和厚朴酚逆转非小细胞肺癌紫杉醇耐药的作用及机制

目的探讨中药厚朴的有效单体成分和厚朴酚对非小细胞肺癌紫杉醇(paclitaxel,PTX)耐药性的逆转作用及可能机制。方法以非小细胞肺癌细胞株A549和PTX耐药细胞株A549T作为研究对象,分为空白对照组、和厚朴酚组、紫杉醇组、和厚朴酚+紫杉醇组,和厚朴酚组、紫杉醇组分别使用一定浓度的药物干预细胞,和厚朴酚+紫杉醇组使用两种药物联合干预细胞,空白对照组不干预。通过MTT实验、流式细胞术、细胞免疫荧光实验及Western Blot免疫印迹实验,观察和厚朴酚对A549T细胞株紫杉醇耐药性的影响。结果和厚朴酚联合紫杉醇干预体外培养的A549T细胞时,细胞存活率较对照组显著降低;和厚朴酚干预体外培养的A549T后,与对照组相比,G2/M期细胞数量增加,细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达水平降低。结论和厚朴酚能逆转体外培养的A549T细胞的紫杉醇耐药性,其机制与抑制P-gp蛋白的表达,减少药物外排有关。

和厚朴酚对肺癌细胞紫杉醇耐药的逆转作用及对Notch信号通路的影响

目的探究和厚朴酚对肺癌细胞紫杉醇耐药的逆转作用及对Notch信号通路的影响。方法以不同浓度和厚朴酚(0、10、20、30、40、50μmol/L)联合5 nmol/L紫杉醇处理紫杉醇耐药的肺癌细胞(A549/Taxol),采用MTT检测细胞存活率,筛选试验浓度。再将A450/Taxol细胞分为对照组、紫杉醇组、和厚朴酚+紫杉醇组和Notch信号通路激活剂(Jagged1/FC)组,检测各组细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕实验检测细胞迁移,并采用Western Blotting法检测细胞增殖、凋亡、迁移相关蛋白及Notch信号通路蛋白表达。结果5 nmol/L紫杉醇与20、30、40、50μmol/L和厚朴酚联用时,细胞存活率明显降低,其中30μmol/L和厚朴酚抑制效果最佳,选用此浓度进行后续实验;与紫杉醇组比较,和厚朴酚+紫杉醇组细胞存活率、细胞迁移能力降低,细胞凋亡率升高,c-Myc、Cyclin D1、N-cadherin、Vimentin、Notch1、Jagged1和Hes1表达下调,cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9和E-cadherin表达上调(P<0.05);但加入Jagged1/FC后可逆转上述作用(P<0.05)。结论和厚朴酚对肺癌细胞紫杉醇耐药具有逆转作用,可增强紫杉醇对A549/Taxol细胞增殖、凋亡及迁移的影响,可能与阻滞Notch信号通路有关。

紫杉醇和丹皮酚在胶质瘤治疗中的联合抗肿瘤作用

目的探讨分析紫杉醇(Ptx)和丹皮酚(Pae)在胶质瘤治疗中的联合抗肿瘤效果。方法本研究主要采取细胞培养、噻唑蓝(MTT)试验、DAPI染色、细胞流式术等手段,探究通过联合丹皮酚、紫杉醇化疗,能否增强紫杉醇的化疗作用,并减少紫杉醇的化疗剂量,进而减轻其副作用;同时分析Ptx和Pae的协同抗肿瘤作用机制。结果Ptx、Pae两药合用对U87细胞增殖的抑制作用呈剂量依赖性,且不同浓度的Ptx与Pae(125μg/ml)联用时,各浓度组细胞存活率均比单独使用Ptx组显著减少,差异有统计学意义(P<0.05)。表明,Pae协同Ptx促进细胞凋亡可能通过细胞活性氧机制来完成,且Pae协同Ptx可促进细胞ROS的产生及细胞蛋白激酶AKT的磷酸化,并抑制肿瘤的生长。结论Pae能进一步增强Ptx针对胶质瘤细胞的抗肿瘤活性,且Pae联合Ptx主要通过细胞活性氧机制来促进细胞凋亡。

