红三叶异黄酮对去卵巢大鼠钙磷代谢及VDR和CaBP-9k mRNA表达的影响

【目的】研究岷山红三叶(Trifolium pratense cv.Minshan)异黄酮(isoflavone,ISO)调节动物钙、磷吸收与代谢的作用。【方法】选择80只SD(Sprague-Dawley)雌性大鼠(50~60日龄),随机分为8组(每组10只),其中1~7组为去卵巢(ovariectomized,OVX)+红三叶异黄酮组,分别按320、160、80、40、20、10和0 mg/(kg·d)的量灌胃红三叶异黄酮,第8组为假手术组,灌服等量生理盐水,试验期60 d。【结果】40~320 mg/(kg·d)的灌服量可提高去卵巢大鼠血清钙含量,大鼠胫骨灰分、胫骨钙含量和钙磷比均随灌服量上升而增高;20~40 mg/(kg·d)灌服量上调大鼠小肠VDR mRNA及CaBP-9K mRNA的表达促进小肠对钙的吸收,160~320 mg/(kg·d)灌服量上调大鼠肾脏VDR mRNA的表达促进肾小管对钙、磷的重吸收。【结论】岷山红三叶异黄酮对去卵巢大鼠小肠钙吸收和肾脏钙重吸收及骨的生长、矿化有一定促进作用。

mfn2基因在猫爪草皂苷、红三叶异黄酮治疗乳腺癌中的作用机制研究

目的:研究mfn2基因在猫爪草皂苷、红三叶异黄酮抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖及诱导其凋亡中的作用。方法:采用不同浓度的猫爪草皂苷和红三叶异黄酮分别处理MCF-7细胞24,48及72h,进行体外细胞培养,用实时荧光定量PCR法检测mfn2基因的相对表达情况。结果:高浓度的猫爪草皂苷(100 mg·L^(-1))作用MCF-7细胞48h后,明显促进mfn2基因的表达,并且随时间延长更加明显;红三叶异黄酮在作用MCF-7细胞48,72 h后,显著抑制mfn2基因的表达。结论:高浓度的猫爪草皂苷可能是通过促进mfn2基因的表达,来抑制MCF-7细胞增殖及诱导其凋亡,红三叶异黄酮的作用机制有待于进一步研究。

红三叶异黄酮对低温诱发肉鸡腹水综合症发生和抗氧化性能的影响

观察在低温环境下红三叶异黄酮对肉鸡腹水综合症的防治效果及其对肉鸡抗氧化性的影响。300羽肉鸡随机分为3组:常温对照组,低温组、低温黄酮组,采用低温诱发AS,记录AS发病数,并分别于14,21,28,35和42d从各组随机抽取6羽肉鸡取样,测定右心肥大指数,红细胞压积,血清和肝脏组织的SOD、MDA和GSH-Px等指标。结果表明环境低温使肉鸡腹水综合症发病率升高,肉鸡日粮添加红三叶异黄酮能够有效地降低寒冷诱发的AS发病率,右心肥大指数和红细胞压积,并提高了抗氧化性能。

岷山红三叶异黄酮对产蛋后期母鸡生产性能、骨矿化及血液指标的影响

试验旨在研究岷山红三叶异黄酮对产蛋后期母鸡生产性能、骨矿化、血清生化指标、内分泌激素水平等的影响。将50周龄罗曼蛋鸡450羽,随机分成5组,每组6个重复,每个重复15羽。1组(对照)饲喂玉米-豆粕-杂粕型基础饲粮,2,3,4,5组分别在基础饲粮中添加5,10,20 mg/kg红三叶异黄酮和20 mg/kg大豆异黄酮(参比)。预试期2周,正试期10周。结果表明,1)各组生产性能和蛋品质无显著差异(P>0.05),呈现出添加红三叶异黄酮提高而添加大豆异黄酮(5组)降低蛋壳强度的趋势(P=0.213);2)4组脾脏指数高于1,3(P<0.05)和5组(P=0.150);3)4组胫骨灰含量高于1,2组(P<0.05),3,5高于2组(P=0.140,P=0.152);4)添加红三叶异黄酮各组血清钙含量提高(P=0.091),大豆异黄酮提高血清钙含量的作用似更强;5)4组血清甲状腺素(T4)含量高于1(P<0.05)和2,3组(P=0.150,P=0.20),5组高于1组(P=0.074)。结果提示,饲粮中添加5,10,20 mg/kg红三叶异黄酮和20 mg/kg大豆异黄酮对产蛋后期母鸡产蛋性能无显著影响;添加红三叶异黄酮一定程度上改善了蛋壳强度,添加量20 mg/kg促进了骨矿化。

