点是调控线粒体融合素2基因诱导血管平滑肌细胞凋亡的重要功能位点。