茶多酚并紫杉醇对食管癌Eca-109细胞增殖与凋亡影响

目的探讨茶多酚(TP)、紫杉醇(Paclitaxel)抑制食管癌Eca-109细胞生长、诱导细胞凋亡的作用及其可能机制。方法取对数生长期的Eca-109细胞,分为TP组、Paclitaxel组、两药联合组,分别加入100μL含不同浓度TP(125、250、500、1 000mg/L)、Paclitaxel(0.2、1.0、5.0、25.0mg/L)及TP+Paclitaxe(500mg/L TP+1mg/L Paclitaxel)的培养液,并设立阴性对照组、空白对照组,置于培养箱中避光培养12、24、48h。应用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率的变化,显微镜观察细胞形态的变化,RT-PCR方法检测细胞凋亡相关调节基因Caspase-3的表达。结果不同浓度、不同作用时间TP组、Paclitaxel组细胞增殖抑制率差异有显著性(F=134.46～423.75,P<0.05)。两药联合组细胞的抑制率明显高于TP组、Paclitaxel组(q=8.63～26.96,P<0.05)。TP组、Paclitaxel组及两药联合组诱导24h的Eca-109细胞G1期细胞比例均高于对照组(F=54.52,q=5.39～17.53,P<0.05);与TP组、Paclitaxel组比较,两药联合组诱导Eca-109细胞凋亡率增高(F=446.82,q=16.27、31.64,P<0.05)。培养12h后,两药联合组Eca-109细胞Caspase-3mRNA表达较TP组、Pa-clitaxel组分别增高17.22%、11.63%(F=108.33,q=30.37、20.52,P<0.05)。结论 TP、Paclitaxel能抑制Eca-109细胞生长、诱导细胞凋亡,使细胞周期阻滞在G1期的比例增高;两药联合其作用更明显,其机制可能与Caspase-3mRNA表达增高有关。

紫杉酚纳米纤维对肿瘤生长和新陈代谢的抑制作用

水凝胶分子在药物靶向制剂方面具有广阔的应用前景。为此,主要对常用抗癌药紫杉酚制备水凝胶分子进行研究。将紫杉酚衍生物(Taxol-SAGSSG,化合物1)制成水凝胶,注入固体肿瘤,可显著抑制肿瘤生长,阻止新陈代谢。通过静脉注射紫杉酚,可以提高抗癌效果;血液中的紫杉酚浓度较低,可提高小鼠对紫杉酚的耐药性,减少化疗过程中的副作用。

漆酚基BPAU-NH2 -Gal紫杉醇载药胶束的pH响应性及其体外性能

以5-氨基-1-戊醇(P)、1,4-丁二醇二丙烯酸酯(BUDA)和胺基官能化甲氧基聚乙二醇(mPEG-NH 2)为原料,通过自组装方法合成了传统pH敏感型胶束BUDA-P(mPEG-NH 2)(BPAU);再以三烯漆酚苯硼酸胺衍生物(URU-NH 2)为疏水单元,半乳糖(Gal)为识别单元,合成了pH敏感型纳米胶束BPAU-NH 2-Gal。以紫杉醇(PTX)为受试药物,采用透析法制备了纳米载药胶束(PTX@BPAU-NH 2-Gal)。通过核磁共振(NMR)、凝胶色谱(GPC)、表面张力、Zeta电位分析对胶束的结构、重均相对分子质量(M w)、临界胶束浓度(CMC)、Zeta电位进行了表征,采用透射电镜(TEM)表征载药胶束的形貌,动态光散射法(DLS)测定了其粒径。采用高效液相色谱(HPLC)法测定了胶束对PTX的包封率和载药量,动态膜透析法考察了载药胶束在体外不同pH值条件下的释放特性和HepG2细胞摄入性能。研究结果表明:漆酚BPAU-NH 2-Gal胶束已经成功合成,胶束BPAU-NH 2-Gal的M W值约为15550,分散指数(PDI)为1.49,CMC值约为90.29 mg/L,Zeta电位值为29.7 mV。载药胶束PTX@BPAU-NH 2-Gal外观呈不规则椭圆结构,平均粒径为195 nm左右;对紫杉醇的包封率为92.51%,载药量为31.76%;在pH值4.5时,其药物释放量明显高于其在pH值为6.8、7.4时的药物释放量,具有明显的pH响应性;该载药胶束表现出对人体正常肝细胞LO2的低毒性,胶束质量浓度为200 mg/L时,LO2细胞存活率仍大于93%;在pH值4.5条件下,人肝癌细胞HepG2对该载药胶束具有很强的摄入能力。

