紫杉醇固体脂质纳米粒的制备和质量评价

目的利用超声分散法制备紫杉醇固体脂质纳米粒,并考察其稳定性。方法以稳定性、Zeta电位、粒径、包封率为考察指标筛选制备工艺,对超声时间、超声功率、脂质材料和助乳化剂的用量做了详细的考察。结果通过单因素及正交试验确定最佳处方为:脂质骨架单硬脂酸甘油酯(100/150mg)、乳化剂豆磷脂(100mg)、助乳化剂Pluronic F68-聚山梨酯80(2∶1),在(75±5)℃下乳化,之后以功率300W进行超声,时间为20min。结论本实验成功地将紫杉醇装载进固体脂质纳米粒中,纳米粒在胶体分散液中分散均匀,稳定性良好。此制备工艺安全、可靠,有很大的应用前景。

紫杉醇固体脂质纳米粒大鼠体内药动学

目的研究紫杉醇固体脂质纳米粒在大鼠体内的药动学。方法10只健康大鼠,雌雄各半,分为2组,分别口服给药紫杉醇固体脂质纳米粒和紫杉醇乳剂30 mg.kg-1,在设计的时间点从颈静脉取血,采用RP-HPLC测定紫杉醇在全血中的药物浓度,药动学参数用3P97软件进行处理。结果大鼠口服给药后,紫杉醇固体脂质纳米粒和乳剂的tm ax分别为3.133 h和1.627 h,MRT分别为10.362 h和3.297 h,mρax分别为1.512 2 mg.L-1和0.718 9 mg.L-1。结论固体脂质纳米粒能够显著改善大鼠体内紫杉醇的药动学行为,有利于其更好地发挥抗肿瘤作用。

紫杉醇固体脂质纳米粒包封率的测定

目的建立紫杉醇固体脂质纳米粒(Paclitaxel Solid Lipid Nanoparticles,PTX-SLN)包封率的测定方法。方法分别采用凝胶柱过滤法、超速离心法、微柱离心法分离固体脂质纳米粒和游离药物,并进行方法学考察,优化包封率测定条件。结果微柱离心法能有效地将PTX-SLN与游离药物PTX分离,柱回收率测定结果为98.23%,3次包封率测定的平均值为94.07%,RSD为0.78%。结论微柱离心法简便,结果重现性好,适于PTX-SLN包封率的测定。

NGR肽修饰的紫杉醇固体脂质纳米粒的制备及评价

目的本文旨在制备载紫杉醇的肿瘤靶向肽NGR修饰的固体脂质纳米粒(PTX/NGR-SLN)并对其进行评价。方法通过将DSPE-PEG_(2000)Mal与NGR偶联得到DSPE-PEG_(2000)-NGR;采用乳化-超声法制备SLN;以合成的DSPE-PEG_(2000)-NGR对SLN进行表面修饰,制得NGR-SLN,并对其进行表征。以荷HT-1080裸鼠为肿瘤模型,通过活体成像观察NGR-SLN在体内的分布情况,并考察其抑制肿瘤生长情况。结果 PTX/NGR-SLN的粒径(113.28±10.33)nm,Zeta电位为(-5.65±0.47)mV;包封率为(91.28±0.47)%,载药量为(2.48±0.28)%;释放度结果表明PTX/NGR-SLN具有良好的缓释特性;在-20℃条件下放置3个月,其粒径和包封率无明显变化。与对照组相比,PTX/NGR-SLN具有明显的肿瘤靶向递送能力和肿瘤生长抑制能力。结论 PTX/NGR-SLN具有良好的肿瘤靶向治疗潜力能力。

微通道内载紫杉醇固体脂质纳米粒制备及工艺优化

目的:制备载紫杉醇固体脂质纳米粒。方法:微通道内采用溶剂扩散法制备脂质纳米粒,并通过正交优化制备工艺。结果:制备的纳米粒稳定性良好,平均粒径为(129.87±2.91)nm,包封率为(3.11±0.06)%,载药率为(43.67±0.24)%。结论:本研究制备的载药固体脂质纳米粒载药特性与重复性良好。