红三叶异黄酮对肉鸡血液几种内源性激素水平的影响

本试验旨在研究饲粮中添加红三叶异黄酮对肉鸡血液几种内源性激素水平的影响。选取1日龄雄性爱拔益加肉仔鸡240羽,随机分为4组(每组4个重复,每个重复15只),分别饲喂在基础饲粮中添加0(对照组)、10(试验Ⅰ组)、20(试验Ⅱ组)、30 mg/kg(试验Ⅲ组)红三叶异黄酮的试验饲粮。试验持续7周。结果表明:试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的平均日增重显著或极显著高于对照组和试验Ⅲ组(P<0.05或P<0.01)。各试验组料重比均低于对照组,但差异不显著(P>0.05)。血清生长激素(GH)水平,试验Ⅱ组在21、35和49日龄均显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),试验Ⅰ组在49日龄、试验Ⅲ组在21日龄显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);血清类胰岛素生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)水平,各试验组在21日龄均显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅱ组在49日龄显著高于对照组和其他试验组(P<0.05);血清三碘甲腺原氨酸(T3)水平,试验Ⅰ组在35和49日龄、试验Ⅱ组在49日龄均显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);血清四碘甲腺原氨酸(T4)水平,试验Ⅰ组和试验Ⅲ组在35日龄显著低于对照组(P<0.05);血清T3/T4,各试验组在21、35和49日龄均高于对照组,并且在35和49日龄试验Ⅰ组与对照组达到显著水平(P<0.05);血清睾酮(TESTO)水平,各组在21、35和49日龄均无显著差异(P>0.05)。由此得出,红三叶异黄酮可通过调节体内GH、IGF-Ⅰ、T3和T4水平来影响肉鸡的生长性能,饲粮中添加20 mg/kg时促生长效果较好。

红三叶异黄酮对去卵巢大鼠生长性能、血清激素指标和子宫形态结构的影响

本试验旨在研究红三叶异黄酮对去卵巢大鼠生长性能、血清激素指标和子宫形态结构的影响。试验选用体重为(200±5)g、3月龄的无特定病原体(SPF)级雌性SD大鼠30只,适应1周后随机分为5组(每组6只),分别为假手术组(暴露卵巢并用镊子碰触卵巢表面后缝合创口)、对照组(切除卵巢)以及低、中和高剂量红三叶异黄酮组[切除卵巢并分别按体重灌胃10、30和100 mg/(kg·d)红三叶异黄酮]。用0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液将红三叶异黄酮配制成所需浓度,每只灌胃4 mL/d;对照组和假手术组灌胃等量的0.5%CMC-Na溶液。试验期21 d。结果表明:1)低、中和高剂量红三叶异黄酮组大鼠的平均日采食量均显著高于对照组(P<0.05),高剂量红三叶异黄酮组大鼠的平均日采食量显著高于假手术组(P<0.05)。对照组及低、中和高剂量红三叶异黄酮组大鼠的平均日增重均显著高于假手术组(P<0.05),低、中和高剂量红三叶异黄酮组大鼠的平均日增重显著高于对照组(P<0.05)。对照组及低、中和高剂量红三叶异黄酮组大鼠的料重比均显著低于假手术组(P<0.05),低、中和高剂量红三叶异黄酮组大鼠的料重比均显著低于对照组(P<0.05)。2)假手术组和低剂量红三叶异黄酮组大鼠的血清雌二醇含量显著高于对照组(P<0.05),高剂量红三叶异黄酮组大鼠的血清促卵泡激素含量显著高于假手术组(P<0.05),假手术组及低、中和高剂量红三叶异黄酮组大鼠的血清促黄体生成素含量均显著高于对照组(P<0.05)。3)高剂量红三叶异黄酮组大鼠的血清生长激素含量显著高于对照组、假手术组和低剂量红三叶异黄酮组(P<0.05),低剂量红三叶异黄酮组大鼠的血清甲状腺素含量显著高于其余各组(P<0.05)。4)对照组及低、中和高剂量红三叶异黄酮组大鼠的血清钙和磷含量均显著低于假手术组(P<0.05)。5)形态学结果显示,红三叶异黄酮处理使大鼠子宫形态结构有不同程度地修复,其中,高剂量红三叶异黄酮组外膜结缔组织结构较正常,肌层腺体无明显增大,管壁较厚,管腔较小,内膜柱状上皮有所改变,修复较好。综上所述,红三叶异黄酮可改善去卵巢大鼠内源激素不平衡的状况,并通过影响血清生殖和生长相关激素含量和钙磷代谢促进大鼠生长。

