La(Ⅲ)、Eu(Ⅲ)与HBED配合的紫外差光谱研究

在０．０１ｍｏｌ· Ｌ－１Ｎ－２－羟乙基哌嗪－Ｎ’－２－乙磺酸（Ｈｅｐｅｓ）， ｐＨ ７．４，室温条件下，用紫外差光谱滴定观察了Ｌａ（Ⅲ），Ｅｕ（Ⅲ）与Ｎ，Ｎ’－二（２－羟苄基）乙二胺－Ｎ，Ｎ’－二乙酸（ＨＢＥＤ）的结合。Ｌａ（Ⅲ），Ｅｕ（Ⅲ）与ＨＢＥＤ的结合均形成 １： ｌ的配合物，其紫外差光谱均于２３８和２９２ｎｍ处出现吸收峰，在２３８ｎｍ处配合物Ｌａ－ＨＢＥＤ与Ｅｕ－ＨＢＥＤ的摩尔吸光系数分别为：εＬａ＝（９．８２±０．２４）× １０３ｃｍ－１·ｍｏｌ－１，Ｌ，εＥｕ＝（ｌ６．２１ ±０．１２）× １０３ｃｍ－１·ｍｏｌ－１·Ｌ；配合物Ｌａ－ＨＢＥＤ与Ｅｕ－ＨＢＥＤ的条件稳定常数分别为：ｌｇＫＬａ－ＨＢＥＤ＝１１．５２±０．２２，ｌｇＫＥｕ－ＨＢＥＤ＝１４．１６±０．３８，符合线性自由能关系。人血清脱铁转铁蛋白和Ｅｕ （Ⅲ）结合的紫外差光谱与ＨＢＥＤ和ＥＵ （Ⅲ）结合的紫外差光谱相似，只是最大吸收峰红移至 ３４５和 ２９６ｎｍ，脱铁转铁蛋白不能与 Ｌａ（Ⅲ）结合。

铝(Ⅲ)与脱铁伴清蛋白结合的紫外差光谱研究

在 pH7.4、 0.1mol· L^(－1)N-2-羟乙基哌嗪- N′-2-乙磺酸（ Hepes）及室温条件下，使用紫外吸收差光谱进行了铝(Ⅲ)对脱铁伴清蛋白的滴定。结果表明铝(Ⅲ)与脱铁伴清蛋白结合后其紫外差光谱在 238nm和 291nm处出现吸收峰。在 238nm处铝(Ⅲ)-脱铁伴清蛋白配合物的摩尔吸光系数是 (1.52± 0.04)× 10~4cm^(－1)· mol^(－1)· L。铝(Ⅲ)可占据脱铁伴清蛋白的两个金属离子结合部位，条件稳定常数是 lgK_N=11.21± 0.12,lgKC=9.53± 0.24。 N-端单铁伴清蛋白的紫外差光谱滴定表明，铝 ?优先占据脱铁伴清蛋白的 N端结合部位。

稀土离子与伴清蛋白结合的紫外差光谱研究

在ｐＨ７．４ ，２５ ℃的条件下， 使用紫外吸收差光谱进行了Ｅｕ３＋ ，Ｔｂ３＋ ，Ｌｕ３＋ 对脱铁伴清蛋白的滴定。结果表明， 稀土离子与脱铁伴清蛋白结合后其差光谱均在２４４ 和２９４ ｎｍ 处给出吸收峰， 在２４４ ｎｍ 处， 稀土离子脱铁伴清蛋白络合物的摩尔吸光系数相近， 约为（２．１ ±０．１） ×１０４ ｃｍ －１·ｍｏｌ－ １·Ｌ；稀土离子可占据脱铁伴清蛋白的两个金属离子结合部位， 但优先占据脱铁伴清蛋白的Ｎ端结合部位。Ｃ端结合部位与稀土离子的结合量受ＣＯ２ －３ 浓度及离子半径的影响， 离子半径越大、ＣＯ２－３ 浓度越高，稀土离子在该部位的结合量越少。

EHPG与Pb（Ⅱ）结合的紫外差光谱研究

在pH7．4,0．1mol·L^-1Hepes缓冲溶液及室温条件下，使用紫外吸收差光谱进行了Pb（Ⅱ）对N，N’-乙烯-二[2～（2-羟基苯基）苷氨酸]（EHPG）的滴定。结果表明Ph（Ⅱ）与EHPG形成1：1的配合物。Pb（Ⅱ）与EHPG结合后其紫外差光谱在245nm和291nm处出现吸收峰；配合物在291nm的摩尔吸光系数是1．78×10^3cm^-1·mol^-1·L；条件稳定常数是1gK=12．51±0．32。