聚乙二醇修饰杨梅苷固体脂质纳米粒制备及其体内药动学研究

目的制备聚乙二醇修饰杨梅苷固体脂质纳米粒,并考察其体内药动学。方法高压均质法制备聚乙二醇修饰固体脂质纳米粒,测定包封率、载药量、粒径、Zeta电位,单因素试验优化处方,XRPD进行晶型分析,考察体外释药、稳定性。24只大鼠随机分为4组,分别灌胃给予杨梅苷、杨梅苷固体脂质纳米粒、杨梅苷固体脂质纳米粒+聚乙二醇硬脂酸酯、聚乙二醇修饰杨梅苷固体脂质纳米粒的0.5%CMC-Na混悬液(150 mg/kg),于不同时间点采血,HPLC法测定杨梅素血药浓度,计算主要药动学参数。结果最优处方为药脂比1∶15,单硬酯酸甘油酯与聚乙二醇硬脂酸酯比例10∶1,泊洛沙姆188浓度0.8%,均质次数8次,包封率为81.75%,载药量为5.04%,粒径为207.56 nm,PDI为0.092,Zeta电位为-14.79 mV。杨梅苷以无定型状态存在于聚乙二醇修饰固体脂质纳米粒中,18 h内累积释放度为64.71%,模拟胃液中2 h内、模拟肠液中12 h内稳定性良好。与原料药、固体脂质纳米粒比较,聚乙二醇修饰固体脂质纳米粒t_(max)延长(P<0.05),C_(max)、AUC_(0~t)、AUC_(0~∞)升高(P<0.05,P<0.01),相对生物利用度与原料药相比增加至4.60倍。结论聚乙二醇修饰固体脂质纳米粒可改善杨梅苷稳定性,促进其口服吸收。

穿膜肽修饰紫杉醇固体脂质纳米粒的大鼠在体肠吸收研究

考察硬脂酸-八聚精氨酸(stearic acid-octaarginine,SA-R8)修饰的紫杉醇(paclitaxel,PTX)固体脂质纳米粒(solid lipid nanoparticles,SLN)在大鼠肠道的吸收情况。以市售制剂(Taxol)和PTX-SLN为对照,采用单向灌流法,研究不同肠段、不同药物浓度及加入P-糖蛋白抑制剂后SA-R8-PTX-SLN的大鼠肠道吸收动力学。结果表明,3种制剂在全肠段都有吸收,且在十二指肠吸收最好。在各个肠段,3种制剂的净累积吸收量表现为SA-R8-PTX-SLN>PTX-SLN>Taxol(P<0.05)。SA-R8-PTX-SLN在十二指肠的吸收在考察药物浓度范围内呈现线性吸收。加入P-糖蛋白抑制剂后,Taxol和PTX-SLN在十二指肠的净累积吸收量均显著提高(P<0.05),而SA-R8-PTX-SLN的净累积吸收量与未加P-糖蛋白抑制剂相比无显著性差异(P>0.05)。因此,SA-R8和SLN共同作用,可显著促进紫杉醇的口服吸收。

小干扰RNA-紫杉醇固体脂质纳米粒克服肿瘤多药耐药性的体外细胞学研究

肿瘤多药耐药性(MDR)是临床上肿瘤化疗失败的主要原因,其中由多药耐药基因(MDR1)编码的P-糖蛋白(P-gp)又在MDR发生机制中占重要作用。本实验设计合成特异性沉默MDR1基因的小干扰RNA(siRNA),协同抗肿瘤药物紫杉醇(PTX)共同包裹于固体脂质纳米粒(SLNs)中,利用基因治疗和化学治疗的协同作用,以期克服肿瘤多药耐药性。实验包括制备siRNA-紫杉醇固体脂质纳米粒(siRNA-PTX-SLNs);检测载药SLNs对肿瘤细胞的增殖抑制作用;测定给药后PTX的细胞摄取率;采用实时荧光定量PCR和流式细胞法评价siRNA-PTX-SLNs对MDR1表达的沉默作用。结果显示在耐药细胞MCF-7/ADR中siRNA-PTX-SLNs能够显著提高PTX细胞摄取率,有效沉默MDR1的表达,抑制P-gp的外排作用,促进P-gp底物在细胞的蓄积。因此siRNA-PTX-SLNs可发挥克服肿瘤多药耐药性的协同治疗作用。

