应用酶联—紫外连续监测法进行丙氨酸转氨酶活力测定

血清丙氨酸转氨酶(aLanine aminotrarshrase)的活力测定．对于肝脏病诊断及病情观察均有一定意义。我们自1992年应用酶促反应动力学的有关理论，以酶联—紫外连续监测法（即速率法)测定丙氨酸转酶得到了满意的效果。该法具有快速、结果准确、重复性好等优点。是目前较理想的测定方法。现介绍如下。

脲酶和亮氨酸脱氢酶偶联法动力学测定血清或尿液中尿素

目的 建立适合于自动化分析血清和尿液尿素的脲酶和亮氨酸脱氢酶偶联的连续监测法。方法 对pH、2 酮基异乙烯酸钠、亮氨酸脱氢酶和脲酶浓度等反应条件进行实验研究 ,并对建立的方法进行评价。结果 用双试剂连续监测法 ,试剂Ⅰ :10 0mmol/LN ,N 二乙醇胺基乙酸缓冲液 (pH 8.80 ) ,含 2 酮基异乙烯酸钠 3.0mmol/L、NADH 0 .3mmol/L、亮氨酸脱氢酶 2 .0kU/L。试剂Ⅱ :试剂Ⅰ中加入脲酶 70kU/L。本法线性范围血清 0 .5～ 15 0mmol/L ,尿液 8.0～ 6 5 0mmol/L。血清和尿液的平均回收率分别为 10 2 .1%和 10 1.5 %。血清批内和批间平均CV分别为 1.0 2 %和 1.70 % ;尿液批内平均CV为 1.98%。本法 (Y)和脲酶偶联谷氨酸脱氢酶法 (X)对比相关良好 (血清Y =0 .992X +0 .0 4 0 ,r=0 .993;尿液Y =0 .990X +0 .6 1,r=0 .991)。胆红素 <32 5 μmol/L、血红蛋白 <5g/L、抗坏血酸 <80 0 μmol/L、三酰甘油 (TG) <7.5mmol/L和NH+ 4 <0 .5mmol/L对测定无明显干扰。结论 本法简便、准确、线性范围广 ,可用于常规自动分析。

连续监测法测定腺苷脱氨酶

目的 建立连续监测法测定腺苷脱氨酶的方法。方法 用连续监测法对pH值、腺苷浓度等反应条件进行实验研究 ,并对所建立的方法进行评价。结果 用双试剂连续监测法 ;试剂Ⅰ :含α 酮戊二酸 6mmol/L ,NADH 0 .35mmol/L ,ADP 0 .8mmol/L ,EDTA Na2 0 .1mmol/L ,谷氨酸脱氢酶 10 0 0U/L ;试剂Ⅱ :腺苷 12mmol/L ;均用磷酸盐缓冲液 (0 1mol/L) ;pH 7 2。线性范围达97U/L ,批内CV =4.90 % ,批间CV =6 .5 3%。与波氏显色法有良好的相关性 (r=0 .990 2 )。结论 本法操作简便 ,结果准确 ,可用于常规分析。

丙酮酸氧化酶偶联法测定血清丙氨酸氨基转移酶的效果评价

应用手工测定血清丙氨酸氨基转移酶的丙酮酸氧化酶偶联比色法,并对其实用价值作了评价。本法具有操作简便快速、准确性、重复性好等优点。该法与紫外酶偶联连续监测法比较,相关系数r=0.987。精密度批内CV％<3.1、批间CV％<5.6。ALT活性在250U/L以内线性良好。

血清尿素参考方法的建立以及临床常用试剂盒的比对研究

目的建立血清尿素测定的酶偶联平衡的参考方法(紫外分光光度法),对此方法进行性能验证,并评价4种临床常用的试剂盒是否可以接受。方法以美国CDC推荐的血清尿素酶偶联平衡候选参考方法为依据建立本实验的参考方法;通过测定标准物质(SRM909b),以及参加RELA-2009比对实验(ring-tiral),来验证参考方法的准确性;按CLSI《EP9-A2》要求,以酶偶联平衡参考方法作为比对方法,4种临床常用的检测试剂盒为待评方法,对40份血清样品的结果进行分析比较。结果用酶偶联平衡参考方法测定SRM909b水平1和2,与靶值的偏倚分别为2.19%,0.24%;参加参考实验室国际比对,血清尿素结果在可接受范围内;4种常用的试剂盒在医学决定点(Xc=9.64 mmol/L)预期偏差的95%可信区间值在实验室定义的可接受偏差(4.5%)范围内,也在生物学变异的可接受偏差(5.5%)范围内。结论本室已建立并验证了血清尿素测定的酶偶联平衡参考方法;4种常用血清尿素试剂盒的测定结果与参考方法的测定结果存在差异,但误差在临床可接受范围。

CPK,AST测定在治疗心肌梗塞病的影响因素

CPK,AST广泛的存在于全身各种器官或组织中,尤其以心肌、肝脏含量特别丰富。在心肌梗塞患者的血清中可见此两种酶的升高,是临床诊治心肌梗塞的重要生化指标。但是在应用酶偶联连续监测法做CPK,AST的过程中,有些患者在应用尿激酶治疗前后,CPK,AST的测定结果有一定的变化,今报告5例如下: 材料和方法 1、检测对象:心肌梗塞患者血清。