硒化紫球藻(Porphyridiumsp.)胞外多糖增强小鼠免疫功能的初步研究

目的研究硒化紫球藻胞外多糖对小鼠免疫功能的影响。方法采用在培养液中添加亚硒酸,制备硒化紫球藻胞外多糖(Se-PSP);小鼠分别腹腔注射紫球藻胞外多糖(PSP)及硒多糖(Se-PSP)(100 mg.kg-1.d-1),14d后进行外周血白细胞计数、免疫器官称重并且应用炭粒廓清法和溶血素测定法测定单核细胞吞噬功能和B淋巴细胞的体液免疫功能。结果与结论PSP对小鼠免疫功能无显著影响,而Se-PSP能明显增强小鼠的免疫功能。

紫球藻(Porphyridium cruentum)原生质体分离研究

收集对数生长期的紫球藻细胞 ,经 1%氯化苄预处理后 ,用 1 8%纤维素酶和 1 2 %果胶酶组成的混合水解酶液 (含 0 6mol/LNaCl,pH7 2 ) ,在 2 8℃下缓慢振荡酶水解细胞壁 ,4h后原生质体分离率比未预处理组提高 74% ,在最佳分离条件下的原生质体分离率高达 5 6 4% ,基本能满足原生质体融合的需求。

高耐盐紫球藻资源筛选及其miR398-CSD盐胁迫应答模式研究

紫球藻是一类极具开发潜力的特色微藻,本研究旨在筛选、鉴定一批高耐盐紫球藻株,并对其miR398-CSD盐胁迫应答模式进行研究,以期为特色紫球藻的工业化高效应用及其耐盐机理机制的研究奠定基础。以国内外不同品系的紫球藻为试材,采用形态学、生理学、系统进化的方法分析其基本特征,从中筛选高耐盐品系;用高通量测序及生物信息学技术,鉴定紫球藻miR398及其靶基因CSD序列,分子生物学技术对其抑制类型进行验证;用stem-loop qRT-PCR和qRT-PCR技术,对紫球藻高耐盐品系不同盐度胁迫下的miR398及CSD表达模式进行分析。7株藻株均属于紫球藻属,系统进化上可划分为3簇,其细胞形态均符合典型的紫球藻特征,P1和P4属于高耐盐品系;miR398以切割抑制的方式对其靶基因CSD进行抑制,紫球藻miR398的表达随盐度的升高而下调,CSD则随盐度的升高而上调。研究结果为高耐盐紫球藻资源的开发利用及miRNAs分子定向改良藻株品质奠定基础。

铜绿紫球藻(Porphyridium aerugineum)755培养的研究

紫球藻是一种具有潜在应用价值的经济微藻 ,它的生长速率受各种环境因子的影响。本文研究了不同光强、光周期、盐度、NaHCO3浓度、葡萄糖浓度、培养方式等因子对铜绿紫球藻(Porphyridiumaerugineum) 75 5生长的影响 ,并确定其最佳的培养条件。此外还分析了该藻的吸收光谱 。

6-苄氨基嘌呤(6-BA)对紫球藻(Porphyridium purpureum)脂肪酸生物合成的影响

研究不同浓度的外源细胞分裂素（又名6-苄氨基嘌呤,6-BA）对紫球藻（Porphyridium purpureum）生长及合成脂肪酸含量与成分的影响.在人工海水培养基（ASW）中,添加不同浓度的6-BA,在一定条件下进行光照培养（25℃,8 800lx连续光照,1L/min连续通气）,诱导藻细胞合成并积累多不饱和脂肪酸.结果表明：随着培养时间的延长,紫球藻的生物量逐渐增加;与对照组相比,添加0.6-6.0mg/L的6-BA对紫球藻的生长有不同程度的促进作用,其中0.6mg/L 6-BA对藻细胞生长的促进作用最显著,促进效果随6-BA浓度升高依次递减,但当质量浓度增加到9.0mg/L时,6-BA抑制了紫球藻的生长;添加6.0mg/L 6-BA不仅促进紫球藻总油脂的积累,还有利于紫球藻合成不饱和脂肪酸.

免疫金定位紫球藻（Porphyridiumcruentum）内的RuBP羧化酶

免疫金定位紫球藻（Ｐｏｒｐｈｙｒｉｄｉｕｍｃｒｕｅｎｔｕｍ）内的ＲｕＢＰ羧化酶＊王美琪王伟君高小彦（中国科学院上海植物生理研究所，上海２０００３２）ＣＯ２的同化是植物光合作用的主要过程之一，无论高等植物和绿藻中ＲｕＢＰ羧化酶在催化ＣＯ２的同化都起着重...

