促红细胞生成素干预牙髓损伤后修复性牙本质形成及骨形态发生蛋白2的表达

背景:促红细胞生成素具有抗炎、抗凋亡、促进骨缺损修复等作用,目前关于促红细胞生成素对牙髓损伤后修复性牙本质形成及其相关分子机制的研究较少。目的:探究促红细胞生成素对牙髓损伤后修复性牙本质形成的影响。方法:(1)动物实验:采用随机数字表法将32只大鼠随机分为对照组(n=16)与实验组(n=16),实验组牙髓损伤处使用含促红细胞生成素的胶原蛋白海绵直接盖髓,对照组露牙髓损伤处使用含PBS的胶原蛋白海绵直接盖髓,用玻璃离子粘固剂封闭窝洞;治疗2,4周后取上颌骨,采用免疫组化染色检测巢蛋白在牙本质中的表达,苏木精-伊红染色观察修复性牙本质生成。取4只SD大鼠上颌骨,免疫组化染色检测磨牙与切牙中促红细胞生成素表达。(2)细胞实验:从人牙髓组织、牙周韧带组织及牙龈组织中分别分离获取人牙髓细胞、人牙周韧带细胞和人牙龈成纤维细胞,采用RT-PCR检测促红细胞生成素mRNA表达。在成牙本质细胞诱导或未诱导分化条件下,采用RT-PCR检测人牙髓细胞中促红细胞生成素、牙本质涎磷蛋白、牙本质基质蛋白1、巢蛋白m RNA表达。在成牙本质细胞诱导或未诱导分化条件下,下调促红细胞生成素表达或外源性给予促红细胞生成素干预后,采用RT-PCR检测人牙髓细胞牙本质涎磷蛋白、牙本质基质蛋白1 mRNA相对表达,茜素红S染色检测矿化结节形成,RT-PCR与Western blotting检测骨形态发生蛋白2 mRNA与蛋白表达。结果与结论:(1)动物实验:与对照组相比,实验组治疗2,4周后的修复性牙本质生成量更大,牙本质中巢蛋白表达更高。促红细胞生成素在大鼠上颌第一磨牙牙髓、成牙本质细胞层和牙周膜中呈弱阳性表达,在成牙本质细胞中呈强阳性表达。(2)细胞实验:与其他两种细胞相比,人牙髓细胞中的促红细胞生成素m RNA表达更高。与未诱导分化相比,成牙本质细胞诱导分化下人牙髓细胞中牙本质涎磷蛋白、牙本质基质蛋白1、巢蛋白、促红细胞生成素与骨形态发生蛋白2 mRNA表达升高,矿化结节生成增加。在成牙本质细胞诱导分化下,下调促红细胞生成素表达后人牙髓细胞中牙本质涎磷蛋白、牙本质基质蛋白1、巢蛋白、骨形态发生蛋白2 mRNA表达与矿化结节生成均降低,骨形态发生蛋白2蛋白表达降低;外源性给予促红细胞生成素干预后,人牙髓细胞中上述指标表达均升高。(3)结果表明:促红细胞生成素对牙本质形成具有一定的促进作用。

