广东紫珠提取物对母猪繁殖性能、免疫、抗氧化功能及肠道微生物的影响

选择体质量、胎次和预产期相近的妊娠母猪50头,随机分成5组,每组5个重复,每个重复2头,对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加50、100、150和200 mg/kg广东紫珠提取物的试验饲粮,试验周期从母猪妊娠第30天开始至产后第25天结束,研究饲粮中添加广东紫珠提取物对母猪繁殖性能、免疫和抗氧化性能及肠道微生物的影响。结果表明:1)与对照组相比,50和100 mg/kg组仔猪初生体质量均显著高于对照组(P<0.05),100和150 mg/kg组的仔猪初生窝体质量均显著高于对照组(P<0.05),150 mg/kg组仔猪断奶体质量及断奶窝体质量均显著高于对照组(P<0.05);2)添加广东紫珠提取物可不同程度提高母猪孕中期、分娩时和断奶时血清超氧化物歧化酶活性,降低血清丙二醛含量;3)添加广东紫珠提取物可不同程度降低母猪孕中期、分娩时和断奶时血清白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)等炎症细胞因子水平;4)添加广东紫珠提取物可显著增加母猪肠道乳杆菌属和双歧杆菌属细菌数量,添加100 mg/kg及以上的广东紫珠提取物可降低大肠埃希菌和产气荚膜梭菌数量(P<0.05);5)通过建立二次回归曲线,得出母猪饲粮中广东紫珠提取物最适添加量为121~165 mg/kg。综上所述,母猪饲粮中添加121~165 mg/kg广东紫珠提取物可改善母猪的繁殖性能,提高母猪血清抗氧化水平,缓解母猪产后炎症反应,优化母猪肠道菌群结构。

基于裸花紫珠提取物促进伤口愈合试验研究及外用膏的制备初探

目的:探讨裸花紫珠提取物外用促进伤口愈合的作用及外用膏制备方法研究。方法:50只KM小鼠随机分为5组:分别为阴性对照组、阳性对照组及裸花紫珠高、中、低3个剂量组,耳部皮肤涂抹后,采用小鼠耳肿胀实验,考察裸花紫珠对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响;采用体外抑菌实验,观察裸花紫珠提取物对大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌、枯草杆菌、金色葡萄球菌5种指示菌的抑菌作用;取新西兰家兔30只,采用随机分组法分为5组,分别为供试品高剂量组、中剂量组、低剂量组、阴性对照组(凡士林)以及阳性对照组(京万红软膏),每组6只,雌雄各半,灭菌刀片划伤家兔处理,外用给药,考察裸花紫珠外用对家兔伤口愈合作用;对基质进行正交试验筛选初步确定了裸花紫珠提取物外用膏的制备方法,同时对膏剂进行物理性状、离心分层试验、耐热耐寒试验检查,制备了适合此种给药方法的外用制剂。结果:体外抑菌实验,裸花紫珠高剂量组对金葡菌的抑菌圈直径达到16.8 cm;小鼠耳肿胀实验表明,中、高剂量组对二甲苯所致的小鼠耳肿胀度明显降低;受损家兔试验中受试物高、中、低剂量组、阳性与阴性对照组比较,均具有促进家兔伤口皮肤愈合的作用。7 d及14 d各组伤口愈合率与阴性对照组比较,差异具有统计学意义;正交筛选试验确定出了最佳制备工艺:即吐温-80为1.2 g,单硬脂酸甘油酯为4.7 g,甘油为0.9 g,液体石蜡为10.8 g,司班为1.4 g,固体石蜡为1.4 g,凡士林为0.9 g,乳化温度为65℃,乳化时间为25 min。结论:裸花紫珠提取物可作为外用制剂进行使用,本研究制备的外用制剂符合药典项下规定。

裸花紫珠提取物对鸡源大肠杆菌的体外抑菌效果

为研究裸花紫珠提取物对鸡源大肠杆菌体外抑菌试验,采用牛津杯法和肉汤二倍稀释法测定裸花紫珠提取物抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,裸花紫珠提取物对大肠杆菌属于中度敏感,平均抑菌圈直径为16 mm,最小抑菌浓度(MIC)为32.0 mg/mL。试验结果表明,裸花紫珠提取物对鸡源大肠杆菌具有良好的抑菌效果,为下一步动物试验研究裸花紫珠提取物在动物肠道内抑菌作用提供参考。