厚朴酚对非小细胞肺癌获得性紫杉醇耐药细胞的影响研究

目的:探讨厚朴酚对非小细胞肺癌(NSCLC)获得性紫杉醇耐药细胞的影响。方法:人NSCLC Calu3细胞在培养中单独使用紫杉醇间歇性处理或与厚朴酚联用处理3个月后,分离细胞并在体外检测其药物敏感性,使用MTT法检测药物诱导的生长抑制,通过测量细胞中P糖蛋白(Pgp)荧光底物钙黄绿素的积累来定量Pgp外排活性。结果:连续使用紫杉醇处理会导致紫杉醇耐药性的发展,并对多药耐药性Pgp底物产生交叉耐药性,而厚朴酚/紫杉醇的组合阻止耐药性的发展,并且细胞仍具有化学敏感性。当用联合方案治疗耐药细胞时,可以克服紫杉醇耐药性。结论:厚朴酚/紫杉醇联合用药可抑制耐药性的发展并逆转紫杉醇耐药性,使紫杉醇耐药细胞重新对紫杉醇敏感。

紫杉醇对乳腺癌大鼠围手术期血儿茶酚胺及其他指标的影响

目的:探讨紫杉醇对乳腺癌大鼠模型围手术期血浆儿茶酚胺浓度以及部分免疫指标的影响。方法:选取SD大鼠70只,将walker-256肿瘤细胞接种于大鼠左侧腋下形成肿瘤结节,将存活并接种成功的50只大鼠随机分为4个实验组(分别为第1、2、3、4组)和1个对照组,每组10只。实验组静脉注射紫杉醇(25μg/g),对照组注射等量生理盐水,实验组分别于给药后第1、2、3和4周行肿瘤切除术。分别于术前及术后取静脉血测定肾上腺素和去甲肾上腺素水平、自然杀伤(NK)细胞计数、CD4+/CD8+细胞比值、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6水平。结果:各组术前和术后肾上腺素水平、NK细胞计数、TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05),第1、2组术前术后去甲肾上腺素浓度均高于对照组,CD4+/CD8+均低于对照组,第3组术前CD4+/CD8+低于对照组,第1～3组术前术后IL-6值均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:静脉注射紫杉醇可造成乳腺癌大鼠以去甲肾上腺素水平升高为主的应激反应,同时对其免疫系统造成一定的抑制。