促红细胞生成素在大鼠肺缺血/再灌注损伤中的作用

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)在肺缺血/再灌注损伤(LIRI)中的作用及其机制。方法:健康雄性成年SD大鼠40只,随机分成5组(n=8),即对照组、EPO单给药组(3000 U/kg)、LIRI模型组、LIRI模型+EPO预防组(3000 U/kg)(EPO预防组)、LIRI模型+EPO治疗组(3000 U/kg)(EPO治疗组)。RT-qPCR法测定Bcl-2、Bax和caspase-3 mRNA的表达;TUNEL法检测肺细胞凋亡情况;免疫组织化学法测定肺组织中FGF23的表达水平;Western blot检测FGF23、FGFR4、p-ERK1/2蛋白的表达水平;光镜下观察肺组织的病理变化。结果:与对照组比较,模型组Bax、caspase-3 mRNA表达上调(P<0.01),而Bcl-2、FGF23和FGFR4、p-ERK1/2 mRNA表达下降(P<0.01),肺组织损伤和细胞凋亡加重;EPO预防组和EPO治疗组与模型组比较,Bax、caspase-3 mRNA表达下降(P<0.01),而Bcl-2、FGF23和FGFR4、p-ERK1/2 mRNA表达上调(P<0.01),肺组织损伤和细胞凋亡减轻。结论:EPO能减轻LIRI,其机制可能通过FGF23/FGFR4/p-ERK1/2信号通路,上调凋亡抑制因子Bcl-2的表达,下调促凋亡基因Bax、caspase-3的表达,改善其结构破坏和细胞凋亡。

重组人红细胞生成素生物学作用及其毒副作用的研究现状

在广泛查阅相关文献的基础上,就重组人红细胞生成素的生物学作用、在体坛的滥用情况以及其对人体的毒副作用等方面加以综述。结果表明:虽然重组人红细胞生成素能够通过增加血液中红细胞和血红蛋白的数量以及改变运动中代谢底物的利用等途径而提高机体有氧工作能力,但长期或大剂量摄入不仅会产生头痛、幻觉、肌肉酸痛、大面积体毛脱落、泛发性湿疹等不良反应,而且会诱发虹膜炎反应、癫痫和血糖异常升高等病症,甚至有可能因为高血压及高血压脑病、血栓、肺栓塞、脾梗塞、气管痉挛乃至急性白血病的发生而威胁服用者的生命。提示教练员及运动员需深入了解重组人红细胞生成素的潜在危害并理性对待。

对比罗沙司他与重组人促红细胞生成素对维持性血液透析患者冠状动脉钙化的影响

目的对比罗沙司他与重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对维持性血液透析(MHD)患者冠状动脉钙化的影响。方法采用回顾性分析的方法,选取重庆医科大学附属第一医院血液净化中心2019年4月至2021年6月处方中含罗沙司他的56例MHD患者作为ROX组,同期处方中含rHuEPO的60例MHD患者作为EPO组,随访观察12个月,比较两组患者治疗前后实验室检查指标、冠状动脉钙化积分(CACS)、心脏超声参数的差异及随访期间心脑血管事件发生情况。结果治疗前及治疗后两组患者的CACS比较,差异均无统计学意义(P>0.05);但ROX组患者治疗前后的CACS差值明显低于EPO组患者(P<0.05)。两组患者治疗前后心脏超声参数及实验室检查指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。随访期间,ROX组患者的脑卒中和心肌梗死发生率显著低于EPO组(P<0.05),但两组间因心衰住院的发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论与rHuEPO比较,罗沙司他可能对延缓MHD患者冠状动脉钙化有积极作用,且可能有利于减少MHD患者心肌梗死、脑卒中的发生。

促红细胞生成素对大鼠牙髓损伤后修复性牙本质形成的促进作用研究

目的:探究促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对大鼠牙髓损伤后修复性牙本质形成的作用。方法:分离并鉴定人牙髓细胞(Dental pulp cells,DPCs),将DPCs分为对照(control)组、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)组、TNF-α+EPO组;使用CCK-8法、Transwell法、碱性磷酸酶染色和茜素红染色法检测细胞增殖、迁移、成骨分化能力。将30只大鼠随机分为磷酸缓冲盐溶液(Phosphate buffered saline,PBS)组、氢氧化钙[Ca(OH)2]组和EPO组,对大鼠上颌第一磨牙进行牙髓暴露,分别以含PBS、Ca(OH)2和EPO的胶原蛋白海绵盖髓;术后1个月处死大鼠,micro-CT和苏木精-伊红染色观察修复性牙本质形成;免疫组化染色和Western blot检测牙本质基质蛋白-1(Dentin matrix protein-1,DMP-1)、牙本质涎磷蛋白(Dentin sialophosphoprotein,DSPP)、Runt相关转录因子2(Runt related transcription factor 2,Runx2)、Osterix(Osx)水平。结果:与control组相比,TNF-α组DPCs增殖、迁移、成骨分化能力降低(P<0.05);与TNF-α组相比,TNF-α+EPO组DPCs增殖、迁移、成骨分化能力提高(P<0.05)。与PBS组、Ca(OH)2组相比,EPO组露髓处形成连续完整的钙化桥及大量修复性牙本质,DMP-1、DSPP、Runx2、Osx水平升高(P<0.05)。结论:EPO通过提高DMP-1、DSPP、Runx2、Osx水平促进牙髓损伤大鼠修复性牙本质形成。