酸度对模拟转铁蛋白小分子紫外差光谱的影响

通过观察酸度对模拟转铁蛋白小分子EHPG和HBED紫外差光谱的影响,结合脱铁伴清蛋白与金属离子、阴离子结合的光谱特性,推断脱铁伴清蛋白与金属离子的结合导致金属离子结合位点处酪氨酸酚羟基的去质子化,而与阴离子的结合导致阴离子结合位点处酪氨酸酚羟基的质子化。

Cp_2TiCl_2与脱铁伴清蛋白作用的紫外差光谱

在 4mmol·L-1NaH2 PO4- 10 0mmol·L-1NaCl- 2 5mmol·L-1NaHCO3 缓冲溶液 (pH =7.4 )和 2 98K条件下 ,用紫外差光谱研究了Cp2 TiCl2 与脱铁伴清蛋白的作用。结果表明Cp2 TiCl2 与脱铁伴清蛋白形成了 2 :1的配合物。

卵清溶菌酶激话剂的研究Ⅱ——溶菌酶与激活剂LIA,底物相互作用的紫外差光谱

紫外差光谱是研究蛋白质在溶液中构象的有用工具,能揭示蛋白质中多种生色的氨基酸残基的存在和状态,并广泛用于多种酶类的必要基团、作用机理、过液态的存在等多方面的研究。前报I已证明,激活剂LIA能显著提高溶菌酶的活力,且是以无竞争的方式,随机地与溶菌酶结合的机理使其催化能力成倍地提高。显然,激活剂的加入使溶菌酶的结构,特别是在溶液中的空间构象发生了有利于催化作用的变化。为了弄清LIA诱导的溶菌酶构象的变化及在激活作用中所涉及的分子机理,我们进一步探索了溶菌酶与激活剂,底物相互作用的紫外差光谱。

EHPG与铝(Ⅲ)结合的光谱研究

在 pH 7 4 ,0 1mol·L- 1 N 2 羟乙基哌嗪 N′ 2 乙磺酸 (Hepes)及室温条件下 ,使用紫外吸收差光谱和荧光光谱进行了铝 (Ⅲ )对N ,N′ 乙烯 二 [2 (2 羟基苯基 )苷氨酸 ](EHPG)的滴定。结果表明铝 (Ⅲ )与EH PG形成 1∶1的配合物。铝 (Ⅲ )与EHPG结合后其紫外差光谱在 2 35和 2 91nm处出现吸收峰 ;配合物在 2 35nm的摩尔吸光系数是 1 2 7× 10 4 cm- 1 ·mol- 1 ·L ;条件稳定常数是lgK =14 2 0± 0 0 3;铝 (Ⅲ )对EHPG的荧光猝灭是由于EHPG的酚羟基质子解离并与铝 (Ⅲ )配合而引起的。

Yb(Ⅲ)、Gd(Ⅲ)与EHPG配合物的光谱研究

在0.01mol·LN-2-羟乙基哌嗪-N'-2-乙磺酸(Hepes),pH7.4和室温条件下,应用荧光光谱和紫外差光谱研究了Yb?,Gd?与N-N'-乙烯-二犤2-(2-羟基苯基)甘氨酸犦(EHPG)的配合反应。结果表明,随着稀土离子Yb?或Gd?的不断滴加,EHPG在310nm处的最大荧光峰强度逐渐降低,而其紫外差光谱在238和292nm处的吸收峰逐渐增强,当稀土离子Yb?或Gd?达到一定量时,310nm处的荧光强度、238和292nm处的吸收峰强度不再发生变化,实验证明Yb?或Gd?与EHPG结合形成1∶1的配合物;在238nm处配合物Yb-EHPG和Gd-EHPG的摩尔吸光系数分别为:ΔεYb=(22.35±0.13)×103cm-1·mol-1·L,ΔεGd=(21.64±0.28)×103cm-1·mol-1·L;条件稳定常数分别是:lgKYb-EHPG=15.67±0.13,lgKGd-EHPG=13.21±0.23,符合线性自由能关系。Yb?或Gd?与脱铁伴清蛋白(apoOTf)的结合导致蛋白质荧光有18%的猝灭。

