竞争ELISA检测猪呼吸与繁殖综合征病毒抗体研究

应用抗PRRSN蛋的单克隆抗体建立了竞争ELISA检测技术,与美国IDEXX公司的间接ELISA检测试剂盒对比检测了30份SPF猪血清,29头SPF猪人工接种呼吸与繁殖综合征病毒后于5d、12d、29d采集的猪血清共87份,临床血清95份,以及其他相关病毒的阳性血清。实验证明,竞争ELISA的检测阴阳性限值为30%,检测特异性为100%,在人工攻PRRSV病毒第五天的猪血清中,可检测到抗PRRSVN蛋白抗体,12dpi,阳性检出率为93%,29dpi,阳性检出率为100%,与IDEXXPRRSVELISA试剂盒进行比对,结果表明,二种检测方法检测美洲株PRRSV抗体的符合率为90%以上,但检测欧洲株抗体符合率较低。建立的竞争ELISA检测技术对于PRRSV美洲株抗体的早期诊断有非常重要的意义。

拉米夫定对猪呼吸繁殖综合征病毒的体外抑制作用研究

目的 研究拉米夫定体外对猪呼吸繁殖综台征病毒(PRRSV)的抑制作用,并为今后深入研究其作用机理提供分析物。方法 采用体外细胞培养,采用CPE法观察拉米夫定抑制PRRSV对Marc145细胞的致病力,确定其抗病毒作用强度。结果 拉米夫定体外对PRRSV具有较好的抑制作用,其有效浓度范围在5～20μg/ml,且预防性用药效果优于感染后用药。结论拉米夫定对PRRSV病毒有较好的抑制作用。

猪呼吸与繁殖综合征的防治

猪呼吸与繁殖综合征,又被称为"猪蓝耳病"、"神秘猪病"等,据研究显示,该病是由鼠的乳酸脱氢酶增高病毒变异引发而成,严重影响猪只的成长发育。通过对猪呼吸与繁殖综合征临床症状介绍,探讨了其发病原因,以及该病的诊治防控措施,旨在最大程度上降低养猪场猪只猪呼吸与繁殖综合征患病几率,保护养殖户的生命财产安全。

关于猪呼吸与繁殖综合征病毒的研究

猪呼吸与繁殖综合征又被叫做猪蓝耳病,是一种高接触性、高致病性的由病毒引起的传染病,是由猪的呼吸和繁殖的相关病毒引发的,其爆发速度很快,引起学界的广泛关注。本文主要是通过对此病病因的介绍、临床症状和防疫措施来进行介绍,对此病的一些防控要点提出自己的建议和意见,促进猪场经济的繁荣发展。

猪呼吸与繁殖综合征病毒综述

早在20世纪80年代末美国就在猪群中发现了一种新疾病,其临床症状在妊娠母猪表现为后期出现严重的繁殖障碍;初生仔猪多孱弱并伴有严重的肺炎;育成猪生长缓慢,且死亡率增高。德国在1990年也发现了类似症状的疾病,并且这一疾病在往后的几年里迅速传至欧洲其他国家。尽管当时有几种关于该病病原的说法,但真正致病的病原并不清楚,因而在美国该病得名“神秘的猪病”或被称为“猪流行性流产和呼吸症”。

断奶仔猪呼吸与繁殖综合征和猪瘟混合感染的诊断

采集江苏常州地区某猪场40日龄病死断奶仔猪的肺、脾、淋巴结,经过处理提取组织中的总RNA后,随机引物反转录,以得到的总cDNA为模板特异性PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳。鉴定结果:扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测出猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)及猪瘟病毒(HCV)的特异性条带。结合该场的病史、流行病学调查及病理变化,表明该猪场断奶仔猪发生的疫病为猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(HCV)混合感染。

谱系1和8重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定与遗传进化分析

2023年从广西疑似发生猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪场的病猪肺脏组织中分离到1株PRRSV,将其命名为GXWZ20230831。采用RT-PCR扩增其全基因组序列并测序,分析遗传进化特点。结果显示,GXWZ20230831能够在Marc-145细胞上增殖,且产生明显的细胞病变;该毒株全基因组长度为15019个核苷酸(nt),与基因2型PRRSV谱系1 NADC30-like毒株的同源性最高,为94.0%,与基因1型PRRSV代表毒株Lelystad virus同源性最低,仅为60.0%;通过Nsp2氨基酸序列比对,结果发现GXWZ20230831存在NADC30-like典型的131(111+1+19)个氨基酸的不连续缺失模式;与美洲型代表株VR2332相比,GXWZ20230831的GP5蛋白在非中和抗原表位发生了V27A、V185A以及R191K 3处突变,同时在GP5蛋白中存在4个潜在的N-糖基化位点;构建的全基因组序列、nsp2基因、ORF5基因遗传进化树均显示该毒株处于谱系1的分支;重组分析表明,GXWZ20230831是1株以谱系1经典毒株NADC30为骨架,谱系8毒株提供重组片段的重组毒株,重组断点位于基因组的nsp1(458-1821 nt)和Nsp4(5405-8179 nt)中。研究结果可为掌握广西地区的PRRSV遗传变异规律提供参考,为制定防控措施提供科学依据。