益气维血胶囊联合重组人促红细胞生成素对腹膜透析贫血的治疗作用

目的探讨益气维血胶囊联合重组人促红细胞生成素(EPO)治疗腹膜透析贫血的效果及其临床应用价值。方法选取2022年12月至2023年12月信阳市中心医院诊收的104例腹膜透析贫血患者,采用随机法分为对照组和联合组,每组52例。对照组给予重组人EPO治疗,联合组给予益气维血胶囊联合重组人EPO治疗。比较两组临床疗效、中医证候积分、血红蛋白(Hb)、EPO、转铁蛋白饱和度(TSAT)、铁蛋白(SF)及不良反应。结果联合组治疗总有效率94.23%高于对照组78.85%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,联合组中医证候积分低于对照组,Hb、EPO、TSAT、SF水平高于对照组(P<0.05);两组不良反应比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气维血胶囊联合重组人EPO治疗腹膜透析性贫血,可改善贫血症状,调节铁代谢,提高治疗效果。

促红细胞生成素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护性作用研究

探究促红素预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及可能机制。方法 选取50只SD大鼠,分为假手术、模型、促红素、锌原卟啉、促红素+锌原卟啉组。建立模型,检测心肌组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、血红素氧合酶-1(HO-1)的免疫组织化学及逆转录-聚合酶链反应(免疫组化)和mRNA表达,观察心肌超微结构。结果 其余4组心肌中MCP-1、HO-1的表达明显高于假手术组(P<0.05);促红素预处理上调HO-1表达、降低MCP-1表达(P<0.05),改善心肌结构;锌原卟啉消弱促红素效应(P>0.05);锌原卟啉组和促红素+锌原卟啉组HO-1表达降低、MCP-1表达升高(P<0.05),心肌结构恶化。结论 促红素预处理通过增强HO-1、抑制MCP-1表达,改善心肌结构,对大鼠心肌再灌注损伤起着保护作用。

专人饮食管理联合促红细胞生成素干预对维持性血液透析肝病患者血红蛋白血清铁蛋白水平和饮食行为的影响

目的探究专人饮食管理联合促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)干预对维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)肝病患者血红蛋白(hemoglobin,Hb)、血清铁蛋白(serum ferritin,FERR)水平和饮食行为的影响。方法选取2020年5月—2023年1月厦门大学附属第一医院收治的78例MHD肝病患者作为研究对象,依据系统随机法分为2组,对照组39例,采用EPO干预,观察组39例,采用专人饮食管理联合EPO干预,对比干预前后2组患者Hb、FERR水平以及饮食行为。结果干预后,2组Hb水平均上升,且观察组高于对照组(P<0.05);干预后,2组FERR水平先下降后上升,但观察组始终高于对照组(P<0.05);干预后,2组饮食依从行为量表(renal adherence behaviour questionnaire,RABQ)、饮食依从态度量表(renal adherence attitudes questionnaire,RAAQ)评分均上升,且观察组高于对照组(P<0.05)。结论专人饮食管理联合EPO干预应用于MHD肝病患者中,不仅可以改善患者贫血状态,还可以优化患者饮食依从行为和饮食依从态度。

