大孔吸附树脂富集刺五加中紫丁香苷和刺五加总苷的研究

目的富集刺五加中紫丁香苷和刺五加总苷。方法以紫丁香苷和刺五加总苷为指标,考察D-101大孔吸附树脂分离纯化紫丁香苷和刺五加总苷的最佳吸附及洗脱条件。结果富集紫丁香苷和刺五加总苷的工艺为样品溶液(0.2g药材/mL,)以1mL/min的上柱速度上柱,最大上样量为1g药材/g树脂,弃去水洗脱液,收集5BV75%乙醇洗脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得。经D-101大孔吸附树脂处理后紫丁香苷和刺五加总苷提取率可达89%以上,终产品中刺五加总苷质量分数可达14%以上。结论本方法适合于刺五加中紫丁香苷和刺五加总苷的富集。

RP-HPLC法测定刺五加注射液中紫丁香苷、紫丁香树脂苷的含量

目的建立反相高效液相色谱法测定刺五加注射液中紫丁香苷、紫丁香树脂苷含量的方法。方法用十八烷基键合硅胶柱为固定相;流动相A为水,流动相B为乙腈,梯度条件为0→20min,A:90%→50%;流速为1.0mL/min,检测波长220nm。结果紫丁香苷在0.03～0.16μg(r=0.9997,n=5)范围内呈线性关系,紫丁香树脂苷在0.02～0.13μg(r=0.9993,n=5)范围内呈线性关系;紫丁香苷和紫丁香树脂苷的平均回收率分别为99.34%(RSD=0.58%)、99.22%(RSD=0.71%)。结论本法简便、准确,可用于刺五加注射液中紫丁香苷、紫丁香树脂苷的含量测定。

刺五加提取物中紫丁香苷、紫丁香树脂苷的HPLC测定法

以 C1 8 柱 ,甲醇 -水 (2 8∶ 72 )为流动相 ,在 2 70 nm 检测波长下 ,建立了刺五加提取物中紫丁香苷 (简称苷B)、紫丁香树脂苷 (简称苷 E)的反相高效液相色谱同时测定方法。该方法快速、准确、灵敏。方法回收率苷 B为97.3% ,RSD 1.95 % ;苷 E为 96 .8% ,RSD 1.5 0 %。

D-900阴离子交换树脂纯化救必应中紫丁香苷工艺研究

目的研究D-900阴离子交换树脂对救必应中紫丁香苷的纯化工艺。方法采用高效液相色谱法和紫外分光光度法,以紫丁香苷保留率和溶液脱色率为指标,对树脂纯化条件进行考察。结果 D-900阴离子交换树脂纯化最佳工艺为树脂重量和样品体积比为1∶5,树脂柱径高比为1∶5,上柱流速为2 BV/h,在此条件下紫丁香苷保留率达80%以上,溶液脱色率达30%以上。结论紫丁香苷粗分离液通过树脂纯化的工艺,简单易行。

刺五加注射液中紫丁香苷及刺五加苷E含量限度的研究

目的:测定刺五加注射液(100ml/支和250ml/支)中紫丁香苷及刺五加苷E的含量,制定紫丁香苷及刺五加苷E的含量限度。方法:采取高效液相色谱法,选用Diamonsil C18(250×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液(V/V)为流动相B,梯度洗脱,柱温40℃;流速为每分钟1.0ml;检测波长为220nm。结果:检测20批刺五加注射液(100ml/支)中紫丁香苷的含量,最高值为0.36,最低值为0.21;刺五加苷E的最高值为0.23,最低值为0.15。检测20批刺五加注射液(250ml/支)中紫丁香苷的含量,最高值为0.23,最低值为0.14;刺五加苷E的最高值为0.16,最低值为0.10。结论:紫丁香苷和刺五加苷E的限度:100ml刺五加注射液中紫丁香苷的含量不低于0.21mg/ml,刺五加苷E的含量不低于0.15mg/ml;250ml刺五加注射液中紫丁香苷的含量不低于0.14mg/ml,刺五加苷E的含量不低于0.10mg/ml。