含硒紫球藻胞外多糖的制备及对体内外肿瘤细胞生长的影响

采用在培养液中添加亚硒酸来实现藻对无机硒的富集和转化,制备一种含硒的紫球藻(Porphyridiumsp.)胞外多糖(Se-PSP);通过DAN荧光法测硒含量及红外光谱,对硒是否结合在多糖上进行了初步探讨;用四唑盐比色法(MTT)研究了不同浓度含硒的紫球藻胞外多糖对3种体外肿瘤细胞生长的影响。通过建立荷瘤小鼠模型,研究了含硒多糖对腹水瘤S180的作用。结果表明含硒的胞外多糖含硒量约为0.015mg/g,40,80mg/LSe-PSP对3种肿瘤细胞SMMC7721、A549、A357均有一定程度的抑制作用,尤其是对SMMC7721抑制程度最为明显。荷瘤小鼠模型实验结果表明100mg/(kg.·d)Se-PSP可以延长荷瘤小鼠的生存时间,Se-PSP有可能成为一种抗肿瘤药物。

紫球藻及其应用研究

紫球藻是一种有较大经济价值的海洋单细胞红藻,其生长过程中合成的藻红蛋白、高不饱和脂肪酸和紫球藻多糖等多种生物活性产物具有广阔的应用前景及较大的潜在市场。国外有关学者已经对紫球藻进行了相关的开发研究并取得了良好的进展,但国内在该领域的研究较少.本文综述了紫球藻的生物学和培养特性、经济价值和开发前景等相关问题,以期引起国内有关学者对紫球藻的研究和开发兴趣。

紫球藻多糖的降解及其体外抗氧化活性

采用过氧化氢辅助超声波降解法制备低相对分子质量紫球藻(Porphyridium cruentum)多糖,测定降解后寡糖对3种自由基的清除能力,考察相对分子质量对多糖抗氧化活性的影响。结果显示:多糖的降解率随过氧化氢的体积分数(φH2O2)、超声时间和反应温度的增加而增加;相对分子质量随三者的增加而降低,当φH2O2、超声时间和反应温度分别为8%、6 h和70℃时趋于稳定,分别获得了平均分子量为203.6、606.6和730.2 ku的寡糖。抗氧化实验表明:相对分子质量小的多糖对自由基有明显的清除作用,相对分子质量对其抗氧化活性有显著影响,相对分子质量为203.6 ku的寡糖活性最好。

红外线和植物生长物质对紫球藻生长及代谢的影响

特定红外辐射能促进紫球藻Porphyridium purpareum生长 ;植物生长物质 ,即吲哚丁酸(IBA)、三十烷醇 (TA)及其复配形式对紫球藻的光合作用、呼吸作用、生长繁殖等生理过程皆有促进作用 ;正交实验结果表明 ,植物生长物质最佳组合为TA 1 .0 μg·ml- 1 ,IBA 0 .1 μg·ml- 1( 1 0∶1 )。

紫球藻对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的调节

目的研究紫球藻对四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖水平及抗氧化能力的影响。方法用四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型,紫球藻藻粉600mg.kg-1和1200mg.kg-1灌胃给药,连续18d后,测定空腹12h血糖、血浆胆固醇、甘油三酯含量和SOD活性。结果与糖尿病模型组相比,两实验组小鼠的血糖显著降低(P<0.001);血浆甘油三酯水平呈下降趋势。1200mg.kg-1紫球藻给药组小鼠血浆SOD活性显著升高(P<0.01)。结论紫球藻能降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖并呈现一定的抗氧化能力。

紫球藻对抗生素的生物学效应

研究了基因工程中常用抗生素标记对紫球藻的生物学效应,结果表明紫球藻对青霉素、链霉素、庆大霉素以及卡那霉素较不敏感,剂量在100u/mL以下对其生长无显著影响,但能抑制或杀灭伴生的杂菌,因此这些抗生素可用于藻种纯化过程中抑菌;紫球藻对红霉素、氧氟沙星和土霉素非常敏感,低质量浓度就能杀死藻细胞,可用作基因工程或遗传育种的抗药性选择标记;对四环素和氯霉素较为敏感,明显抑制细胞生长,并呈浓度梯度效应.

有机物质对紫球藻生长的影响

研究了有机碳、氮源及 B族维生素对紫球藻生长的影响。葡萄糖促生长作用最佳 ,添加 2 % (W/V)葡萄糖时 ,藻细胞生长速度比对照组明显提高 ,培养 10 d收获的生物量增加 92 .6 % ,培养液中的溶解氧含量和藻体叶绿素 a含量也有变化。有机氮源的利用率低 ,仅蛋白胨、酵母汁可被利用。维生素 B2 和 B12 也有促长作用。