促红细胞生成素对大鼠急性脊髓损伤铜死亡及感觉运动功能的影响

目的探讨促红细胞生成素(EPO)对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)铜死亡及感觉运动功能的影响。方法将36只212~236 g雄性SD大鼠按照随机数字表法分为Sham组(行椎板切除)、ASCI组(ASCI建模)和EPO组(行ASCI建模后每日腹腔注射EPO 5000 U/kg,7 d),每组12只。术后进行运动及感觉功能(Reuter)评分、BBB评分及脊髓含水率测量,采用等离子质谱仪检测Cu^(2+)含量,蛋白质印迹技术检测铜死亡蛋白铁氧还原蛋白1(FDX1)及二氢硫辛酰转乙酰基酶(DLAT)的表达水平,比较3组大鼠感觉运动功能、脊髓水肿情况等。结果与Sham组比较,ASCI组和EPO组BBB评分减少(P<0.05),Reuter评分、脊髓含水率、Cu^(2+)含量、FDX1及DLAT表达均增多(P<0.05);与ASCI组比较,EPO组大鼠BBB评分增多(P<0.05),Reuter评分、脊髓含水率、Cu^(2+)含量、FDX1及DLAT表达均减少(P<0.05)。结论EPO可抑制ASCI大鼠铜死亡、减轻脊髓水肿,改善其感觉运动功能。

CHS-DRG付费制度下药物治疗路径化管理在骨科围手术期合理预防性使用重组人促红细胞生成素的应用效果研究

目的:探讨基于国家医疗保障疾病诊断相关分组(CHS-DRG)付费方式改革下,围手术期重组人促红细胞生成素(rhEPO)路径化管理在骨科的应用效果。方法:采用德尔菲法,经过2轮计划-执行-检查-行动(PDCA)循环优化,制定了rhEPO药物治疗路径。以2022年3—7月该院骨科住院患者为管理前组,2023年3—7月的患者为管理后组。选取rhEPO使用率最高的8个DRG病种,比较管理前后的效益指标(次均住院费用、次均药品费用、平均住院时间、rhEPO使用合理率、输血率)改善程度。结果:与路径化管理前比较,路径化管理后骨科住院患者的次均住院费用由58 829.79元降至48 259.29元(P<0.05),次均药品费用由3 311.23元降至2 987.52元(P<0.05),平均住院时间由10.1 d缩短至8.05 d(P<0.01),差异均有统计学意义;rhEPO使用合理率由26.27%(62/236)提高至91.54%(238/260),输血率由34.66%(165/476)降至25.57%(169/661)。结论:通过路径化管理模式制定药物标准化方案,可优化资源配置,提高医疗质量,有效改善DRG病种效益指标。

促红细胞生成素在常见视神经和视网膜疾病保护及修复中的研究进展

促红细胞生成素(EPO)和EPO受体不仅存在于造血组织中,在造血外组织中也广泛存在。组织缺血、缺氧以及炎症因子水平升高均可促进EPO表达,并通过抗凋亡、抗炎、抗氧化、抗神经毒性、促进神经再生等一系列复杂机制在中枢神经系统中发挥保护作用,促进神经修复。视神经和视网膜是中枢神经系统的延伸,许多视神经和视网膜疾病本质也由缺血、缺氧所致,因此EPO在视神经和视网膜疾病中也发挥重要作用。深入研究EPO在视神经和视网膜疾病中的保护作用,可以为相关疾病的治疗提供新思路。