HPLC梯度洗脱法同时测定刺五加注射液中紫丁香苷与刺五加苷E含量

采用HPLC梯度洗脱法测定刺五加注射液中紫丁香苷与刺五加苷E含量，表明：样品经Cosmosit C18柱，使用紫外检测器（波长220nm），以十八烷基键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0．1％磷酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱，样品中紫丁香苷、刺五加苷E与相邻杂质峰分离度大于1．5，平均回收率90．5-99．8％之间，变异系数RSD〈4％。

高效液相色谱法测定刺五加浸膏中苷E的含量

目的：建立以高效液相色谱法测定刺五加浸膏中紫丁香树脂苷（苷E）含量的方法。方法：色谱柱YMC-ODS柱,流动相为甲醇-水（20∶80）,检测波长λs=220nm,流速1.0L/min,柱温30℃,进样量10μL。结果：苷E在0.0168-0.084μg（r=0.9993）范围内呈良好的线性关系。平均回收率为97.43%（RSD=1.21%）。结论：本方法简便、准确、重现性好。

刺五加中紫丁香苷、刺五加苷E的大孔树脂分离纯化工艺

目的:研究大孔树脂分离纯化紫丁香苷、刺五加苷E的工艺。方法:采用AB-8型大孔吸附树脂对紫丁香苷、刺五加苷E进行吸附纯化,并采用HPLC,以紫丁香苷、刺五加苷E含量和收率为参考指标综合评价。结果:优选纯化工艺为,上样液的质量浓度0.5 g·mL-1,吸附流速2 BV·h-1,洗脱剂30%乙醇,用量9 BV,洗脱流速1 BV·h-1。结论:刺五加提取物通过AB-8树脂,30%乙醇洗脱部位,可使紫丁香苷、刺五加苷E的收率和质量分数达到满意效果。

超声波提取刺五加主要酚苷及苷元的工艺优化

采用超声波提取的方法从刺五加根茎中提取紫丁香苷、刺五加苷E和异秦皮啶等有效成分,考察超声波提取时间、乙醇体积分数、料液比和超声波功率等因素对提取的影响。应用Box-Behnken中心组合进行3因素3水平的试验设计,分别以3种目标产物的得率与纯度作为响应值进行工艺优化。响应面法优化后提取工艺条件为:乙醇体积分数59.66%、刺五加与乙醇的料液比1∶6(g∶mL)、提取时间44.9min、超声波功率150W。最佳条件下浸膏中刺五加主要酚苷及苷元的质量分数为2.923%,其中含紫丁香苷1.3%,刺五加苷E1.53%,异秦皮啶0.093%;浸膏得率为6.77%。

大孔树脂分离纯化刺五加中紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的工艺研究

目的研究大孔树脂分离纯化刺五加中紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的工艺。方法比较了4种不同类型的大孔树脂对刺五加中紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的吸附解吸性能,确定适宜的树脂类型和最佳纯化工艺条件。结果AB-8型大孔树脂对紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的吸附性能及解吸效果较好。最佳工艺条件为上样浓度:0.5 g·mL·1,吸附流速:2 BV·h·1,上样量:5 BV,洗脱剂:30%的乙醇,用量:11 BV,洗脱流速:1 BV·h·1。纯化后的终产品中紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶的含量分别为3.13%,1.82%和0.42%。结论 AB-8型大孔树脂用于同时富集紫丁香苷、刺五加苷E和异嗪皮啶效果最佳,是一种理想的分离纯化介质。

响应面法优化匀浆提取刺五加主要酚苷及苷元的工艺

采用响应面法对匀浆提取刺五加根茎原料中紫丁香苷、刺五加苷E和异秦皮啶等主要酚苷及苷元成分进行了优化。考察了匀浆提取时间、乙醇体积分数、匀浆转数和液料比等因素对提取工艺的影响,应用了Box-Behnken的实验设计,选取了3种目标产物的得率与纯度作为响应值。响应面法优化后提取工艺条件为提取时间4.04min、乙醇体积分数59.66%、匀浆转数11999.6r/min、液料比7.96:1mL/g、提取次数3次。在所确定的工艺条件下,刺五加紫丁香苷得率0.0016%,纯度0.052%;异秦皮啶得率0.018%,纯度0.68%;刺五加苷E得率0.035%,纯度1.10%。