PEG修饰的紫杉醇固体脂质纳米粒的制备及其性质研究

目的制备PEG修饰的固体脂质纳米粒,并研究其性质。方法采用薄膜超声法制备包载紫杉醇的固体脂质纳米粒,再利用EDC/NHS脱水缩合法在纳米粒表面进行PEG修饰,得到PEG修饰的固体脂质纳米粒。用苦味酸-分光光度法测定PEG的含量;用透射电镜考察纳米粒的形态特点;采用凝胶柱洗脱联合HPLC测定包封率;筛选纳米粒的最佳冻干条件。结果成功制备了PEG修饰的紫杉醇固体脂质纳米粒,通过脱水缩合法连接到纳米粒上的PEG化多肽占加入总量的26.5%;紫杉醇固体脂质纳米包封率为75%,载药量为7%。结论制备的PEG修饰的紫杉醇固体脂质纳米粒具有较整齐的外观形态、较高载药量和较好的稳定性。

漆黄素固体脂质纳米粒的制备及体外释放评价

目的制备漆黄素固体脂质纳米粒(FIT-SLN),对其进行质量评价并考察其体外释放作用。方法采用乳化蒸发-低温固化法制备FIT-SLN,利用Box-Behnken设计试验优化处方工艺,并制成冻干粉末。考察其外观、粒径、Zeta电位,并通过差示量热扫描仪判断药物在FIT-SLN冻干粉中的存在状态,透析袋法评价制剂在不同介质中的体外释放行为。结果FIT-SLN的最佳制备工艺:漆黄素用量3 mg、吐温80用量115μL、双硬脂酸甘油酯(Precirol ATO 5)用量30 mg、卵磷脂用量30 mg。所得FIT-SLN的粒径、Zeta电位、包封率分别为(124.53±2.00)nm、(-21.33±1.69)mV、77.89%,体外释放规律与一级动力学方程相符。结论成功制备粒径小、包封率高的FIT-SLN,其具有一定的缓释能力。

小分子干扰RNA-紫杉醇固体脂质纳米粒的制备

目的制备包裹小分子干扰RNA(siRNA)-紫杉醇(PTX)的固体脂质纳米粒(SLNs)(siRNA-PTX-SLNs),考察其理化性质和包封率。方法采用薄膜超声法制备siRNA-PTX-SLNs;凝胶柱层析法分离SLNs、游离的PTX及游离的siRNA;HPLC法检测PTX的含量;荧光标记法检测siRNA的含量;测定粒径、电位,并在电镜下观察形状。结果 siRNA-PTX-SLNs中紫杉醇的包封率>96%;siRNA的包封率为56.65%±0.5%;SLNs的粒径、电位分别为155±0.23 nm、40±2.34 mV。结论成功制备了能同时有效包裹siRNA和PTX的siRNA-PTX-SLNs。

共载紫杉醇与胡椒碱的固体脂质纳米粒的体外药物释放

目的制备共载紫杉醇与胡椒碱的固体脂质纳米粒(PP-SLN),测定其粒径及Zeta电位并评价其体外释放行为。方法采用溶剂挥发-高压均质法制备PP-SLN,建立HPLC法测定紫杉醇体外释放的方法学,并采用正向动态膜透析法对PP-SLN体外药物释放进行评价。结果PP-SLN的粒径为(53.72±1.43)nm,Zeta电位为(-19.4±3.31)mV。PP-SLN中的紫杉醇于48 h的累积释放量约为76%,对照制剂(PTX混悬液)中的紫杉醇48 h时累积释放量约为30%。结论本试验制备的PP-SLN粒径小,粒度分布均匀,且可提高紫杉醇的体外释放量。