红三叶异黄酮的提取方法和生理功能

红三叶异黄酮(RCI)作为一类植物雌激素,主要存在于豆科植物红三叶草中。其主要成分为芒柄花素、鹰嘴豆芽素A、染料木素和大豆素,具有弱雌激素作用,且具有抗氧化、抗肿瘤、抗病毒以及改善骨质疏松和妇女更年期综合症等作用。近年来RCI在畜牧业生产中开始被应用,有望被开发为安全有效的绿色饲料添加剂。本文综述了RCI的结构特征、提取纯化鉴定方法、生理功能及其对畜禽生长、免疫、繁殖及骨骼发育的影响及相关作用机制。

超声波提取红三叶异黄酮工艺的研究

对利用超声波提取红三叶异黄酮的工艺进行了研究。结果表明,通过正交试验确定出最佳工艺条件为:乙醇体积分数为95%;乙醇用量(固液比)为11∶0;提取时间为20 min;提取温度为20℃。

红三叶异黄酮对去卵巢大鼠生长性能及血液生化指标的影响

目的研究饲粮中添加红三叶异黄酮(RCI)对去卵巢大鼠生长性能、免疫和抗氧化功能、激素水平、血糖血脂代谢及骨质的影响。方法选3月龄SPF级雌性青年大鼠50只,单因子随机化设计,随机分为:假手术(Sham),去卵巢(OVX),去卵巢加RCI低、中、高剂量组(灌胃30、100、300 mg/kg·d RCI)5组,每组10只,试验期3月。结果 30、100 mg/kg·d RCI能显著提高去卵巢大鼠的生长性能和免疫性能(P<0.05);一定程度上改善去卵巢大鼠的抗氧化性能;能稳定去卵巢大鼠血清激素水平和维持机体正常代谢;能使血清钙磷含量有所升高,对骨生长有一定的促进作用。结论适量添加RCI对去卵巢大鼠的生长、免疫、抗氧化、血清激素水平、代谢及骨质的有明显改善作用。推荐RCI适宜的灌胃剂量为30 100mg/kg·d。

红三叶异黄酮对肉鸡肺血管重构和平滑肌细胞凋亡的影响

为观察在低温环境下红三叶异黄酮对肉鸡肺血管重构和平滑肌细胞凋亡的影响,选取270只10日龄肉鸡,随机分为常温对照组(Ⅰ)、低温组(Ⅱ)和低温黄酮组(Ⅲ),每组6个重复,每个重复15只,Ⅰ组和Ⅱ组饲喂基础饲粮,Ⅲ组饲喂添加红三叶异黄酮20mg/kg的试验饲粮,分别于14,21,28,35,42日龄从各组随机抽取6只肉鸡,观察各组肉鸡肺血管病理形态学变化,检测Caspase-3和Bcl-2蛋白表达情况。结果表明,Ⅱ组肉鸡肺小动脉结构在28,35,42日龄比Ⅰ组肺小动脉管壁有不同程度增厚、管腔变窄,发生了明显的重构现象(P<0.05或0.01)。Ⅲ组与Ⅱ组相比,在28,35,42日龄肺血管重构现象减轻(P<0.05或0.01),肉鸡肺动脉高压综合征(PHS)发病率降低,血管平滑肌细胞Caspase-3蛋白阳性率增高,Bcl-2蛋白表达下降;表明红三叶异黄酮能有效减轻肉鸡肺血管重构,其机制可能与调节平滑肌细胞凋亡有关。

