紫孢侧耳培养条件的优化研究

紫孢侧耳是食药兼用真菌,营养丰富且具有多种药用功效,为了进一步开发这一自然资源,通过单因素试验和正交试验对实验室保存的一株紫孢侧耳菌种进行生长特性研究,确定培养基的最佳配方。结果表明,在6种供试碳源中,紫孢侧耳菌丝以利用多糖即淀粉生长最好,淀粉最佳添加量为20 g·L^(-1);在6种供试氮源中,菌丝在有机氮源中的长势更好,其中以添加酵母浸粉的长势最佳,酵母浸粉最佳添加量为8 g·L^(-1);MgSO4添加量对菌丝的生长影响较小,则MgSO4最适添加量为0.2 g·L^(-1);KH2PO4添加量对菌丝的生长影响不显著,则KH2PO4添加量为0.5 g·L^(-1);菌丝在pH5~9范围内均能正常生长,最适pH为7。

紫孢侧耳栽培期基质中纤维素类的降解和有关酶活的变化

以棉籽壳为基质栽培紫孢侧耳（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｓａｐｉｄｕｓ），分别在菌丝长满期、菇蕾期、一茬菇和二茬菇时测定培养料中纤维素和半纤维素含量的变化以及纤维素酶（ＣＭＣ酶）和半纤维素酶活性的变化。结果表明：从接种到一茬菇时期，纤维素酶、半纤维素酶活不断升高，此后，迅速降低；基质中两种酶的底物含量降低速度以菇蕾一一茬菇时最大。菇蕾期后，两种底物的减少量多，菇蕾期以前较少。菇蕾期以前半纤维素降解稍多，菇蕾期以后纤维素降解较多。

紫孢侧耳、糙皮侧耳及其融合菌株的同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳方法对紫孢侧耳、糙皮侧耳及其融合菌株的酯酶和过氧化物酶同工酶进行了分析。经多次试验，得到了两亲株和融合株恒定的同工酶谱，在酶谱中融合菌株与亲株有明显差异，并表现出典型的双亲株互补酶带特征，从而证实融合菌株为两亲株基因重组之产物。

紫孢侧耳多糖的提取、纯化及性质的研究

从紫孢侧耳［Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｃｏｒｎｕｃｏｐｉａｅ（Ｐａｕｌ：Ｐｅｒｓ．）Ｒｏｌ．］子实体中加微量酶提取水溶性多糖．经脱蛋白，ＣＭ—纤维素层析柱分离纯化，得到２个组分多糖：ＰＣ—Ⅰ和ＰＣ—Ⅱ．层析分离后，用醋酸纤维薄膜和聚丙烯酰胺电泳鉴定均为单一组分．红外吸收光谱分析，ＰＣ—Ⅰ为β－糖苷键型，ＰＣ—Ⅱ为α－糖苷键型．两组分多糖经淀粉酶、纤维素酶和果胶酶混合液（３∶３∶１）酶解后，进行硅胶薄层分析，并与气相色谱的分析结果相比较，确定ＰＣ—Ⅰ其单糖成分为葡萄糖、甘露糖和阿拉伯糖（摩尔比为：３．５∶１４∶２．３）．ＰＣ—Ⅱ其单糖成分为：葡萄糖、阿拉伯糖和木糖（摩尔比为：４．１∶１．８∶２．

野生紫孢侧耳生物学特性及驯化研究

本文对野生紫孢侧耳的生物学特性、驯化、栽培进行了观察和研究,初步给出其生长、栽培与有关环境因子的关系。

紫孢侧耳营养成分研究

作者对紫孢侧耳子实体进行了分析，结果表明：其中含有人体必需的热源物质─－碳水化合物、粗脂肪等，尚含有十分丰富的微量元素。

紫孢侧耳粗多糖对实验动物血脂和免疫功能的影响

目的探讨紫孢侧耳粗多糖对高血脂大鼠血清总胆固醇、甘油三酯的影响及对小鼠免疫功能的影响。方法采用高脂模型,观察各剂量组对高脂大鼠血清总胆固醇、甘油三酯的影响;采用吞噬中性红法,以小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,观察不同剂量组对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。结果紫孢侧耳粗多糖中剂量能明显降低高脂大鼠血清总胆固醇、甘油三酯水平;紫孢侧耳粗多糖中高剂量组可提高腹腔巨噬细胞吞噬功能。结论紫孢侧耳粗多糖具有降低高血脂大鼠血脂的作用;能够增强小鼠非特异性免疫功能,并随剂量大小有变化。