丙泊酚上调FOXO1抑制卵巢癌耐药细胞的增殖和紫杉醇耐药性

目的探究丙泊酚抑制卵巢癌耐药细胞增殖和紫杉醇(paclitaxel,PTX)耐药性的分子机制。方法PTX处理正常卵巢癌细胞A2780以构建卵巢癌PTX耐药细胞(A2380/PTX)。Cell counting kit-8(CCK-8)法和流式细胞术分别用于检测细胞活性和凋亡水平。构建叉头盒蛋白O1(forkhead box,FOXO1)敲降载体shRNA-FOXO1转染A2380/PTX细胞。实时荧光定量PCR检测FOXO1的mRNA水平。结果与A2780细胞相比,A2780/PTX细胞对PTX的敏感性较低(P<0.05)。随着丙泊酚处理浓度增加,A2780和A2780/PTX细胞活性逐渐降低(P<0.05),并且在同一浓度下两种细胞活性差异无统计学意义(P>0.05)。相比于PTX处理,PTX+丙泊酚处理使A2780/PTX细胞的活性进一步降低(P<0.05),凋亡水平增加(P<0.05)。在A2780/PTX细胞中,FOXO1的表达随丙泊酚浓度增加而上调(P<0.05)。相比于shRNA空载体组,shRNA-FOXO1处理导致A2780/PTX细胞活性增加(P<0.05)。另外,相比于PTX处理,PTX+shRNA-FOXO1处理导致细胞活性增强(P<0.05)。与PTX+丙泊酚组相比,PTX+丙泊酚+shRNA-FOXO1处理导致细胞活性增加(P<0.05),凋亡水平下降(P<0.05),与PTX处理组差异无统计学意义(P>0.05)。结论丙泊酚通过上调FOXO1的表达从而抑制卵巢癌耐药细胞的增殖和PTX耐药性。

星点设计法优化地喹氯铵修饰紫杉醇与和厚朴酚共聚物胶束制备工艺

目的:制备地喹氯铵修饰紫杉醇与和厚朴酚Soluplus/TPGS共聚物胶束,并通过星点设计-响应面法优选出最佳处方,提高难溶性药物紫杉醇与和厚朴酚的包封率。方法:采用薄膜水化法制备地喹氯铵修饰紫杉醇与和厚朴酚Soluplus/TPGS共聚物胶束。采用星点设计-响应面法并使用Design-Expert 8.0.6.1统计学软件对试验组的响应值进行回归分析,优化共聚物胶束的制备工艺条件。结果:共聚物胶束最佳制备工艺为Soluplus/紫杉醇=150:1(质量比),Soluplus/TPGS=8:1(质量比),水化温度25℃。胶束中紫杉醇与和厚朴酚含量的综合评分为96.11%。结论:星点设计-响应面法优选出的地喹氯铵修饰紫杉醇与和厚朴酚Soluplus/TPGS共聚物胶束的制备工艺条件的重复性良好,操作简便,所建模型具有较好的实用性和预测性。

紫杉酚的抗癌作用

一、研制经过紫杉酚(Taxol)为从短叶紫杉中提取出的一种生物碱,本品为白色结晶,几乎不溶于水,亦难溶于其他溶剂,现用的溶剂为乙醇与 Cremophore EL 组成的一种合剂。本品含于短叶紫杉的针叶、树皮及树根中,世以树根中含量最高,因此提取本品时必须伐倒树木,由于此树生长地区有限,因而药源供给受限,这亦是该药临床研究进展缓慢的主要原因。

紫杉酚能降低细胞微管治疗癌症

紫杉酚对抑制人类某些癌症的转移扩散很有用处。近20年来,人们已经认识到紫杉酚能够降低细胞中微管的活动性。

英国批准使用紫杉酚治疗乳腺癌

BMS公司研制的抗癌药紫杉酚(Taxol)作为蒽环类药物治疗转移性乳腺癌失败或不适合时应用的药物,在英国已批准使用。早在1994年紫杉酚就作为治疗卵巢癌介绍到英国,1995年1月欧洲CPMP就建议批准使用紫杉酚作为治疗乳腺癌的药物。并且该药物作为以上两种癌症的治疗药物。

从紫杉树皮提取的抗卵巢癌药物紫杉酚

美国巴尔的摩约翰斯·霍普金斯大学的研究人员报告,一种治疗卵巢癌的实验性药物取得成功。这种从太平洋紫杉树皮中提取的药物紫杉酚(Taxol)似能缩小肿瘤体积。到目前为止,卵巢癌一直是众所周知的难治的疾病。