Lu(Ⅲ)与HBED,EHPG结合的光谱研究

在pH7.4、0.01mol·L-1Hepes及室温条件下,通过监测215～330nm范围内紫外差光谱的变化进行了Lu(Ⅲ)对N,N′ 二(2 羟苄基)乙二胺 N,N′ 二乙酸(HBED)、N,N′ 乙烯 二(2 羟基苄基)苷氨酸(EHPG)的滴定。结果表明:两者的紫外差光谱非常相似,均于238和292nm处出现最大吸收峰,且随着Lu(Ⅲ)的滴加,吸收峰强度逐渐增大。238nm处的滴定曲线表明:Lu(Ⅲ)与HBED、EHPG均形成1∶1的稳定配合物,配合物Lu(Ⅲ) HBED与Lu(Ⅲ) EHPG的摩尔吸光系数分别为:ΔεLu-HBED=(16.01±0.38)×103cm-1·mol-1·L,ΔεLu-EHPG=(16.99±0.56)×103cm-1·mol-1·L;条件稳定常数分别为:lgKLu-HBED=16.58±0.13,lgKLu-EHPG=15.56±0.20。同样实验条件下,荧光光谱测定表明:配体HBED、EHPG均在310nm处有最大荧光峰,配合物Lu(Ⅲ) HBED、Lu(Ⅲ) EHPG的形成都使其最大荧光峰红移,Lu(Ⅲ) HBED的形成使HBED的荧光增强约2.3倍,而Lu(Ⅲ) EHPG的形成却使EHPG的荧光有约65%的淬灭。

VB6与不同CopC作用的光谱研究

于室温下,在10 mmol/L Hepes缓冲溶液(pH=7.4)中,通过紫外差光谱和荧光光谱法研究了apoCopC和CuN-CopC与Ag+的结合性质,进一步研究了apoCopC,CuN-CopC,CopC-AgC和CuN-CopC-AgC与Vitamin B6作用的超分子行为.结果表明,在apoCopC和CuN-CopC与Ag+的摩尔比为1∶1时,Ag+可以占据apoCopC和CuN-CopC的Cu+结合位点,结合常数分别为(1.88±0.68)×106和9.61×107L/mol.apoCopC结合不同的金属离子后,与Vitamin B6的结合位点数明显减少.

Ga(Ⅲ)与EHPG配合反应的光谱研究

在0.1mol/LpH7.2,Tris-HCl缓冲溶液和室温条件下,用荧光光谱和紫外差光谱研究了Ga3+与N,N′-乙烯-二[2-(2-羟基苯基)甘氨酸](EHPG)的配合反应。结果表明:Ga3+与EHPG的配位比为1/1。随着Ga3+的不断滴加,EHPG的荧光光谱在310nm处的最大荧光峰强度逐渐降低,其紫外差光谱在240nm和293nm处的吸收峰逐渐增强。当Ga3+达到一定量时,310nm处的荧光强度、紫外光谱中240nm和293nm处的吸收峰强度不再发生变化。通过计算可得:在240nm处配合物Ga-EHPG的摩尔吸光系数为ε=5.41×103L.mol-1.cm-1,条件稳定常数为lgKGa-EHPG=22.83。

Mn(Ⅱ)与EHPG结合的光谱研究

在pH7.4,0.05mol·L-1N-2-羟乙基哌嗪-N’-2-乙磺酸(Hepes)及室温条件下,用荧光光谱和紫外吸收差光谱进行了Mn(Ⅱ)与N,N’-乙烯-二[2-(2-羟基苯基)甘氨酸](EHPG)相互作用的研究。结果表明,Mn(Ⅱ)对EHPG荧光的猝灭为静态猝灭,Mn(Ⅱ)与EHPG形成1∶1的配合物,条件解离常数KD为1.43×10-5。紫外吸收差光谱表明,随着Mn(Ⅱ)的不断滴加其紫外差光谱在238和291nm处吸收峰逐渐增强。经计算配合物的ε238nm为(1.31±0.02)×104cm-1.mol-1·L,条件解离常数KD为(1.36±0.21)×10-5。与荧光光谱结果一致且均表明Mn(Ⅱ)与EHPG结合比较弱。

稀土离子和钙调蛋白重组的紫外差光谱及电泳研究

对稀土的生物学效应研究表明,稀土元素能促进农作物的生长,增加产量;稀土在一定的浓度下对动物组织具有一定的毒性.目前对稀土在生物体中的作用机理还不很清楚,许多学者认为,稀土离子(Ln^(3+)在生物体内与拮抗Ca^(2+)有关.钙调蛋白(CaM)是一种动植物中普遍存在的非常重要的钙离子受体,它能调节多种酶的活性(如,环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATPase、等).这预示着 Ln^(3+)与CaM之间存在着一定的关系.CaM不含色氨酸,它有5条精细的特征峰结构(253,259,265,269,277nm).紫外光谱滴定实验表明,猪脑CaM的两个Tyr残基位于不同的环境:Tyr-99位于分子表面,Tyr-138埋藏于分子内部.Yazawa等发现Ca^(2+)由于影响了CaM中Tyr-138的环境而诱导了286nm负的差谱.本文利用了紫外差光谱法(测定蛋白质在两种环境下的吸收度差)来研究Ln^(3+)对CaM的构象影响.此外,还采用PAGE活性电泳以及SDS-PAGE方法来研究Ln^(3+)和CaM的重组.结果表明.Ln^(3+)与CaM的结合所引起的构象变化与Ca^(2+)的相类似.Ln^(3+)结合CaM后导致CaM的C末端的两个Tyr残基(Try-99,Tyr-138)环境变得更加亲水,明显显示出286nm和279nm负的差谱.由其离子滴定引起这2个差谱的变化大小推测Ln^(3+)能与脱钙CaM(Apo-CaM)的钙结合位点结合.其第1个Ln~(