紫珠提取物联合七氟烷对心肌缺血再灌注损伤的预防效果观察

目的:观察紫珠提取物联合七氟烷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的预防作用。方法:选取健康清洁级SD大鼠37只,采用随机数字表法将其分为假手术组(Sham)、心肌缺血再灌注组(I/R)、七氟烷后处理组(I1)、紫珠提取物联合七氟烷后处理组(I2)。预处理:I2组给予紫珠提取物灌胃处理,Sham组、I/R组、I1组给予等量生理盐水灌胃;2周后建立心肌缺血再灌注损伤模型:Sham组仅分离左冠状动脉前降支,I/R组缺血30 min后恢复灌注,I1和I2组缺血再灌注前1 min开始吸入3%七氟烷15 min。术后3 d,比较各组左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短分数(LVFS)、心脏梗死面积、MDA含量、SOD活性和显微结构变化。结果:I2组LVEF及LVFS均明显大于I/R和I1组,心肌梗死面积明显小于I/R和I1组,心肌组织病理改变结果显微状态明显优于I/R和I1组,MDA含量明显低于I/R和I1组,SOD活性明显高于I/R和I1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:紫珠提取物联合七氟烷有效预防心肌缺血再灌注损伤的效果优于单用七氟烷的效果。

裸花紫珠提取物抗大鼠宫颈炎作用机制研究

目的为研究裸花紫珠正丁醇提取物抗大鼠宫颈炎的作用机制。方法为取雌性SD大鼠36只,随机分为空白组,模型组,裸花紫珠正丁醇提取物高、中、低剂量组,妇炎洁组,每组6只。取20%苯酚胶浆连续7天阴道给药,制备大鼠宫颈炎模型,然后分别用不同浓度的裸花紫珠正丁醇提取物、妇炎洁阴道连续给药14天,给药结束后采用心脏采血法取动物血液,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组动物血浆肿瘤坏死因子(TNF-α),白细胞介素(IL-1)和前列腺素(PGE2)的含量,并取各组大鼠宫颈组织行病理形态学检查。结果显示,不同浓度的裸花紫珠提取物组和妇炎洁组与模型组相比较,均可降低其血浆PGE2、TNF-α的含量,升高血浆IL-1水平。组织病理形态学检查显示不同浓度的裸花紫珠提取物组和妇炎洁组可以减轻宫颈炎组织形态学的损伤。结论:裸花紫珠正丁醇提取物可能通过抑制组织中PGE2、TNF-α的合成,增强组织IL-1水平,从而提高机体免疫应答,影响炎性反应相关细胞因子的表达而治疗宫颈炎症。

裸花紫珠提取物预防大鼠术后腹腔粘连的实验研究

目的探讨裸花紫珠提取物抗大鼠术后腹腔粘连的作用。方法将SD大鼠60只,随机分为模型对照组,玻璃酸钠(阳性药物)组,裸花紫珠低、中、高剂量组共5组,采用纱布法进行造模。术后观察大鼠一般情况,各组于术后14 d观察粘连情况,采用Phillips评分法对腹腔粘连进行分级。结果各组分级评分与对照组比较,裸花紫珠高、中、低剂量组和阳性药物组均能显著降低大鼠术后腹腔粘连(P<0.05,P<0.01),尤其以裸花紫珠高剂量组和阳性药物组预防粘连作用最强。结论裸花紫珠提取物具有较好的抗术后腹腔粘连作用。