猪繁殖与呼吸综合征病毒入侵宿主细胞途径研究进展

病毒入侵宿主细胞是其完成自身复制周期的首要步骤。全面解析病毒入侵宿主细胞途径可深入揭示病毒感染及其致病机制,有助于制定更为有效的抗病毒策略。猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是具有囊膜的单股正链RNA病毒,对全球养猪业造成巨大的经济损失。以往研究报道PRRSV主要通过网格蛋白介导的内吞途径(CME)入侵宿主细胞。近年来研究发现,除CME外,PRRSV还会采取其他途径入侵宿主细胞。本文通过总结PRRSV入侵宿主细胞途径的最新研究进展,以期加深人们对PRRSV的认识,并为防控该病毒提供新的思路。

2021-2023年河南部分地区猪场猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征和猪伪狂犬病抗体检测与分析

为了解河南省猪场主要病毒性疾病抗体水平,于2021-2023年共采集8014份血清样品,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对所采集的样品进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒gE(PRV-gE)、猪伪狂犬病病毒gB(PRV-gB)的抗体水平进行检测。结果显示,CSFV抗体的总阳性率为85.70%(6868/8014),PRRSV抗体的总阳性率为81.83%(6558/8014),PRV-gE抗体的总阳性率为11.08%(888/8014),PRV-gB抗体的总阳性率为83.10%(6660/8014)。研究表明,CSFV总体疫苗免疫抗体水平良好,能够有效地控制该病在猪场的发生与流行,但猪群仍存在PRRSV和PRV的感染风险,需要完善免疫方案、加强防控。研究结果可为猪场制定合理的免疫程序提供参考,促进养猪行业的健康发展。

猪繁殖与呼吸综合征病毒的持续感染和传播特点及防控出路

1PRRS简述。1987年,美国首次暴发猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),随后在世界各国陆续暴发该病,截至目前PRRS已遍布世界主要的养猪业国家,成为各国养猪业最为严重的疫病之一,每年给全球养猪业造成数十亿甚至上百亿美元的经济损失。

一起输入性猪繁殖与呼吸综合征疫情的紧急流行病学调查

自2023年6月4日开始,四川省金堂县某生猪代养场引进的仔猪陆续出现异常死亡情况。为确定病因,分析来源,评估传播风险,赴现场开展了紧急流行病学调查。该猪场于2023年5月20—30日分4批共引进仔猪2200头,截至7月14日,共有222头仔猪发病,124头死亡,袭击率为10.09%,病死率为55.86%。经现场临床诊断、病死猪病理剖检、实验室检测及干预治疗效果印证,综合判定病因为猪繁殖与呼吸综合征病毒感染。经追踪调查,该发病猪场无生猪调出,与该猪场有流行病学关联的其他猪场未出现类似发病情况,因此判定疫情扩散风险较低。溯源调查发现发病仔猪的来源种猪场曾发生过猪繁殖与呼吸综合征疫情,现场调查发现该发病猪场生产管理规范,且周边养殖场未出现猪只异常死亡情况,因此综合判定疫情由引进带毒仔猪引起。本起疫情警示,养殖场在引种前应先确认种源场的疾病流行情况,同时加强引种检疫,尽可能避免输入性疫情发生。

猪繁殖与呼吸综合征防控措施

猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV)是一种高度传染性疾病,本文通过结合PRRSV毒株变异速度快、病毒抗体依赖性增强作用等流行病学特点,阐述了疫苗不合理应用以及免疫抑制机制造成的难以防控的原因,并提出相应的防控措施。

猪繁殖与呼吸综合征毒株的鉴定与分析

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproducductiveandrespiratory syndrome,PRRS)是引起成年猪出现繁殖障碍、产死胎和木乃伊胎、早产、流产,仔猪发生呼吸系统疾病和大量死亡的一种高度传染性疾病,传播范围广、速度快。该病病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproducductiveandrespiratory syndrome virus,PRRSV)。