刺五加根及根茎中紫丁香苷、刺五加苷E的提取工艺

目的:优选刺五加的最佳提取工艺。方法:采用正交设计法,以HPLC测定提取物中紫丁香苷、刺五加苷E的含量。结果:最佳提取工艺为10倍量的80%乙醇回流提取3次,每次2h。结论:该提取工艺稳定,设计合理,重现性好,可为生产实践提供理论依据。

RP-HPLC测定黄毛楤木中的紫丁香苷和刺五加苷E

研究RP-HPLC同时定量分析黄毛楤木中紫丁香苷和刺五加苷E的含量。采用色谱柱为NUCLEODUR 100-5 C18ec柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈∶水(15∶85,V/V),流速0.8mL.min-1,检测波长221nm,柱温30℃。紫丁香苷进样量在0.01364—0.15004μg范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为96.8%,RSD为2.5%(n=6);刺五加苷E进样量在0.02940—0.32340μg范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为97.9%,RSD为1.9%(n=6)。本方法操作简便,测定结果准确可靠,可同时测量黄毛楤木中紫丁香苷和刺五加苷E的含量。

HPLC法测定不同产地刺五加中原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷E和异嗪皮啶

目的建立HPLC法测定不同产地刺五加中原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷E和异嗪皮啶。方法采用Welch Materials C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈–0.1%磷酸水,梯度洗脱;体积流量为1.0 m L/min;柱温30℃;检测波长214 nm;进样体积10μL。测定结果采用主成分分析法进行分析。结果 5种成分在测定质量浓度范围内线性关系良好,r均大于0.999 9;平均回收率为99.66%~101.25%,RSD值为1.92%~3.03%;不同产地的11批刺五加中原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸、刺五加苷E和异嗪皮啶的质量分数范围分别为0.004%~0.016%、0.080%~0.152%、0.372%~0.806%、0.057%~0.103%、0.002%~0.010%。主分成分析结果显示,黑龙江产刺五加药材质量较佳。结论该方法快速、简便、准确,多成分测定的质量评价模式可用于刺五加药材的质量控制。

刺五加与短梗五加中紫丁香苷、刺五加苷E及异嗪皮啶含量比较

为比较刺五加及短梗五加样品中主要活性成分差异,选取吉林、黑龙江及辽宁等三省刺五加及短梗五加样品,利用薄层层析(TLC)法进行鉴别,并利用HPLC法测定了紫丁香苷、刺五加苷E及异嗪皮啶含量。结果表明:利用紫外灯(365 nm)显示的刺五加TLC图谱中异嗪皮啶特征条带均非常明显,短梗五加TLC图谱中异嗪皮啶特征条带不明显但存在痕迹,因此该鉴别方法可增加定量指标以保证鉴别结果的确定性。HPLC测试结果显示刺五加样品中三种功效成分含量总体较高,且紫丁香苷及异嗪皮啶平均含量均高于短梗五加样品。个别短梗五加中紫丁香苷含量达到近0.1%,而《药典》中规定紫丁香苷含量不低于0.05%,因此为防止短梗五加的混入,可在进一步深入研究基础上适当提高刺五加中紫丁香苷含量标准。

大孔吸附树脂纯化倒卵叶五加中紫丁香苷的工艺优选

目的:优选大孔吸附树脂纯化倒卵叶五加中紫丁香苷的工艺条件。方法:采用HPLC测定紫丁香苷含量,通过静态吸附-洗脱试验考察大孔树脂型号,利用单因素试验考察上样量、吸附流速、洗脱机浓度及用量对纯化工艺的影响。结果:选用XDA-1型大孔树脂,其纯化工艺条件为上样量每g树脂吸附3.5 mg紫丁香苷,吸附流速1 BV.h-1,用9 BV 40%乙醇于2BV.h-1流速洗脱,紫丁香苷纯度由5.4%提高到23.1%。结论:XDA-1型大孔树脂可用于纯化倒卵叶五加提取液,紫丁香苷收率和纯度均达满意效果。