单唾液酸四己糖神经节苷脂联合重组人促红细胞生成素治疗新生儿缺氧缺血性脑病疗效观察

目的探讨单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)联合重组人促红细胞生成素(rhEPO)治疗新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)临床疗效及其对炎症因子和神经功能的影响。方法选择2017年6月至2020年6月南阳市中心医院新生儿科收治的78例HIE患儿为研究对象,采用随机数字表法将患儿分为对照组(n=39)和观察组(n=39)。所有患儿给予常规治疗,包括吸氧、维持水电解质酸碱平衡、控制惊厥与颅内压等治疗,中重度患儿给予亚低温治疗。对照组患儿在常规治疗基础上给予rhEPO 200 IU·kg^(-1),皮下注射,每周3次;观察组患儿在对照组基础上给予GM120 mg静脉滴注,每日1次。7 d为1个疗程,连续治疗4个疗程,中、重度患儿依据病情再治疗1~3个疗程。比较2组患儿治疗后的总有效率;于治疗前和治疗后14、28 d采用新生儿神经行为评分(NBNA)评估2组患儿的神经功能;治疗前和治疗后14、28 d,采用酶联免疫吸附法测定2组患儿血清白细胞介素-6(IL-6)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平。结果对照组和观察组患儿总有效率分别为69.23%(27/39)、94.87(37/39),观察组患儿治疗总有效率显著高于对照组(χ^(2)=8.705,P=0.003)。2组轻度患儿治疗总有效率均为100%;观察组中中、重度患儿总有效率显著高于对照组(χ^(2)=4.843、3.898,P=0.028、0.048)。2组患儿治疗前NBNA评分比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患儿治疗后14、28 d NBNA评分显著高于治疗前(P<0.05);2组患儿治疗后28 d NBNA评分显著高于治疗后14 d(P<0.05)。观察组患儿治疗后14、28 d NBNA评分显著高于对照组(P<0.05)。治疗前2组患儿血清ICAM-1、IL-6、TNF-α、HIF-1α、NSE水平比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患儿治疗后14、28 d血清ICAM-1、IL-6、TNF-α、HIF-1α、NSE水平显著低于治疗前(P<0.05);2组患儿治疗后28 d血清ICAM-1、IL-6、TNF-α、HIF-1α、NSE水平显著低于治疗后14 d(P<0.05)。治疗后14、28 d,观察组患儿血清ICAM-1、IL-6、TNF-α、HIF-1α、NSE水平显著低于对照组(P<0.05)。结论GM1联合rhEPO治疗新生儿HIE,能显著降低炎症因子及血清HIF-1α、NSE水平,促进神经功能恢复。

促红细胞生成素对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞的抗凋亡作用及对AKT蛋白表达的影响

目的观察促红细胞生成素(EPO)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌细胞的抗凋亡作用及对蛋白激酶B(AKT)蛋白表达的影响。方法 30只成年雄性SD大鼠先按随机数字表法分为2组,假手术(Sham)组(n=6)和模型(Model)组(n=24);模型组采用腹主动脉缩窄术建立CHF模型,术后8周存活16只,再随机分为EPO组与对照(Control)组各8只。EPO组予以3 000 U/kg EPO腹腔注射,3次/周,连续4周;Sham组、Control组给予等量的生理盐水。分别在术后4周、8周、12周(即给药4周)行心脏彩超检查大鼠心功能。第12周末全部大鼠禁食24 h后处死,观察心肌组织细胞形态、心肌细胞凋亡及计算凋亡指数(AI);采用Western blot法检测心肌P-AKT/AKT蛋白表达情况。结果超声心动图显示Model组4周时出现心室肥厚,8周时出现心力衰竭;EPO干预4周后较Control组左室射血分数(LVEF)明显升高(P<0.05),收缩末期室间隔厚度(IVSs)、收缩末期左心室后壁厚度(LVPWs)、舒张末期室间隔厚度(IVSd)、舒张末期左心室后壁厚度(LVPWd)明显降低(P<0.05)。EPO组AI较Control组显著降低(23.87%±1.45%vs 35.58%±2.81%,P<0.01);与Sham组(0.81±0.17)比较,Control组(0.35±0.06)P-AKT/AKT OD值明显降低,EPO组(1.61±0.16)较Control组升高(P<0.01)。结论 EPO可有效改善CHF大鼠的心功能,抑制心肌细胞凋亡,促进AKT的磷酸化。