紫珠提取物通过抑制HMGB1水平改善小鼠宫颈上皮细胞炎症反应的机制

目的探讨紫珠提取物通过抑制高迁移率族蛋白框1(HMGB1)水平改善小鼠宫颈上皮细胞炎症反应的机制。方法30只CD-1远交的孕鼠用于实验研究,通过脂多糖诱导早产小鼠模型。将成功怀孕的小鼠按照随机数字表法分成3组:对照组(正常孕鼠,等量0.9%氯化钠溶液灌胃,n=10),炎症模型组(早产模型,等量0.9%氯化钠溶液灌胃,n=10)和紫珠提取物组(早产模型,100 mg·kg^(-1)·d^(-1)紫珠提取物灌胃,n=10),共干预7 d。通过蛋白印迹分析小鼠宫颈组织HMGB1/TLR4/NF-κB的蛋白表达。通过酶联免疫吸附试验检测小鼠宫颈阴道粘液中细胞因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8]的水平。通过RT-PCR分析小鼠宫颈组织焦亡相关蛋白iNOS、NLRP3和caspase-4的mRNA表达。通过水溶性荧光探针和可溶性E-钙粘蛋白(SECAD)水平评估上皮细胞通透性。结果炎症模型组HMGB1、TLR4和NF-κB的蛋白表达较对照组升高,紫珠提取物组HMGB1、TLR4和NF-κB的蛋白表达较炎症模型组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。炎症模型组TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的水平较对照组升高,紫珠提取物组TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的水平较炎症模型组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。炎症模型组iNOS、NLRP3和caspase-4的mRNA表达较对照组升高,紫珠提取物组iNOS、NLRP3和caspase-4的mRNA表达较炎症模型组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。炎症模型组SECAD水平和荧光强度较对照组升高,紫珠提取物组SECAD水平和荧光强度较炎症模型组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脂多糖可以激活小鼠宫颈上皮细胞的炎症反应,这种炎症反应会导致宫颈上皮屏障受损,紫珠提取物通过抑制HMGB1表达降低小鼠宫颈上皮炎症反应,改善宫颈上皮屏障受损。

裸花紫珠提取物促血小板活化作用及其机制

目的:研究裸花紫珠Callicarpa nudiflora提取物对血小板活化的影响,并探讨其作用机制。方法:雄性SD大鼠50只,随机分为空白组,云南白药组(0.930 g·kg-1),裸花紫珠提取物低、中、高剂量(0.131,0.263,0.525 g·kg^(-1))组,连续给药10 d。给药结束后分别提取各组动物血小板,采用微量版法测定二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)诱导的血小板聚集率;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血小板中血栓素(thromboxane B2,TXB2),5-羟色胺(5-serotonin,5-HT)含量。采用ELISA法检测血小板中环磷酸腺苷(cyclic adenosine 5'-monophosphate,c AMP)的释放量。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测裸花紫珠提取物对血小板中磷酸化-磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3-kinases,p-PI3K)蛋白表达的影响。结果:给药后,裸花紫珠提取物可明显增强ADP诱导的血小板聚集反应(P<0.05),可明显促进血小板释放TXB2和5-HT(P<0.05)。另外,裸花紫珠提取物低、高剂量组血小板c AMP含量分别为(3.074±0.538),(3.340±0.265)nmol·L^(-1),较空白组(3.795±0.586)nmol·L^(-1)明显降低(P<0.05),裸花紫珠提取物中剂量组血小板中c AMP为(3.003±0.242)nmol·L-1,较空白组有显著提高(P<0.01)。裸花紫珠提取物可显著提高p-PI3K激酶蛋白表达量(P<0.01)。结论:裸花紫珠提取物可显著上调ADP诱导的血小板活化,其机制可能与其显著增强血小板ADP受体(P2Y12)所介导的信号转导有关。

