胃腺癌组织中紧密连接蛋白7和紧密连接蛋白18及E钙黏素的表达及其意义

目的探讨胃腺癌组织中紧密连接蛋白7(claudin-7)、紧密连接蛋白18(claudin-18)及E钙黏素(E-cadherin)的表达及其意义,为肿瘤生物学研究提供参考。方法选择我院2005年收治的胃腺癌患者81例,收集其手术切除后存档的腺癌蜡块组织为观察组。选择同期在我院进行胃镜检查正常者70例,收集其胃体正常黏膜组织为对照组。应用免疫组织化学法检测两组claudin-7、claudin-18和E-cadherin的表达,分析三者阳性表达率与胃腺癌患者临床特征的关系及三者之间的相关性。随访并计算观察组患者5年生存率。结果对照组和观察组claudin-7(89.33%vs.25.93%)、claudin-18(64.29%vs.33.33%)和E-cadherin(57.14%vs.22.22%)阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。claudin-7、claudin-18和E-cadherin阳性表达率在不同肿瘤分化程度、有无淋巴结转移及不同增殖细胞核抗原表达的胃腺癌患者中比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。线性相关分析显示,胃腺癌组织中claudin-7与claudin-18(r=0.43)、claudin-18与E-cadherin(r=0.45)、claudin-7与E-cadherin(r=0.40)均呈正相关(P<0.05)。观察组患者5年生存率claudin-7阳性表达者(14/21,66.67%)与阴性表达者(3/60,5.00%)比较、claudin-18阳性表达者(16/27,59.26%)与阴性表达者(1/54,1.85%)比较、E-cadherin阳性表达者(14/18,77.78%)与阴性表达者(3/63,4.69%)比较,差异均有统计学意义(χ2值分别为24.5880、14.7868和13.2048,P均<0.05)。结论 claudin-7、claudin-18和E-cadherin在胃腺癌组织中呈低表达,与患者肿瘤分化程度、淋巴结转移及增殖细胞核抗原表达相关;三者具有协同作用,联合检测三者的表达有助于判断患者预后,即claudin-7、claudin-18和E-cadherin同时低表达的患者预后较差。

紧密连接蛋白claudin-7与肾细胞癌的相关研究进展

紧密连接是细胞黏附的4种连接形式之一,它可维持机体内环境的稳定,保持上皮细胞的极性,影响细胞的运动、增殖、分化,调节细胞功能的发挥。Claudins是紧密连接分子的重要组成蛋白;claudin-7是claudins的24个家族成员之一,目前已有多项研究证实其在多个肿瘤中存在异常表达。肾细胞癌是泌尿系统中最常见的肿瘤之一,其诊治现状目前仍不理想,已经发现的各种标志物均无令人满意的特异性及敏感性,新的生物标志物有待发掘用于肾细胞癌的早期诊断、治疗和预后以及易患人群的早期干预。现就claudins的相关基础研究、claudin-7的研究进展及其在肾细胞癌中的相关研究进行综述。

脑胶质瘤中CLDN-7基因甲基化状态及蛋白表达的研究

目的探讨脑胶质瘤血浆中CLDN-7基因的甲基化状况及蛋白表达的关系。方法采用巢式PCR、亚硫酸氢盐测序PCR(BSP)及免疫组织化学技术方法,检测56例脑胶质瘤血清标本中CLDN-7基因启动子区CpG岛的甲基化状态,分析其甲基化程度、蛋白表达和临床资料之间的相关性。结果脑胶质瘤患者血清中CLDN-7基因启动子区甲基化率为35.3%(18/51),按WHO病理分级,其中低级别(Ⅰ～Ⅱ级)组胶质瘤中基因启动子区甲基化率25.0%(9/36)低于高级别(Ⅲ～IV级)组甲基化率60.0%(9/15),两者之间存在显著差别(P<0.05);甲基化蛋白表达阳性率为55.6%(10/18),未甲基化的蛋白阳性表达率为84.8%(28/33)。结论 CLDN-7基因启动子区CpG岛中存在甲基化现象,与脑胶质瘤发生有关;基因的甲基化率与蛋白表达呈负相关关系。

