微波辅助深共熔溶剂提取紫斑牡丹籽总黄酮的工艺优化及其抗氧化活性

目的:优化紫斑牡丹籽总黄酮的微波辅助深共熔溶剂提取方法,并探究其体外抗氧化活性。方法:以低共熔溶剂作为提取溶剂,采用微波辅助技术提取紫斑牡丹籽中的总黄酮。采用单因素实验以及响应面法进行提取工艺优化。从DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率进行总黄酮的体外抗氧化活性研究。结果:以氯化胆碱作为氢键受体,脲作为氢键供体的低共熔溶剂体系下,在摩尔比为1:3,含水量41.80%(V/V)的深共熔溶剂体系最优,料液比1:19 g/mL,微波功率为110 W,微波时间3.00 min,此时紫斑牡丹籽总黄酮得率为1.76 mg/g。当提取物总黄酮浓度在80μg/mL时,对DPPH·、羟基自由基的清除率分别为82.00%、42.10%。结论:采用微波辅助深共熔溶剂提取紫斑牡丹籽总黄酮,含量高,均具有抗氧化活性,且对DPPH自由基清除率超80%。

紫斑牡丹籽粕总黄酮纯化工艺研究

选用D101、AB-8、NKA-9型大孔树脂进行静态吸附及解析性能试验,筛选出AB-8型大孔树脂进行动态试验研究,获得了紫斑牡丹籽粕中总黄酮的最佳纯化工艺条件。结果显示,利用AB-8型大孔树脂在上样液浓度为5 mg·mL^(-1)、p H值为5、流速为3 BV·h^(-1)、上样液体积为5 BV条件下进行吸附,在洗脱液为70%乙醇、洗脱液流速为1.5 BV·h^(-1)、洗脱液体积为7 BV条件下洗脱,纯化后紫斑牡丹籽粕总黄酮含量由8.54%提高到32.36%,该工艺可行性较高,可为紫斑牡丹籽粕中总黄酮纯化提供有效理论依据。

响应面法优化紫斑牡丹籽粕总黄酮提取工艺

以乙醇浓度、提取温度、提取时间及料液比为考察因素,以总黄酮提取率为指标,通过单因素试验和响应面法对紫斑牡丹籽粕总黄酮提取工艺进行了优化。结果表明,紫斑牡丹籽粕总黄酮的最佳提取工艺为乙醇浓度67%、提取温度74℃、提取时间133 min、料液比1∶36(g∶mL)。在该工艺条件下,紫斑牡丹籽粕中总黄酮提取率达到8.63%,工艺可行性较高,可为紫斑牡丹籽粕中总黄酮提取提供有效参考依据。

紫斑牡丹籽油提取工艺的优化及脂肪酸组成的研究

以紫斑牡丹籽为原料,运用单因素和响应面中心组合设计实验(Central Composite Design,CCD),对紫斑牡丹籽油的化学提取工艺进行优化。结果表明,紫斑牡丹籽油的最佳提取时间为5.2 h、料液比1∶6.2 g/m L、温度(52±1)℃,在此条件下紫斑牡丹籽出油率可达31.36%。最佳工艺所得紫斑牡丹籽油经GC-MS分析显示共检测出18种脂肪酸,主要含有亚麻酸、亚油酸、油酸、棕榈酸,其中亚麻酸占其总脂肪酸含量的65.23%。紫斑牡丹籽油中不饱和脂肪酸含量占其脂肪酸总量的96.62%,饱和脂肪酸占其脂肪酸总量的3.38%。紫斑牡丹籽仁出油率高,不饱和脂肪酸较高,脂肪酸组成及其含量符合我国健康食用油标准。

HPLC法同时测定紫斑牡丹籽粕中4个成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定紫斑牡丹籽粕中氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酸的含量。方法:色谱柱为Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为230和258 nm;柱温为25℃;进样量为20μL。结果:氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酸对照品分别在相应的浓度范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为100.6%、99.8%、101.0%和98.5%;精密度、重复性和稳定性良好,RSD均小于3.00%。紫斑牡丹籽粕中上述4个成分的平均含量分别为0.967、3.876、25.380和1.306 mg/g,其中紫斑牡丹脱脂过程对4个成分含量的影响较小。结论:该研究建立的方法可用于紫斑牡丹籽粕综合开发利用过程中4个成分的含量测定。