红三叶异黄酮对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用

目的探讨红三叶异黄酮对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用及其作用机制。方法以MTT法检测红三叶异黄酮20、40、80μg/m L分别在24、48、72 h对人宫颈癌HeLa细胞增殖作用的影响,并在倒置显微镜下观察HeLa细胞形态学改变。流式细胞仪检测红三叶异黄酮20、40、80μg/m L对HeLa细胞凋亡的影响。实时荧光定量PCR仪检测红三叶异黄酮20、40、80μg/m L对HeLa细胞凋亡中调节基因Bax、Bcl-2表达水平的影响。结果红三叶异黄酮对人宫颈癌HeLa细胞的增殖抑制作用,表现为时间、浓度的相关性。红三叶异黄酮对HeLa细胞的形态学改变,表现为随药物浓度增加细胞固缩变小,并出现凋亡小体。流式细胞仪检测分析显示红三叶异黄酮能引起HeLa细胞凋亡,并随药物浓度的增加而明显,当红三叶异黄酮达到一定有效浓度时,诱导其细胞凋亡。通过调节Bax mRNA与Bcl-2 mRNA的表达,促进抑制HeLa细胞增殖,能使Bax表达上升、Bcl-2表达下降,且呈剂量相关性。结论红三叶异黄酮对人宫颈癌HeLa细胞的增殖具有抑制作用,并呈一定的剂量和时间相关性,提示通过调节Bax mRNA与Bcl-2 mRNA的表达,促进抑制HeLa细胞增殖。

红三叶总异黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的研究红三叶总异黄酮对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制和凋亡的诱导作用。方法在体外细胞培养下,采用不同质量浓度红三叶异黄酮和5-Fu处理MCF-7细胞,MTT法测定红三叶总异黄酮抑制MCF-7细胞增殖的量-效关系;TUNEL法、流式细胞术分析其细胞凋亡率和周期分布。结果红三叶总异黄酮对MCF-7细胞增殖的抑制作用随药物质量浓度提高和作用时间延长而更加明显,而在低质量浓度时却出现轻微促细胞增殖现象。TUNEL法、流式细胞术分析结果表明,红三叶总异黄酮能诱导MCF-7细胞凋亡,阻滞细胞于G2/M期,降低细胞增殖指数,且这种作用也存在剂量-效应关系。结论红三叶总异黄酮可抑制MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡,具有抗肿瘤作用。

红三叶总异黄酮对人增生前列腺组织基质细胞增殖和凋亡的影响

目的:评价红三叶总异黄酮对人增生前列腺组织基质细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用浓度为12.5、25、50、100μg/ml的红三叶总异黄酮溶液处理前列腺基质细胞,并设立PBS空白对照组,DMSO阴性对照组和浓度为12.5、25.0、50.0、100.0μg/ml的非那雄胺溶液为阳性对照组。MTT法测定红三叶总异黄酮对细胞增殖的影响;AnnexinVFITC/PI双染色法流式细胞术分析红三叶总异黄酮对细胞凋亡的作用。结果:当红三叶总异黄酮浓度达到25.0μg/ml时,其对人前列腺增生组织基质细胞的增殖抑制率为18.86%,与空白对照组(5.17%)相比差异有显著性(P<0.05);且随着药物浓度的增加,抑制作用也愈趋明显。与非那雄胺阳性对照组相比,当浓度达到50.0μg/ml时,红三叶总异黄酮实验组对人前列腺增生组织基质细胞的抑制增殖作用弱于非那雄胺阳性对照组(28.00%vs69.88%),差异有显著性(P<0.05)。流式细胞术分析结果表明,与阴性对照组、空白对照组相比,红三叶总异黄酮浓度达到25.0μg/ml时能够诱导前列腺基质细胞的凋亡,凋亡率为(18.54±2.50)%(P<0.01)。结论:红三叶总异黄酮对前列腺基质细胞有较明显的抑制生长,促进凋亡作用。

红三叶提取物中总异黄酮含量测定的研究

为建立一种检测红三叶提取物中总异黄酮含量的快速分析方法,试验采用紫外分光光度法,以鹰嘴豆芽素A为标准品,在其紫外最大吸收峰260nm处测定提取液中总异黄酮的含量。稳定性试验、重复性试验、精密度试验、加标回收率试验的相对标准偏差分别为0.545%、0.915%、1.722%和1.550%,平均加标回收率为99.92%。结果表明,试验方法具有简便、快速、准确和重现性好等特点。

红三叶的现代研究进展

红三叶（trifolium pratensL.）为豆科多年生草本植物,含有多种异黄酮类物质,这些异黄酮类物质发挥着重要的生物作用,又称红三叶异黄酮（redclover isoflavones,RCI）.其抗肿瘤,抗氧化,提高机体免疫功能,防止前列腺增生,改善更年期综合征以及防止骨质疏松等作用越来越受到关注,此外,在畜牧业和人类保健方面也有应用.现就近期文献做一综述.