紫球藻藻红蛋白的分离纯化及光谱特性研究

紫球藻（Ｐｏｒｐｈｙｒｉｄｉｕｍ ｃｒｕｅｎｔｕｍ）的水溶性色素粗提物经过固体硫酸铵沉淀和羟基磷灰石（ＨＡ）柱层析后，可以分离出较纯的Ｂ－藻红蛋白（Ｂ－ＰＥ），纯度（ＯＤ５４５ｎｍ／ＯＤ２８０ｎｍ）为３．０。测定了Ｂ－ＰＥ的紫外可见光吸收光谱和荧光光谱以及紫球藻活体吸收光谱。Ｂ－ＰＥ在５４５ｎｍ和５６３ｎｍ各有一个峰，在４９８ｎｍ有一肩峰，与活体吸收光谱相比较只是最大吸收峰向短波方向移动了５ｎｍ。激发光谱在５５３～５６７ｎｍ有一峰，在５００ｎｍ和５３６ｎｍ各有一肩峰，室温荧光发射峰在５７８ｎｍ左右。

培养条件对紫球藻生长及代谢产物产生的影响

就接种量、装液量、光强和pH值等影响紫球藻生长及代谢产物产生的因素进行了研究.实验结果表明pH5～9之间对藻生长无明显影响,当pH6.5时有利于代谢产物的产生;光照强度对藻生长影响较大,光强为2500lx有利于其生长,光强为3500lx有利于胞外多糖的积累;1.59×106/mL接种量有利于藻生长,也有利于胞外多糖和β-胡萝卜素的积累;低装液量对藻生长和代谢产物的积累都有利.

紫球藻多糖的提取和测定

本文用蒽酮法对紫球藻细胞和培养液中的多糖分布和含量进行了测定。结果表明，藻体细胞中的多糖含量因部位的不同分别占藻体干重的３％～７％，培养液中的多糖随着培养时间增加而增加，因培养时间的不同其含量为６～４５μｇ／ｍｌ不等。

硒对紫球藻抗氧化酶活性及丙二醛含量的影响

利用添加0.5mg.L-1硒的人工海水(ASW)培养基培养紫球藻Porphyridium sp.UTEX 637,并采用试剂盒、氯化硝基四氮唑蓝(NBT)光化学还原反应法、紫外分光光度法、硫代巴比妥酸(TBA)分析法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性及丙二醛(MDA)的含量,着重探讨硒对紫球藻抗氧化酶活性及丙二醛含量的影响。结果表明,硒明显促进紫球藻细胞的GSH-Px活性(p<0.05)。加硒处理组和未加硒对照组紫球藻的GSH-Px活性均在第15天达到最高;加硒组紫球藻的最大酶活性达到4.31个酶活力单位(U),为对照组的1.31倍。SOD和CAT的活性分别在第18天和15天达到最大值,但加硒组与对照组之间差异不显著(p>0.05),说明0.5mg.L-1硒对紫球藻的SOD和CAT活性影响不明显。加硒能明显降低藻细胞丙二醛的含量,加硒组藻细胞的丙二醛含量比对照组藻细胞的丙二醛含量降低了15.21%。

紫球藻培养条件优化

对影响紫球藻生长的KH2PO4，N4NO3，N3HCO3，VBI和VB12等五种主要营养因素进行了优化，获得了以海水为基础的优化培养基配方，有效地提高了紫球藻的生物量产量，为该微藻的进一步高密度放大培养提供了依据．此外，研究发现紫球藻也能利用有机氮源，在培养中流加适量的尿素能促进藻体细胞的生长．

紫球藻胞外多糖抗柯萨奇B_3病毒活性

采用离子交换凝胶QSepharoseFastFlow,以NaCl梯度洗脱,将紫球藻胞外多糖 (ESPS)分离成3个组分ESPS0、ESPS1.0和ESPS1.6,分别占粗多糖总量的44.2%(以质量 计,下同),20.3%和16.4%.ESPS0中未测出蛋白,ESPS1.0和ESPS1.6的蛋白含量分别为 7.8%和7.6%;ESPS0、ESPS1.0和ESPS1.6的硫酸基含量分别为16.3%,11.6%和8.3%.利 用体外模型测试了3个组分的抗CVB3病毒的活性.发现ESPS0,ESPS1.0和ESPS1.6抑制 CVB3病毒的半数抑制质量浓度分别为2.03,0.51和0.53mg/L,治疗指数IT值分别为 61.6,245.1和235.8;在相同条件下,阳性对照药物病毒唑的半数抑制质量浓度和IT值 分别为31.25mg/L和16.0.结果表明,3种组分抗CVB3活性均高于病毒唑.

紫球藻细胞破碎方法研究

采用反复冻融法和超声波细胞破碎法分别对不同密度的紫球藻细胞进行了破碎研究,并通过细胞计数和藻红蛋白含量测定的手段对两种方法所得细胞破碎效率进行了比较。结果表明,随着冻融温度的降低,细胞的破碎率明显增大,而藻液密度对破碎率的影响较小。超声波法对细胞的破碎率明显高于冻融法,其中占空比和破碎时间两个因素对细胞的破碎率影响较大,在占空比为 50 %、输出功率为 150 W 和时间 20 min 的条件下,紫球藻细胞的破碎率可达到 87.4 %,并且随着细胞破碎效率的提高。