Rab25、Claudin-5和Claudin-7在结直肠癌中的表达及临床意义

目的探讨Rab25、Claudin-5和Claudin-7在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达差异及临床意义。方法免疫组化SABC法分别检测53例结直肠癌患者肿瘤组织和癌旁正常组织中Rab25、Claudin-5和Claudin-7蛋白的表达水平,并将各因子的表达情况与患者的临床资料进行相关性分析,进而比较各因子之间表达水平的相关性。结果结直肠癌肿瘤组织中Rab25、Claudin-5、Claudin-7的表达水平均显著低于癌旁正常组织(P<0.05)。Rab25低表达与结直肠癌分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05); Claudin-5表达与年龄和淋巴结转移有关(P<0.05); Claudin-7表达与分化程度、浸润深度和淋巴转移有关(P<0.05)。Rab25与Claudin-5、Claudin-5与Claudin-7之间在结直肠癌的表达存在相关性(P<0.05)。结论 Rab25、Claudin-5、Claudin-7的低表达可能促进结直肠癌的发生,且其低表达与结直肠癌进展存在一定相关,Rab25与Claudin-5之间、Claudin-5与Claudin-7之间也存在相关。

LncRNA HOXA11-AS通过调控miR-1193/CLDN7轴促进甲状腺癌生长

目的探讨长链非编码RNA HOXA11反义RNA(LncRNA HOXA11-AS)对乳头状甲状腺癌(PTC)细胞增殖、迁移与侵袭的影响及作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人PTC组织与细胞中LncRNA HOXA11-AS表达,筛选最佳细胞系。体外培养细胞FTC-133并进行干预,抑制LncRNA HOXA11-AS表达、过表达LncRNA HOXA11-AS、过表达miR-1193或同时抑制lncRNA HOXA11-AS与miR-1193表达,分别检测FTC-133细胞增殖、迁移与侵袭及lncRNA HOXA11-AS、miR-1193、CLDN7 mRNA与蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验检验miR-1193与LncRNA HOXA11-AS、CLDN7的靶向关系,裸鼠成瘤实验检测抑制LncRNA HOXA11-AS表达对动物体内成瘤能力的影响。结果LncRNA HOXA11-AS在PTC组织与PTC细胞中上调表达,miR-1193下调表达(P<0.05);抑制LncRNA HOXA11-AS表达或过表达miR-1193可显著抑制FTC-133细胞增殖、迁移与侵袭(P<0.05),过表达LncRNA HOXA11-AS可显著促进FTC-133细胞增殖、迁移与侵袭(P<0.05),抑制LncRNA HOXA11-AS表达或过表达miR-1193可上调miR-1193表达,抑制CLDN7 mRNA及蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验显示,LncRNA HOXA11-AS、CLDN7与miR-1193存在靶向关系(P<0.05);抑制miR-1193表达可逆转抑制LncRNA HOXA11-AS表达对FTC-133细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用(P<0.05),抑制LncRNA HOXA11-AS表达可抑制裸鼠甲状腺癌移植瘤的生长。结论LncRNA HOXA11-AS在PTC组织与PTC细胞中上调表达,抑制LncRNA HOXA11-AS表达可通过调控miR-1193/CLDN7轴抑制甲状腺癌生长。

CpG甲基转移酶诱导人结肠癌细胞凋亡的实验研究

目的紧密连接蛋白(claudin)-7在结肠癌中表达上调,并与肿瘤的发生转移密切相关。文中探讨CpG甲基转移酶(CpG methyltransferase)又称M.SssI在体外对人结肠癌细胞HT-29细胞的凋亡诱导和增殖的抑制作用及对紧密连接蛋白-7表达的影响。方法分别用50U/ml M.SssI为过甲基化组,10μmol/L氮杂胞苷(5-azacytidine)为甲基化酶抑制组干预培养HT-29细胞,只加PBS为对照组。24 h后用流式细胞术观察3组细胞的凋亡情况。应用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测各组细胞的增殖能力。用细胞免疫荧光技术观察紧密连接蛋白-7的细胞学定位和表达程度在3组细胞中的差异。结果过甲基化组细胞早期凋亡率明显高于PBS对照组,P<0.05,而甲基化酶抑制组早期凋亡率低于对照组,差异无统计学意义,P>0.05。M.SssI显著抑制HT-29细胞增殖,P<0.05,抑制率达32.1%,而甲基化酶抑制剂5-氮杂胞苷可促进细胞增殖,但与对照组比较差异无统计学意义,P>0.05。与对照组和甲基化酶抑制组相比,紧密连接蛋白-7在过甲基化组表达明显下降,P<0.05,而5-氮杂胞苷组中紧密连接蛋白-7的表达量较对照组表达明显增强,P<0.05。结论CpG甲基转移酶可诱导HT-29细胞的凋亡、抑制增殖,可能与CpG甲基转移酶促使紧密连接蛋白-7基因启动子发生过甲基化,导致相应蛋白表达下降有关。