人鼻咽癌紫杉醇耐药细胞系与其亲代细胞系比较基因组杂交研究

目的:比较基因组杂交(comparative genomic hybridization,CGH)是一种在荧光原位杂交(fltuorescence in situ hybridiza-tion,FISH)技术上发展起来的用于检测两个基因组间相对DNA拷贝数的改变(缺失或扩增),并将这些变化在染色体上进行定位的分子细胞遗传学方法。为了解鼻咽癌紫杉醇耐药细胞(CNEl/Taxol,HNE2/Taxol,5-8F/Taxol)与亲代细胞(CNEl,HNE2,5-8F)在基因组DNA水平上可能存在的差异,以及这种差异在肿瘤获得性耐药产生中的意义,采用CCH技术对鼻咽癌紫杉醇耐药细胞与亲本细胞的基因组DNA进行检测和分析。方法:三株鼻咽癌紫杉醇耐药细胞采用大剂量冲击与剂量逐渐递加相结合的方法诱导而成。采用集落形成实验测定药物的敏感性,利用比较基因组杂交技术(CGH)对耐药细胞和其亲本细胞的基因组DNA进行检测和分析,比较耐药细胞与亲本细胞在染色体扩增与缺失上的共同点和差异。结果:三株鼻咽癌紫杉醇耐药细胞耐药指数分别为8.43、8.27和5.26。鼻咽癌亲本细胞存在广泛的染色体改变,主要表现在3q21-qter,5p13-pter,12和20q11-qter的共同扩增以及l0q11-qter,18和X染色体的共同缺失,从亲本细胞系诱导的三株鼻咽癌紫杉醇耐药细胞系表现为3q21-qter,5p13-pter,12,20q11-qter和8q21-qter的共同扩增,无明显共同缺失区域。与亲本细胞共同扩增区域相比,其中最有意义的是8q2l-qter区域在三株耐药细胞中出现了新的共同扩增。结论:3q21-qter,5p13-pter,12和20q11-qter的共同扩增以及10q11-qter,18和X染色体的共同缺失可能与鼻咽癌的发生有关,而8q21-qter染色体扩增可能与鼻咽癌获得性紫杉醇耐药相关,对这些区域的进一步研究,有可能为肿瘤发生及耐药机制研究提供新的线索.

染色体2p22的过度扩增及hmsh2基因的高表达与卵巢癌紫杉醇耐药相关性的研究

目的研究染色体特定区域DNA拷贝改变、基因差异表达及其与紫杉醇耐药的关系。方法运用比较基因组杂交(comparativegenomichybridization,CGH)及RTPCR技术,分析卵巢癌紫杉醇耐药株染色体基因组变化和hmsh2基因在卵巢癌组织中的表达。结果CGH结果显示最有意义的变化是卵巢癌紫杉醇耐药株OC3/Tax300细胞染色体2p22过度扩增。RTPCR检测发现hmsh2基因在OC3/Tax300细胞高度表达。hmsh2基因表达阳性率在组1和组2分别为93.9%(31/33)及47.6%(10/21),差异有显著性;在低分化癌为93.3%,显著高于中、高分化癌的54.2%。结论2p22拷贝数的过度扩增及hmsh2基因的高度表达可能与卵巢癌紫杉醇耐药相关。