紫外分光光度法测定酮康唑胶囊的含量

酮康唑为一种抗真菌药,收载于部颁标准。原料药与胶囊剂的含量测定均为非水电位滴定法。该法受温度影响较大,且醋酸、高氯酸均具有一定刺激性。现利用酮康唑在紫外区有较强的吸收峰,改用紫外分光光度法测定其胶囊的含量。该法操作简便、快速、重现性好。 1 仪器、样品与试剂 UV—250型分光光度计(日本岛津);酮康唑对照品(南京第二制药厂提供);

紫外分光光度法测定盐酸吗啉胍片的含量

盐酸吗啉胍为抗病毒药,其片剂的含量测定按有关标准采用非水溶液酸碱滴定法。非水法有机溶媒的刺激性较强、终点较难掌握等缺点。本文根据盐酸吗啉胍水溶液在237±lnm波长处有最大吸收的特点,采用紫外分光光度法测定其片剂的含量,结果满意,可推荐为生产时的内控方法。现介绍如下。 1 仪器与试药 仪器:日本岛津UV—260型分光光度计;

酯键型鹅去氧胆酸分子钳对氨基酸甲酯的手性识别

利用紫外可见光谱差光谱滴定法考察了新型鹅去氧胆酸分子钳 1～ 6对D/L氨基酸甲酯的对映选择性识别性能。结果表明 ,分子钳 1～ 6对所考察的氨基酸甲酯均具有识别能力 ,其对D -氨基酸甲酯的识别优于对L -氨基酸甲酯的识别。受体与底物间的大小、形状匹配 ,微环境效应等对识别性能均有重要影响。识别作用的主要推动力来自受体与底物之间的互补氢键 ,受体与底物芳环之间的π

火菇素酪氨酸微区的研究

用紫外差光谱和荧光光谱技术对火菇素的酪氨酸微区进行了研究,结果表明火菇素表现典型的酪氨酸残基紫外275nm吸收峰,ε_(max)=20322L·mol^(-1)·cm^(-1),紫外差光谱滴定发现,当10.1<pH<12.5时,差光谱吸收△A_(294.4nm)与pH变化相关性明显,其酪氨酸表观离解常数pK_a＇=11.4.荧光研究表明,火菇素不含色氨酸而只表现出酪氨酸荧光,在激发波长为280nm时最大发射波长为305nm,pH和SDS对其荧光性质有较大的影响;KI几乎不能猝灭火菇素的荧光,丙烯酰胺是其强猝灭剂.研究表明,酪氨酸残基位于火菇素的疏水内核,在火菇素分子中酪氨酸残基和其它疏水氨基酸残基形成疏水微区,疏水微区结构比较稳定.

新型手性酪氨酸修饰的锌卟啉对氨基酸酯的分子识别研究

合成并表征了一种L型Boc酪氨酸修饰的自由卟啉(LBocTyrTAPP)及其锌卟啉配合物Zn(LBocTyr)TAPP.通过紫外-可见光谱滴定法,研究了手性锌卟啉配合物与四对对映异构的手性氨基酸酯客体在CHCI3中的分子识别行为.实验结果表明,在分子识别的过程中,缔合常数顺序均为D型略大于L型,且按K(PheOMe)>K(AIaOMe)>K(ValOMe)>K(LeuOMe)的顺序依次减小.同时,利用园二色光谱进一步阐述手性分子识别过程.此外,采用分子力学方法搜索了主客体体系的最低能量构象,从理论上对实验本质进行较深入的探讨.

酰胺类除草剂与脲酶的相互作用机制研究

应用紫外差光谱和荧光光谱法研究了水溶液中酰胺类除草剂乙草胺、丙草胺、丁草胺、异丙甲草胺与脲酶分子间的相互作用.结果表明,随着除草剂浓度的增加(0.0～1.6μmol/L),脲酶的紫外吸收光谱发生红移,吸收强度减弱.除草剂对脲酶的荧光均有猝灭作用,且静态猝灭是引起脲酶荧光猝灭的主要原因.从荧光猝灭结果求出除草剂和脲酶的结合常数及结合位点数:乙草胺K=1.17×103L/mol,n=0.81;丙草胺K=1.46×102L/mol,n=0.67;丁草胺K=2.29×101L/mol,n=0.50;异丙甲草胺K=1.49×103L/mol,n=0.84.