雷公藤内酯醇新型固体脂质纳米粒微观结构研究

选择固体脂质山榆酸甘油酯(Compritol ATO 888)和液态油三辛酸甘油酯制备雷公藤内酯醇新型固体脂质纳米粒(SLN)载体系统,运用常温、低温差示量热分析(DSC)、X射线衍射(XRD)、小角X射线衍射(SAXS)和核磁共振(NMR)等多种分析测试手段对新型SLN性能和微观结构进行研究。结果显示,新型SLN纳米体系熔点从70.8℃降低到61.4℃,纳米化后熔融焓大大降低,于-17.7℃发生油相熔融吸热行为;无论是否载药,制备的纳米分散体系(新型SLN和传统SLN)都是由α相和少量β′相组成,所载药物雷公藤内酯醇对载体结晶性能基本无影响;新型SLN中分子运动自由度介于Compritol ATO 888基材和其制备的传统SLN二者之间,其长程结构相对于传统SLN和基材的结构只偏移0.1 nm,表明中链甘油酯液态油分子不可能插入片间和2个或3个链长结构间。两种物理状态不同的甘油酯在新型SLN中仍以两种状态存在:液态油和固态脂质,因其有各自的熔融性状(低温和常温DSC研究)和分子运动状态(NMR检测),推测本实验室制备新型SLN的微观结构应是液态油分子,没有插入到固体脂质层状结构之间,而是形成了更加微细的纳米油室,周围包被着固体脂质,整个球形颗粒还处于纳米尺度。

固体脂质纳米粒降低雷公藤内酯醇肝毒性的实验研究

目的 探讨固体脂质纳米粒降低雷公藤内酯醇 (TP)对肝脏的毒性作用。方法 用雷公藤内酯醇固体脂质纳米粒 (TP-SL N)小鼠 ig60 d后 ,测定小鼠血清谷丙转氨酶 (AL T)、谷草转氨酶 (AST)和肝组织中的超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱苷肽过氧化物酶 (GSH-Px)的活性以及丙二醛 (MDA)的含量。结果 与空白组相比 ,TP-SL N对 AL T,AST,SOD,GSH-Px,MDA的活性或含量差异无显著性 ;中、高剂量 (2 0 ,3 0μg/ kg)的 TP组则显著降低 SOD和 GSH-Px 的活性 ,并能显著提高 MDA,AL T和 AST的含量。结论 TP-SL N能降低 TP对肝脏的毒性。

紫杉醇表面修饰脂质纳米粒的制备和性质

目的 :以硬脂酸为载体材料制备紫杉醇的长循环脂质纳米粒。方法 :用“乳化蒸发 低温固化”法制备纳米粒 ;用透射电镜考察了纳米粒的形态 ;建立了于脂质纳米粒和血清中测定紫杉醇的HPLC方法 ;考察了纳米粒于30 % (体积分数 )乙醇溶液中的药物释放 ;以市售紫杉醇注射剂和自制的紫杉醇普通纳米粒为对照 ,测定了长循环纳米粒于小鼠体内的药物动力学参数。结果 :紫杉醇长循环脂质纳米粒的体内半衰期为 1 0 .1h ,同时普通纳米粒的体内半衰期为 2 .3h ,注射剂的体内半衰期为 1 .3h。结论 :长循环脂质纳米粒可以延长紫杉醇的体内半衰期。

雷公藤内酯醇固体脂质纳米粒经皮渗透及抗炎活性的研究

目的 研究固体脂质纳米粒 (SLN)作为雷公藤内酯醇 (TP)载体的经皮渗透及抗炎活性。方法 热熔分散法制备雷公藤内酯醇固体脂质纳米粒 (TP SLN) ,采用改进的Franz扩散池体外渗透实验 ,比较了不同组成的SLN体系的经皮渗透作用 ,研究了它们对Freund’s完全佐剂所致的大鼠佐剂性关节炎的治疗作用。结果 不同的脂质、乳化剂和辅助乳化剂都能制得稳定的SLN体系 ,最小粒径可达 ( 12 3.4± 1.9)nm ;在 12h内累计透皮吸收百分率以处方B最高 ,达到了 78.5 % ,而普通溶液为 32 .4 % ,TP SLN局部给药对Freund’s完全佐剂所致的佐剂性关节炎有较强的治疗作用 ,SLN的粒径越小 ,抗炎活性越强。结论 TP SLN作为透皮给药 ,可以延缓药物的释放 ,提高药物疗效 ,降低药物不良反应。

