生长素与细胞分裂素单独或组合使用对红丝青叶组培苗生长的影响

为探究生长素和细胞分裂素对水生植物组培苗的作用规律,研究了生长素(IAA、IBA和2,4-D)与细胞分裂素(6-KT)对典型水生观赏植物红丝青叶(Hygrophila polysperma)的影响。结果表明,组培培养基中单独添加不同浓度梯度的IAA、IBA、2,4-D或6-KT,组培苗在各种激素处理下,随着浓度的升高,均表现出先促进后抑制的表型,其中IAA组表现显著,因此进一步研究IAA与6-KT的组合使用对组培苗的影响。组合添加IAA与6-KT处理18 d后,随着处理浓度的升高,整体有促进组培苗生长的趋势,其中1.0μg·μL^(-1)IAA+1.0μg·μL^(-1)6-KT的处理效果最好,但随着6-KT浓度的升高,组培苗的叶片更为膨大。组培苗在培养瓶中继续生长67 d后,较高浓度的IAA+6-KT组合的叶片出现卷曲,底部变焦枯。其中1.0~2.0μg·μL^(-1)IAA+2.0μg·μL^(-1)6-KT组合使其组培苗分孽较多,叶片较大,特别是2.0μg·μL^(-1)IAA+2.0μg·μL^(-1)6-KT的处理,进一步检测叶片的可溶性物质含量,发现该组合叶片的丙二醛含量较高,脯氨酸含量较低。综上可知,植物激素在红丝青叶的组织培养中应用浓度不宜过高,1.0μg·μL^(-1)IAA+1.0μg·μL^(-1)6-KT组合短期处理效果最适宜。

水草组培污染防治实验教学改革

为探究水草组织培养污染的污染源及药物防治措施,本研究对水草组培污染防治实验训练进行教学设计,采用水草组织细胞培养课程与水草组培污染防治实验相结合的教学模式,对教学目标与教学内容进行探讨,并分析实验内容及流程。以典型的水草红丝青叶(Hygrophila polysperma)为对象进行组织培养,通过从污染菌中进行细菌和真菌的分离和纯化,采用16S rDNA和ITS基因测序,并结合表型分析进行种类鉴定,明晰了污染菌的种类。进一步对污染菌开展防治药物筛选,通过药敏实验获得了有效的药物组合,加入培养基进行组培培养基优化,取得了一定的抗菌防治效果。该教学模式有利于学生熟练掌握水草组培污染防治技术原理、方案及应用等,为水草扩繁生产和相关科学研究培养专业人才。

水草组培中常见污染菌的初步鉴定分析

本研究以红丝青叶为例,对其组培过程中出现的典型污染菌进行分离与鉴定,并通过系统进化树明确了各菌种的进化关系。结果表明,在红丝青叶组培过程中出现的污染菌种类繁多,包含细菌和真菌,细菌归类于芽孢杆菌属、肠杆菌属、泛菌属、科萨克氏菌属、剑菌属和克雷伯菌属,真菌归类于寡营养丛孢霉属、枝孢霉属和隔孢伏革菌属。本研究结果可为后期组培培养基的优化及污染菌的防治提供参考。