猪繁殖与呼吸综合征病毒促进猪链球菌2型感染猪肺泡巨噬细胞的初步研究

为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)对不同毒力猪链球菌2型(SS2)感染巨噬细胞的影响,本研究建立了高致病性PRRSV Li11株和SS2强毒株HA或无毒菌株T1/5共感染永生化猪肺泡巨噬细胞(iPAM)的模型,实验分为4组:HA单独感染组(HA组)、PRRSV-HA共感染组(PRRSV-HA组)、T1/5单独感染组(T1/5组)和PRRSV-T1/5共感染组(PRRSV-T1/5组),利用该模型通过黏附试验、侵入试验和细胞内存活试验检测PRRSV对HA和T1/5黏附、侵入iPAM细胞及对该细胞存活率的影响,进一步利用荧光定量PCR方法检测各感染组iPAM模型细胞中细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-8、IFN-β)的转录水平。黏附试验结果显示,HA感染2 h后,PRRSV-HA组细菌对细胞的黏附水平极显著高于HA组(P<0.01或P<0.001);T1/5感染6 h后,PRRSV-T1/5组细菌对细胞的黏附水平极显著高于T1/5组(P<0.001),表明PRRSV与HA或T1/5共感染可以促进HA和T1/5对iPAM模型细胞的黏附,且HA对iPAM细胞的黏附水平高于T1/5。侵入试验结果显示,感染4 h后,共感染组细菌侵入iPAM细胞中的数量比单独感染组极显著增多(P<0.01或P<0.001)。细胞内存活试验结果显示,感染2 h后,共感染组细菌的存活率比单独感染组极显著升高(P<0.001)。荧光定量PCR试验结果显示,感染4 h时,共感染组iPAM细胞中细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-8、IFN-β)的转录水平极显著高于单独感染组(P<0.001)。本研究首次建立了高致病性PRRSV Li11株和SS2强毒株HA或无毒菌株T1/5共感染i PAM的模型,基于该模型研究首次发现PRRSV感染不仅促进了不同毒力SS2对i PAM细胞的黏附、侵入及SS2在iPAM细胞内的存活,还可以协同SS2显著提高该细胞中细胞因子的转录水平。本研究为进一步探究PRRSV和SS混合感染的机制提供了参考依据。

不同猪繁殖与呼吸综合征疫苗组合体液免疫效果评估

为了比较不同猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗不同免疫程序对体液免疫效果的影响,本试验选择新引进猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原和抗体均为阴性后备母猪的3个猪场,将各场内猪只按体重分为3个阶段:7~20、20~35和35~50 kg,各场分别从中选取20头猪,共180头猪。每场选用1种免疫方案,第1组混合疫苗组,为首次免疫PRRS弱毒疫苗(CH-1R株),28 d后加强免疫PRRS灭活疫苗(CH-1a株);第2组弱毒疫苗组,为2次均免疫PRRS弱毒疫苗;第3组灭活疫苗组,为2次均免疫PRRS灭活疫苗。疫苗首次免疫后14、28、42和56 d采集猪血清,进行特异性PRRSV ELISA(N蛋白)检测和中和抗体评价;首次免疫后14和28 d采集猪血液,进行PRRSV实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测血液内是否存在PRRSV;统计试验猪分娩后头胎的活仔数、断奶仔猪数和窝均总仔数,进行临床数据比较分析。结果显示,35~50 kg体重阶段猪只接种疫苗后ELISA检测抗体水平增高较其他2个阶段更明显。混合疫苗组在免疫56 d时血清ELISA阳性率为100%,且ELISA结果极显著高于弱毒疫苗组和灭活疫苗组(P<0.01)。尽管各组没有产生特异性抗NADC30-like毒株的中和抗体,但针对PRRSV经典和高致病性毒株的中和抗体保护效价结果显示,混合疫苗组在免疫56 d时中和抗体效价极显著高于弱毒疫苗组和灭活疫苗组(P<0.01);RT-qPCR检测未发现阳性猪;各组试验猪分娩后头胎的活仔数、断奶仔猪数和窝均总仔数之间差异不显著(P>0.05)。结果表明,混合疫苗组对体液免疫的促进效果显著优于弱毒疫苗组和灭活疫苗组。该试验为临床正确选择PRRS疫苗免疫方案提供了科学数据。

2016-2020年云南省部分猪场猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体检测分析

为了解2016年-2020年云南省部分地区猪场猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫情况,采集了云南省9个州市188个健康猪场的4179份血清样品,应用ELISA方法进行猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测,分析不同州市、不同年份的猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阳性率。结果显示,4179份血清样品中,阳性样品2932份、阴性样品1247份,总体抗体阳性率为70.16%;2016-2018年云南省部分地区抗体阳性率分别为76.97%、76.32%、75.75%,达到我国农业农村部要求的猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阳性率70%的标准;2019-2020年抗体阳性率分别为63.68%、56.50%,未达到农业农村部规定的标准。9个州市中,保山、楚雄、红河、普洱、版纳、玉溪的抗体阳性率分别为84.85%、70.75%、76.46%、80.67%、76.82%、81.39%,达到农业农村部规定标准;大理、昆明、曲靖抗体阳性率分别为61.89%、67.42%、57.88%,未达到农业部规定标准。结果表明,云南省部分地区总体猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阳性率呈现下降趋势,各州市抗体阳性率也存在差异性。为了降低猪繁殖与呼吸综合征疫情发生风险,建议定期做好猪繁殖与呼吸综合征病毒血清学、病原学监测,优化猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫策略,制定更加科学合理的综合防控方案,从而进一步保障云南省生猪养殖业高质量发展。