促红细胞生成素对大鼠脑出血炎症反应的抑制作用及机制

目的:研究实验性大鼠脑出血后血肿周围核因子-κB(NF-κB)及其抑制因子κBα(IκBα)的表达,以及促红细胞生成素(EPO)对其干预作用,探讨EPO对出血性脑炎症反应的作用及机制。方法:将126只大鼠随机分为假手术组、脑出血组、EPO干预组。每组各42只,分别为术后第3、6、12、24、48、72小时和第7天亚组,每亚组各6只。采用大鼠尾动脉自体不凝血50μl注入尾状核区建立脑出血模型,分别在不同时间点断头取脑,连续切片作NF-κB及IκBα免疫组化染色;观察各组各时间点NF-κB、IκBα蛋白的表达并进行分析比较。结果:脑出血第6小时后NF-κB及IκBα表达增高,第24小时明显增高,第72小时达到高峰,各时间点与假手术组比较差异均有显著性(P<0.01)。EPO干预后NF-κB表达明显降低,与脑出血组比较有显著性差异(P<0.01);经EPO干预后IκBα表达显著增多,与脑出血组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:脑出血周围NF-κB及IκBα表达均有增多,EPO通过抑制NF-κB表达、促进IκBα表达抑制炎症反应从而起到神经保护作用。

促红细胞生成素及其受体、微血管密度在重度子痫前期胎盘中的作用

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPOR)、微血管密度(MVD)在重度子痫前期胎盘中的作用。方法:应用免疫组织化学法检测30例重度子痫前期孕妇胎盘组织中EPO、EPOR的表达情况;血小板-内皮细胞黏附因子-1标记血管内皮细胞,检测MVD;并以29例正常足月妊娠孕妇胎盘组织作为对照组。结果:重度子痫前期胎盘组织中EPO、EPOR的阳性表达(3.65±0.59及3.20±0.52)与对照组(4.16±0.50及4.58±0.84)比较,差异有显著性(P<0.01);重度子痫前期胎盘MVD值(154.25±49.9)明显低于对照组(233.75±39.56),差异有统计学意义(P<0.01)。结论:EPO、EPOR参与了重度子痫前期胎盘微血管的形成;其表达减少、MVD降低与重度子痫前期的发生发展密切相关。

罗沙司他与促红细胞生成素治疗维持性血液透析患者肾性贫血的效果观察

目的:分析维持性血液透析患者肾性贫血应用促红细胞生成素、罗沙司他联合用药治疗的临床价值.方法:随机选取2021年10月—2022年12月来我医院接受治疗的60例维持性血液透析患者肾性贫血患者,运用随机数字表法将入选的60例患者分成联合组与对照组,各30例,对照组患者采取单独促红细胞生成素治疗,联合组患者则采用促红细胞生成素联合罗沙司他治疗,详细对比两组的临床效果.结果:治疗后两组各项指标结果比较显示,联合组患者的临床症状改善所用时间短于对照组,患者临床血清指标检测结果显示贫血改善效果优于对照组,治疗期间患者用药不良反应发生率以及并发症发生率均低于对照组,治疗总有效率高于对照组,数据差异均有统计学意义(P<0.05).结论:对维持性血液透析患者肾性贫血患者及时采用促红细胞生成素、罗沙司他联合方案治疗,可使临床治疗效果得到进一步提升,尽早改善患者的贫血症状,减少患者并发症发生,降低疾病危害性.