紫斑牡丹籽中白藜芦醇超声提取工艺的优化研究

以白藜芦醇得率为指标,在单因素实验的基础上,采用正交实验考察提取温度、提取时间、液料质量比和乙醇浓度4个影响因素对超声提取紫斑牡丹籽中白藜芦醇的影响,优选出最佳的超声提取工艺条件。实验结果表明,超声辅助提取白藜芦醇的最佳工艺条件为提取温度70℃,作用时间30 min,液料质量比40,提取用乙醇浓度65%,提取2次。在此条件下,白藜芦醇得率为10.62 mg/g。

高效液相色谱波长切换法同时测定紫斑牡丹籽壳中6种成分含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)波长切换法同时测定紫斑牡丹籽壳中6种成分含量的方法。方法采用HPLC波长切换法同时测定紫斑牡丹籽壳中没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、白藜芦醇、木犀草素6种成分的含量。色谱柱为CAPCELLPAK C_(18)(250.0 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测器为二极管阵列检测器(DAD),检测波长分别为273,260,230,228,305,350 nm,柱温30℃,进样量10μL。结果没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、白藜芦醇、木犀草素的回归方程分别为:Y=30209X+193.54(r=0.9992),Y=16415X-118.55(r=0.9993),Y=8735.8X-5072.6(r=0.9992),Y=13658X-39219(r=0.9999),Y=82092X+25114(r=0.9990),Y=43038X+11152(r=0.9992),分别在0.2594~5.1886,0.7589~15.1782,1.2475~24.9500,11.7005~234.0093,3.3526~67.0513,2.7802~55.6032μg范围内线性关系良好;精密度、重复性、稳定性试验的RSD分别为0.7%~1.4%(n=6),0.7%~1.9%(n=6),0.5%~1.0%(n=8);平均加样回收率分别为99.87%,100.41%,99.60%,100.57%,100.29%,99.49%,RSD分别为2.0%,1.9%,1.8%,1.6%,1.8%,1.8%。结论该法具有提取简便、提取率高、重复性好、准确度高等特点,可作为紫斑牡丹籽壳中6种成分的定量分析方法。

Plackett-Burman设计结合Box-Behnken响应面法优化紫斑牡丹籽壳中低聚芪类和单萜苷类化合物的超声提取工艺

目的优化紫斑牡丹籽壳中低聚芪类和单萜苷类化合物的超声提取工艺。方法以HPLC测得的芍药苷和白藜芦醇得率为指标,采用综合评分法,在提取功率、液料比、提取温度、提取时间、乙醇浓度和提取次数6个单因素试验的基础上,通过Plackett-Burman试验从中遴选显著因素,进而采用Box-Behnken响应面法优化紫斑牡丹籽壳中低聚芪类和单萜苷类化合物的超声提取工艺。结果优化得到的超声提取工艺为乙醇浓度75%、液料比30 mL·g^(–1)、提取功率210 W、温度50.0℃、提取50 min、提取2次。在此最佳工艺下,芍药苷和白藜芦醇的得率分别为5472.43,1633.11μg·g^(–1),实测值与预测值基本相符。结论优化得到的紫斑牡丹籽壳中低聚芪类和单萜苷类化合物的超声提取工艺合理,可为其后续的应用研究提供参考。

大孔吸附树脂纯化紫斑牡丹籽中白藜芦醇的工艺研究

目的优选大孔吸附树脂纯化紫斑牡丹籽中白藜芦醇的最佳工艺。方法采用紫外可见分光光度计测定紫斑牡丹籽中白藜芦醇的含量;先从多种型号大孔吸附树脂中优选出对白藜芦醇吸附量和洗脱量均较高的树脂型号,然后对选取的树脂进行工艺研究,分别考察上柱液浓度、pH、流速对吸附效果的影响和洗脱剂体积分数、流速对洗脱效果的影响,并对相应因素进行优化。结果白藜芦醇的回归方程为A=0.1418C-0.0153(R2=0.9998),表明白藜芦醇在0.9~7.2μg/mL范围内具有良好的线性关系。通过静态和动态吸附解析试验,优选出最佳型号大孔吸附树脂为HPD-100,得到最佳型号纯化工艺为:上柱液白藜芦醇质量浓度0.7~0.8 mg/mL,pH 7,流速2 BV/h,洗脱剂乙醇体积分数60%,洗脱剂流速1 BV/h;在此工艺条件下,经纯化后的产品纯度达29.96%,较提取液粗产品的纯度提高了18.3倍。结论该工艺成本低,对白藜芦醇得到了显著富集,为后续的进一步纯化打下了基础,也为充分开发紫斑牡丹籽资源提供了科学依据。