深层培养紫孢侧耳菌丝体的研究

本文报产季紫孢侧耳深层培养过程中，４种不同碳源、氮源组成的合成液体培养基的３＾４正交实验结果，当合成液体培养基的Ｃ／Ｎ为１８．６５，ｐＨ６．０、温度３０℃，１８０ｒ／ｍｉｎ时，供试菌株的菌丝体干重为１．８２５ｇ／１００ｍｌ。菌丝体粗蛋白含量为３４．１４％，氨基酸总量为３１．５４％。

紫孢侧耳子实体组织的TTC─脱氢酶活性

本文报道紫孢侧耳（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｓｏｐｉｄｕｓ）子实体发育过程中，菌褶组织中的ＴＴＣ─脱氢酶活性随着成熟度的增加逐渐增强，其它各结构组织中的ＴＴＣ─脱氢酶活性逐渐降低。在子实体发育的幼小阶段，菌柄、菌柄与菌盖之间组织的脱氢酶活性高于菌褶和菌肉组织中的酶活。子实体的周边和表皮组织（菌盖直径在５ｃｍ以上）中的脱氢酶活性均高于其内部各结构组织中的酶活。

稀土促进紫孢侧耳菇孢子萌发生长的研究

报道了用稀土液培养紫孢侧耳菇孢子的研究过程．研究表明，用２０ｍｇ·Ｌ－１、５０ｍｇ·Ｌ－１的稀土液培养紫孢侧耳菇孢子，明显促进孢子萌发，加速菌丝生长，防止菌种衰退变异．

紫孢侧耳的富锗研究

本文对紫孢侧耳（Ｐｌ－ｅｕｒｏｔｕｓｓａｐｉｄｕｓ）的富锗能力作了初步研究。液体深层培养和子实体栽培结果表明：紫孢侧耳具有良好的富锗能力，子实体栽培的富锗效果较好。在添加７０－１０５０ｐｐｍ锗的范围内，子实休富锗的范围为４０．５－５５３．３ｐｐｍ，吸收率均在６０％以上。

野生紫孢侧耳DW菌株生物学特性

通过野外调查及室内试验,对野生紫孢侧耳(Pleurotus cornucopiae)DW菌株的生态、形态及培养性状等生物学特性进行了研究。结果表明,该菌株耐低温,子实体丛生,菌盖肥厚,香味浓,可以在低氮培养基质上生长发育,具有较高开发利用价值;在培养条件下,该菌株菌丝生长的最适碳源是蔗糖,最适氮源是蛋白胨,最适碳氮比是100:1,最适pH值为5。

紫孢侧耳Ps-mnp1基因克隆与蛋白结构预测

克隆紫孢侧耳PS1菌株锰过氧化物酶基因Ps-mnp1,具有生物降解木质素的活性,可用于分析锰过氧化物酶的蛋白功能与结构,并对深入了解紫孢侧耳Ps-mnp1基因功能和转录调控具有重要意义。基于ITS序列分析,明确了该菌株的分类地位。根据Gen Bank中白腐菌Mn Ps保守序列设计引物,采用染色体步移法和逆转录PCR法获得Ps-mnp1基因,Gen Bank登录号为(KP189358.1)。在克隆Ps-mnp1基因并分析蛋白结构时,采用多种现代生物信息学技术,经染色体步移法克隆的DNA全长序列后,利用contigexpress拼接软件预测Psmnp1基因的c DNA全长序列;使用Bio Edit分析软件对DNA和c DNA核苷酸序列比对;通过Augustus网站预测RNA的剪接位点并在NCBI上进行同源序列比对校正;采用基因结构软件对比了解白腐菌Mn Ps基因的内含子/外显子的组成。序列分析表明Ps-mnp1的DNA全长序列1 854 bp,具有外显子14条和内含子13条。从Ps-mnp1与其它白腐菌Mn Ps基因的内含子/外显子组成分析来看,紫孢侧耳和糙皮侧耳同属于侧耳属,但它们之间的Mn Ps基因结构完全不同。Ps-mnp1开放阅读框为1 095 bp,起始密码子ATG,终止密码子TAA,编码364 aa,含有20 aa残基构成的信号肽序列。采用MEGA 5.1软件构建的蛋白系统进化树表明Ps-mnp1与6株白腐菌蛋白聚类在短枝Mn Ps,区分了含有5个二硫键组成的长枝Mn Ps组群;此外,构建的蛋白同源模型表明,与刺芹侧耳多功能过氧化物酶相似度为72.51%,蛋白配体中结合位点有1个含铁血红素、2个钙离子、1个锰离子等,这些结合位点为不守恒。该研究为紫孢侧耳锰过氧化物酶的结构,蛋白功能Ps-mnp1奠定了基础,并进一步为Ps-mnp1的蛋白质工程改造提供借鉴作用。