促红细胞生成素对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用及其机制。方法:采用结扎左冠状动脉前降支30min、再灌注120min的方法建立大鼠MIRI模型。将50只SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、EPO100U/kg治疗组、EPO1000U/kg治疗组、EPO5000U/kg治疗组5组,每组10只。连续监测肢体Ⅱ导联心电图记录再灌注时心律失常情况;测定再灌注末血清磷酸肌酸激酶同工酶(CK MB),心肌丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH PX)、过氧化氢酶(CAT)、Na+K+ATP酶和Ca2+ATP酶的变化;观察心肌超微结构改变。结果:EPO显著降低再灌注室性心律失常的发生;减少再灌注末血清CK MB和心肌MDA含量,提高心肌GSH PX、CAT、Na+K+ATP酶和Ca2+ATP酶的活性;明显减轻缺血再灌注对心肌超微结构的损伤。对心肌SOD活性无影响。结论:EPO对大鼠MIRI有明显的保护作用,其机制可能与减轻氧自由基及钙超载损害有关。

促红细胞生成素预处理对视网膜神经元缺氧性损伤的保护作用

目的研究缺氧对培养大鼠视网膜神经元的影响及促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)预处理的保护作用。方法取体外原代培养3d的大鼠视网膜神经元,利用1mmol.L-1的连二亚硫酸钠消除培养基中的氧合并培养基质缺糖持续6h,导致神经元缺氧性损伤。采用免疫组化染色技术检测了EPO受体在原代培养视网膜神经元的表达,乳酸脱氢酶(LDH)释放率作为评价损伤的指标,TUNEL染色检测视网膜神经元的凋亡,并进行形态学观察。结果原代培养的大鼠视网膜神经元正常下可见EPOR的弱阳性表达,表达部位定位于神经元的胞体和突起,缺氧后EPOR的表达明显增加;神经元LDH释放率和凋亡百分率增加;在损伤前加入浓度2.5～40kU.L-1的rhEPO均可有效抑制LDH释放(P<0.05)。TUNEL结果显示rhEPO预处理能抑制神经元的凋亡,明显改善细胞缺氧性损伤的形态学变化。结论EPO预处理对神经元的缺氧损伤具有保护作用,且具有浓度和时间依赖性。

枕大池注入促红细胞生成素在兔蛛网膜下腔出血的脑保护作用

目的研究枕大池单次注入促红细胞生成素(EPO)对蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛和神经细胞损伤的影响。方法30只新西兰白兔随机分为3组,假手术组(Sham组)、蛛网膜下腔出血组(SAH组)和EPO组(n=10)。Sham组穿刺,其它两组行枕大池一次穿刺注血造模。30min后假手术组和出血组从枕大池注入生理盐水(0·10ml·kg-1),EPO组注入EPO(200IU·kg-1,0·10ml·kg-1)。所有动物在造模后48h处死,使用CAST体视学图像分析系统测量分析并比较不同组间基底动脉管腔面积、收缩系数以及海马CA1区正常神经元密度。结果与SAH组相比,EPO组食欲明显改善(P<0·05),体重增加(P<0·05),基底动脉管腔面积明显增加(P<0·01),收缩系数减小(P<0·01),海马CA1神经元密度值也增加(P<0·05)。结论枕大池单次小剂量注入EPO可以预防SAH后脑血管痉挛,减轻脑神经细胞损伤。

针刺预处理对大鼠脑缺血耐受及促红细胞生成素的诱导作用

目的探讨大鼠脑缺血及针刺预处理后促红细胞生成素(EPO)表达的变化及其意义。方法建立大鼠局灶性脑缺血及针刺预处理模型。随机分为对照组(缺血组)、针刺预处理+局灶性脑缺血组(n=8)。应用普通病理、免疫组化和原位杂交技术,观察大鼠脑缺血及缺氧预处理后EPO表达变化。结果脑组织中EPO蛋白及mRNA表达可见于存活和坏死的神经细胞、血管内皮细胞、胶质细胞。脑缺血诱导了EPO的表达,针刺预处理后EPO在缺血周边区表达更为明显(P<0.05)。结论针刺预处理后EPO在周边区表达增强,其表达可见于存活的神经细胞、血管内皮细胞及胶质细胞,提示EPO参与了针刺预处理的脑保护机制,其保护作用可能通过神经营养和血管生成双重作用完成。