大鼠肠道菌群对紫丁香苷体外代谢转化研究

目的观察大鼠肠道菌群对紫丁香苷的体外代谢转化作用。方法将紫丁香苷与离体大鼠肠道菌群的孵育液分别培养O、4、8、12、24、48 h后取样,经正丁醇萃取后采用HPLC和LC-MS法对代谢产物进行定性和定量分析;扩大培养24h的孵育液经正丁醇萃取后,采用ODS柱色谱和重结晶方法分离制备代谢产物NMR法鉴定其结构。结果大鼠肠道菌群对紫丁香苷具有显著的代谢转化作用。在0~48 h代谢组的孵育液中共检测到2个代谢产物芥子醇（M_1）和右旋丁香树脂酚（M_2）。12h时有81%的紫丁香苷被代谢转化,24 h时紫丁香苷已经完全被代谢转化;并且检测到12h之前的主要代谢产物为M_1,24h后的主要代谢产物为M2,且24h后未能检测到M_1。结论在离体条件下,大鼠肠道菌群可以在24h内将紫丁香苷完全代谢转化为M_1,然后再将M_1代谢转化为M_2,且8~12h内转化紫丁香苷的速率最快。

中药红毛五加化学成分的高效液相色谱/电喷雾电离/质谱/质谱(HPLC/ESI/MS2)分析

建立了中药红毛五加化学成分的HPLC/ESI/MS2定性分析方法。液相色谱条件:ZorbaxSB C18色谱柱(250mm×4 6mmi d ,5μm);乙腈 水(用冰醋酸调pH为3 0)梯度洗脱,流量0 8mL/min;柱温30℃;二极管阵列检测器(DAD),检测波长254nm。质谱条件:Agilent离子阱质谱仪;电喷雾离子(ESI)源;正离子检出模式。采用该方法得到了红毛五加的紫外(UV)色谱图、总离子流色谱图(TIC)和萃取离子色谱图(EIC),以及相应色谱峰的EIC/MS2的质谱图,对其进行解析,鉴别出红毛五加中的鸟苷、腺苷和紫丁香树脂苷成分。方法简便、快捷和准确。

刺五加注射液在正常大鼠与脑缺血-再灌注损伤疾病大鼠体内药动学比较

目的比较刺五加注射液(紫丁香苷、刺五加苷E、异嗪皮啶等)在正常大鼠与脑缺血-再灌注损伤大鼠体内药代动力学行为。方法采用longa法建立大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤疾病模型,采用液相色谱-串联四级杆质谱法测定不同时间点大鼠血浆中紫丁香苷、刺五加苷E及异嗪皮啶的含有量,用药代动力学软件DAS 2.0非房室模型计算药动学参数并用统计软件SPSS 17.0对主要药动学参数进行比较。结果与正常大鼠体内药动学相比较,脑缺血-再灌注损伤对刺五加注射液中紫丁香苷产生蓄积,对异嗪皮啶的消除发生改变,对刺五加苷E无影响。结论初步推测脑缺血-再灌注损伤大鼠体内,紫丁香苷及异嗪皮啶与血浆蛋白结合能力发生改变,有待进一步研究。

桑叶中性部位一种化学成分分离鉴定

目的:利用现代色谱技术和光谱方法,研究桑叶中性部位的微量化学成分。方法:通过溶剂提取;采用硅胶、大孔吸附树脂、亲脂性凝胶(Lipophilic Sephadex LH-20)、制备液相等多种柱色谱方法分离化学成分;理化性质及UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR、MS及ESI-HR-MS等光谱技术鉴定结构,对桑叶中性部位化学成分进行了研究。结果:从中分离得到八个化合物,本文鉴定了其中一个为(+)-紫丁香树脂酚-O-β-D-葡萄糖苷。结论:化合物(+)-紫丁香树脂酚-O-β-D-葡萄糖苷为首次从桑属植物中分离得到。