裸花紫珠提取物的抗乳腺癌转移作用及其机制

目的:研究裸花紫珠乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extracts from Callicarpa nudiflora,ECN)的抗乳腺癌转移作用及其作用机制。方法:采用尾静脉注射肿瘤细胞法建立裸鼠实验性肺转移模型,24 h后将实验动物随机分为空白组,ECN低、中、高剂量组(0.125,0.25,0.5 g·kg-1),空白组给予等量溶剂,每日ig给药1次,连续8周。给药结束后,采用巢式PCR法检测裸鼠肺组织中人细胞角蛋白19(CK19)基因的表达,以确定肿瘤细胞的肺转移程度(n=10)。建立肿瘤细胞体外迁移、侵袭模型,以100,200 mg·L-1ECN以及10 nmol·L-1BB-94(阳性对照)处理MDA-MB-231细胞14 h(n=4),观察ECN对乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞的体外迁移、侵袭的影响;建立肿瘤细胞体外黏附模型,以100,200 mg·L-1ECN以及10 nmol·L-1BB-94处理MDA-MB-231细胞60 min(n=3),观察ECN对乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞的体外黏附能力的影响;采用Western blot法,检测MDA-MB-231细胞分别经100,200 mg·L-1ECN处理24 h后p-锌指转录因子(p-Snail)和上皮性钙黏附蛋白(Ecadherin)的表达情况。结果:体内研究表明,ECN可显著降低裸鼠肺组织中人CK19 mRNA的表达(P<0.01);体外迁移实验发现,ECN 100,200 mg·L-1组的迁移细胞数与空白组相比显著减少(P<0.01);体外侵袭实验显示,ECN低、高剂量组的侵袭细胞数与空白组相比显著减少(P<0.01);体外黏附实验表明,ECN可干扰肿瘤细胞与细胞外基质蛋白之间的黏附(P<0.01);Western blot实验结果表明,ECN可显著抑制p-Snail,并增加E-cadherin的表达。结论:ECN具有明显的抗乳腺癌转移作用。抑制细胞内p-Snail的活化可能是抗转移作用的机制之一。

裸花紫珠乙酸乙酯提取物对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探究裸花紫珠(CN)提取物调控10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)对结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法体外培养人结肠癌细胞SW480,随机分为对照组、CN乙酸乙酯100 mg/L组、CN乙酸乙酯150 mg/L组、CN乙酸乙酯200 mg/L组、CN乙酸乙酯200 mg/L+si-NC组、CN乙酸乙酯200 mg/L+si-PTEN组。MTT法、Transwell实验分别检测增殖、迁移及侵袭能力;western blot检测Cyclin D1、N-cadherin、p21、E-cadherin、PTEN蛋白表达量。结果与对照组比较,CN乙酸乙酯200 mg/L组细胞活力和Cyclin D1、N-cadherin蛋白水平降低,迁移及侵袭细胞数明显减少,而p21、E-cadherin、PTEN蛋白水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与CN乙酸乙酯200 mg/L+si-NC组比较,CN乙酸乙酯200 mg/L+si-PTEN组细胞活力升高,Cyclin D1、N-cadherin蛋白水平升高,迁移及侵袭细胞数增多,PTEN、p21、E-cadherin蛋白水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论裸花紫珠在人结肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭中发挥重要作用,其可能通过调控PTEN的表达影响结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

裸花紫珠正丁醇提取物止血作用及其机制研究

目的:研究裸花紫珠(Callicarpa nudiflora)正丁醇提取物的止血活性及其可能的作用机制。方法:雌性KM小鼠50只,随机分为空白对照组、云南白药组(1.33g/kg)、裸花紫珠低(0.188 g提取物/kg)、中(0.375g提取物/kg)、高剂量组(0.750g提取物/kg),连续给药3d后测定受试动物的出血时间(Bleeding time,BT)和凝血时间(Clotting time,CT)。取雄性SD大鼠50只,随机分为空白对照组、云南白药组(0.93 g/kg)、裸花紫珠低(0.131g提取物/kg)、中(0.261g提取物/kg)、高剂量组(0.523g提取物/kg),连续给药10d。给药结束后分别测定血小板(Platelet,PLT)计数、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)诱导的血小板聚集以及血小板中P-选择素(P-Selectin)含量,观察裸花紫珠提取物对血小板数量及活性的影响。采用Western Blot法,检测裸花紫珠提取物对血小板中p-Akt表达的影响。结果:给药后,裸花紫珠正丁醇提取物可显著缩短小鼠的出血时间和凝血时间。与正常组相比,0.131、0.523g裸花紫珠提取物/kg BW均可显著增加大鼠血小板计数。裸花紫珠正丁醇提取物可显著促进ADP诱导的血小板聚集;进一步研究表明,裸花紫珠提取物可显著增加血小板内P-selectin的表达,并促进Akt蛋白的磷酸化。结论:裸花紫珠提取物具有明显的止血作用,促进血小板PI3K/Akt信号转导、刺激血小板的活化可能是其止血作用的机制之一。