紫孢侧耳5.39不同发育阶段蛋白质和氨基酸含量变化

本研究表明,紫孢侧耳5.39在形态发生的不同阶段、蛋白质和氨基酸含量有显著变化。在子实体形成初期,蛋白质和氨基酸含量迅速积累,随子实体发育成熟、其含量又逐渐下降。和蛋白质比较、氨基酸的积累高峰要推迟一个生理阶段。

杨树桑黄与紫孢侧耳共培养胞内多糖提取工艺优化及抗氧化活性分析

本研究旨在探究超声波协同半仿生法提取杨树桑黄与紫孢侧耳液体共培养胞内多糖(CC-IPS)的工艺。通过单因素实验、Plackett-Burman设计和响应面设计试验,探究第1、2、3次的提取料液比、提取时间、提取温度和提取液pH这12个因素对CC-IPS提取量的影响,以DPPH和ABTS^(+)自由基清除率评价CC-IPS的体外抗氧化能力。结果表明:最佳提取工艺参数为第1、2、3次提取料液比分别为1:17、1:40、1:30(g/mL),第1、2、3次提取时间分别为31、30、30 min,第1、2、3次提取温度分别为44、40、50℃,第1、2、3次提取液pH分别为3、8、10。在此最优工艺条件下,CC-IPS提取量为86.4921±1.1924 mg/g,与预测值85.3981 mg/g接近。CCIPS对DPPH和ABTS^(+)自由基清除率的IC_(50)分别为0.2425和0.1376 mg/mL。该研究为真菌液体共培养胞内多糖的综合高效利用开发提供理论基础。

原生质体诱变选育无孢平菇

用紫外线照射紫孢侧耳（Pleurotussapidus）双核菌丝原生质体，再生后筛选生长势好的菌株，通过出菇试验得到了生产性状与紧孢侧耳一致的无孢和少孢平菇新品种．

一株野生侧耳属菌株的鉴定及生物学特性

以1株野生侧耳属菌株为试材,采用ITS序列克隆和分析,并结合传统形态学研究对其进行分类鉴定,通过单因素试验确定该菌株的生物学特性。结果表明:该野生菌株为紫孢侧耳(Pleurotus sapidus),其菌丝生长的最佳碳源为玉米粉,最佳氮源为牛肉膏,最适培养温度为30℃,最适pH 7.0。该研究为加快紫孢侧耳的推广和产业化提供了基础和种质资源。

平菇营养突变体的获得与遗传学分析

本研究以紫孢侧耳（P.sapidus）为材料，通过紫外线诱发孢子突变的方法，采用HMM基本培养基筛选突变体等技术路线，从而获得Ala-、Asp-、Ser-等几个氨基酸营养缺陷突变体．在对突变体进行同工酶检测时，发现Ala-的EST第19号带、AcpⅠ区主酶带1缺失，Ⅱ区增加4条负染色带。对双核亲本（ck）菌株和Ala-进行氨基酸测定，ck菌株和Ala-氨基酸含量分别为17．849％和35．126％，显著地高于亲本17．28％，人体必需氨基酸也显著高于ck菌株的含量。