红杜仲不同乙醇浓度提取物对HaCaT细胞抗氧化作用的比较及其抗氧化机制的研究

目的本研究对红杜仲不同乙醇浓度提取物抑制H_2O_2诱导的HaCaT细胞氧化应激损伤作用进行筛选。方法以不同浓度乙醇进行回流提取分别获得了30%、50%、70%及95%乙醇提取的四种红杜仲醇提取物(Parabarium micranthum ethanol extract,PEE),利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-Diphenyl-1-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazyl,DPPH)法测定其体外清除自由基的能力。以人永生化表皮细胞HaCaT为研究对象,通过不同浓度H_2O_2处理细胞并筛选以200μmol/L作为建立H_2O_2诱导的氧化应激损伤模型的最适浓度。设立对照组、H_2O_2损伤组和红杜仲-H_2O_2组。通过微板法和比色法测定内源性抗氧化酶活力及细胞存活率,2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(2,7-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光探针检测细胞内氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平,逆转录PCR测定Nrf2 mRNA表达量。结果不同乙醇浓度提取的PEE在体外均具有清除DPPH自由基的作用,效果最强的70%乙醇提取的PEE的IC(50)为7.6 mg/L;在细胞水平上,H_2O_2诱导使得HaCaT细胞内抗氧化酶SOD及CAT活力降低,50%、70%及95%乙醇提取的PEE能够显著提高细胞内抗氧化酶活力。其中70%乙醇提取的PEE的作用最为显著,抗氧化酶活力的提高表现出剂量依赖性,并且能显著提高细胞存活率、降低细胞内ROS的水平(与氧化应激组比,P<0.05或P<0.01)。同时,70%乙醇提取的PEE能够显著诱导抗氧化相关信号通路基因Nrf2 mRNA的表达。结论 70%乙醇提取的PEE可能通过激活Nrf2抗氧化信号通路,提高抗氧化酶活性,降低ROS水平,从而具有保护HaCaT细胞免受H_2O_2诱导的氧化损伤作用。

红杜仲的研究概况

红杜仲药材为夹竹桃科杜仲藤属植物杜仲藤(Parabarium micranthum(A.DC.)Pierre)、红杜仲藤(P.chunnianum Tsiang)及毛杜仲藤(P.huaitingii Chunet Tsiang)的茎皮和根皮,或花皮胶藤属花皮胶藤(Ecdysanthera utilis Hay.et Kaw.)的干燥树皮,主要含有生物碱、酚类、有机酸、糖类、黄酮等化学成分。红杜仲药材可以治疗风湿骨痛、骨折、外伤出血等。目前红杜仲药材的原植物鉴别、树皮性状鉴别、组织结构鉴别、理化鉴别、化学成分研究,以及红杜仲与其他相似药材的比较等方面的研究已经取得了大量的研究成果。作为壮瑶医常用的药物之一,红杜仲值得进一步深入研究和开发。

红杜仲的美白活性及其途径研究

目的研究红杜仲的不同乙醇浓度醇提物对黑色素瘤B16细胞系酪氨酸酶活性、黑素合成的影响,初步探讨红杜仲作为皮肤美白剂或色素沉积药物的可行性。方法以不同浓度乙醇进行回流分别获得30%、50%、70%、95%乙醇提取的得到4种红杜仲醇提物(PEE30、PEE50、PEE70、PEE95),选取对蘑菇酪氨酸酶抑制活性最强的提取物;再以B16造模,采用MTS法、Na OH裂解法、L-DOPA氧化法分别测定其对B16细胞的影响;Western blot检测PEE作用后Tyrosinase、TRP-1蛋白表达水平的变化。结果各红杜仲醇提物在体外均具有抑制蘑菇酪氨酸酶的作用,效果最强的为PEE70。在不影响B16细胞的浓度内,PEE70明显降低B16细胞酪氨酸酶活性和黑素的合成量(P<0.001)。Western blot结果表明,PEE70能够显著抑制黑素合成相关蛋白Tyrosinase、TRP-1的表达。结论 PEE能直接抑制B16细胞黑色素的合成,可用于美白产品或者色素沉积药物的开发,且上述变化通过抑制酪氨酸酶活性来完成。

红杜仲皮

下课铃响了。中药学院校园内一片电铃声。我担心会出现这样的情形——石老师锁死后门,然后堵住前门,双手卡腰,厉声说:“第一节中药鉴定课竞出现这种事。一个个让我搜完衣兜才准离开教室。一定要把这八个思想品德恶劣。

复方中风康复片的TLC鉴别研究

目的:完善复方中风康复片的质量标准。方法:采用薄层色谱法分别鉴别复方中风康复片中的麻黄、五味藤、红杜仲、马钱子。结果:各供试品色谱中,在与对照品及对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点,色谱清晰,无杂质斑点干扰。结论:该方法专属性强,可更好地控制制剂质量。