白藜芦醇固体脂质纳米粒的制备表征与体外抗肿瘤作用研究

目的:制备白藜芦醇固体脂质纳米粒(Res-SLN),研究其理化特性及体外抗肿瘤作用。方法:采用溶剂乳化挥发法制备Res-SLN,并用透射电镜观察纳米粒的形态;激光粒度分析仪检测粒径分布和Zeta电位;高效液相色谱法测定载药量、包封率及体外释药;MTT法评价体外抗肿瘤作用。结果:制备的Res-SLN为类球形,粒径分布均匀,平均粒径为96.7nm,zata电位为-16.3mv,载药量和包封率分别为(7.95±0.21)%和(91.34±0.18)%,体外释放缓慢,对HepG2细胞具有较强的抑制作用。结论:制备的Res-SLN包封率和载药量高,粒径均匀,体外释放具有缓释特点,体外抗肿瘤作用强。

星点设计-效应面法优选白藜芦醇固体脂质纳米粒处方

目的:采用星点设计-效应面法优选白藜芦醇固体脂质纳米粒的处方。方法:采用星点设计-效应面优化法筛选处方,以白藜芦醇包封率及载药量作为评价指标,考察脂质用量、表面活性剂用量、药物量对评价的影响。采用热高压均质法制备白藜芦醇固体脂质纳米粒。结果:热高压均质工艺能有效制备固体脂质纳米粒,优选的最佳处方为单硬脂酸甘油酯用量为4.5%、泊洛沙姆用量为6%、白藜芦醇投药量为0.45%,OD值与理论值偏差-4.12%。结论:星点设计-效应面法能有效优选RES-SLN处方。

多烯紫杉醇单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒处方前研究

目的对多烯紫杉醇单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒进行处方前研究,为其制剂研究提供理论依据。方法建立多烯紫杉醇的HPLC的体外测定方法。结果多烯紫杉醇在9.95～497.5μg/ml范围内与峰面积呈现良好的线性关系,回归方程为Y=41762X-409.02(r=0.999 9),方法学验证良好。结论本文建立了多烯紫杉醇的含量测定方法,为下一步实验的纳米粒中多烯紫杉醇的含量和载药量的测定提供了方法,为处方研究提供了依据。

白藜芦醇磷脂复合物固体脂质纳米粒的制备及其体内药动学研究

目的制备白藜芦醇磷脂复合物固体脂质纳米粒,并考察其体内药动学。方法乳化超声-低温固化法制备固体脂质纳米粒,测定其粒径、Zeta电位、包封率、载药量、体外稳定性、体外释药。18只大鼠随机分为3组,分别灌胃给予原料药、磷脂复合物、固体脂质纳米粒0.5%CMC-Na混悬液(20 mg/kg),于0、2、4、8、12、24 h采血,HPLC法测定白藜芦醇血药浓度,计算主要药动学参数。结果固体脂质纳米粒平均粒径为218.6 nm,Zeta电位为-15.6 mV,包封率为84.07%,载药量为2.62%,48 h内累积溶出度为76.18%,白藜芦醇含量在48 h内无明显变化。与原料药、磷脂复合物比较,固体脂质纳米粒t_(max)延长(P<0.01),C_(max)、AUC_(0~)_t、AUC_(0~∞)升高(P<0.01),其相对生物利用度与原料药相比增加至3.00倍。结论固体脂质纳米粒可提高白藜芦醇磷脂复合物体外溶出度和稳定性,促进该成分体内吸收。