用生物技术获取抗癌药物——紫杉酚

美国医学家近年来的大量临床研究表明,从紫杉树皮中提取的一种化学物质一紫杉酚对妇女卵巢癌有特殊疗效,另外对乳腺癌、肠癌和肺癌也有卵巢癌。美国目前大约有3万名妇女患有卵巢癌。从紫杉树皮中提取的紫杉酚仅能满足1%的临床治疗需要,若要全部满足,须从大约40000棵紫杉树皮(约34.4万公斤)中提取紫杉酚。美国环境保护主义者认为,生长在太平洋沿岸和落基山原始森林中的紫杉树已经到了濒临灭绝的边缘,既使它能生产拯救癌症患者的药物,但再也不能砍伐或剥皮了。为了解决医学与环境保护的矛盾。

顺氯氨铂与紫杉酚联合治疗乳腺癌

耶路撒冷消息:据温哥华的肿瘤学家称,他们用紫杉酚(taxol)和顺氯氨铂(cisplatin)联合治疗妇女转移性乳腺癌取得了显著疗效,其有效率为94％。这些病人为以前未进行过化疗,或只接受过辅助性化疗的妇女。顺氯氨铂现在还没有普遍用于治疗乳腺癌,但加拿大不列颠哥伦比亚大学的KarenGelmon认为,它可提供不是骨髓抑制的限制剂量毒性的优点,对乳腺癌有效,并且是病人以前未接触过的一种药物。

卡培他滨联合多西紫杉醇治疗转移性乳腺癌的临床观察

为了探讨卡培他滨和多西紫杉醇联合方案治疗转移性乳腺癌的疗效及不良反应，29例转移性乳腺癌患者接受卡培他滨和多西紫杉联合方案化疗。卡培他滨2．0g／m^2，d1～d14；多西紫杉醇35mg／m^2，d1、d8、d15。21d重复，化疗2个周期以上。结果示29例患者入选，2例出组，27例可供评价疗效，29例可评价不良反应。有效率为51．9％（14／27），获益率为88．9％（24／27）；主要不良反应为手足综合征、皮肤色素沉着、白细胞减少、血小板减少、血红蛋白降低、恶心呕吐、口腔炎、腹泻、肝功能损害、脱发、心脏毒性、末梢神经毒性、过敏反应等。初步研究结果提示，对蒽环类药物和（或）紫杉醇治疗失败的转移性乳腺癌，卡培他滨联合多西紫杉醇是一种新的选择方案。

紫杉醇对肺腺癌A549细胞株增殖和凋亡的影响

目的:探讨紫杉醇在体外对肺腺癌A549细胞株增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:采用MTT法测定紫杉醇对A549细胞增殖的影响;Hoechst33258检测紫杉醇作用48h后细胞凋亡情况;流式细胞仪检测药物作用48h后的细胞周期和凋亡率;Western Blot检测的Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果:紫杉醇抑制A549细胞增殖呈时效和量效关系;Hoechst33258检测紫杉醇作用48h后可见凋亡细胞;紫杉醇作用48h后药物组G2～M期细胞百分比均高于对照组(均P<0.01),药物组细胞凋亡率高于对照组(均P<0.01),且凋亡率随药物浓度增加而增加;Western Blot显示,不同浓度紫杉醇作用于A549细胞48h,Bax的表达随药物浓度增加而增加,Bcl-2的表达随药物浓度增加而减低。结论:紫杉醇能抑制肺腺癌A549细胞株的增殖,其抑制作用可能通过将细胞周期阻滞于G2～M期和通过上调Bax、下调Bcl-2的表达而诱导细胞凋亡来实现的,并且紫杉醇抑制A549细胞增殖和诱导凋亡作用随药物浓度增加而增加。