肾癌中促红细胞生成素产生肝细胞受体A2的表达及其与E-钙黏蛋白、微血管密度的关系

目的探讨促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(Eph A2)在肾癌组织中的表达及其与肿瘤血管生成、E-钙黏蛋白的关系。方法利用免疫组织化学法检测肾癌组织68例、正常肾组织24例中EphA2、E-钙黏蛋白的表达,并采用CD34抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。分析EphA2、MVD、E-钙黏蛋白与肾癌临床病理特征的关系及其的相关性。结果肾癌组织中EphA2阳性表达及MVD明显高于正常肾组织,E-钙黏蛋白阳性表达明显低于正常肾组织(均P<0.01)。EphA2在肾癌组织的高分级组、高分期组、淋巴结转移组显著高于低分级组、低分期组和无淋巴结转移组(P<0.01或<0.05);MVD在肾癌组织的高分级组、高分期组、淋巴结转移组的表达亦显著高于低分级组、低分期组和无淋巴结转移组(均P<0.01);MVD值还与肿瘤直径有关(均P<0.01);E-钙黏蛋白在肾癌组织的高分级组、高分期组、淋巴结转移组显著低于低分级组、低分期组和无淋巴结转移组(P<0.01或<0.05);Spearman等级相关分析表明,EphA2蛋白表达与MVD呈显著正相关(r=0.555,P<0.01),与E-钙黏蛋白蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.483,P<0.01)。结论 EphA2蛋白的高表达预示肿瘤恶性程度的增加,其机制可能通过影响或协同E-钙黏蛋白和微血管生成来实现的。

多瘤病毒增强活化子3和红细胞生成素产生肝细胞受体A2在脑胶质母细胞瘤中的作用

目的探讨多瘤病毒增强活化子3(PEA3)、红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EPHA2)在脑胶质母细胞瘤中的作用。方法构建人脑星形胶质母细胞瘤U87细胞基因转染模型,将细胞系分为5组:空白组、PEA3干扰组、PEA3干扰空载组、EPHA2干扰组、EPHA2干扰空载组。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验检测细胞增殖率,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果CCK-8检测细胞增殖结果显示,PEA3干扰组和EPHA2干扰组的细胞增殖率均明显低于空白组[(59.7±1.3)%、(59.5±0.7)%比(67.8±1.3)%](P<0.01或P<0.001),PEA3干扰空载组和EPHA2干扰空载组的细胞增殖率与空白组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。细胞划痕实验结果显示,PEA3干扰组和EPHA2干扰组的划痕愈合率低于空白组[(31.7±1.1)%、(23.0±2.6)%比(42.8±8.8)%],差异均有统计学意义(均P<0.05),PEA3干扰空载组和EPHA2干扰空载组划痕愈合率与空白组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。Transwell检测细胞侵袭能力结果显示,PEA3干扰组和EPHA2干扰组的侵袭细胞数明显少于空白组[(643±20)、(542±165)个比(1225±70)个](均P<0.001),而空白组与PEA3干扰空载组和EPHA2干扰空载组侵袭细胞数比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论干扰PEA3基因和EPHA2基因能明显降低脑胶质母细胞瘤细胞的增殖、迁移、侵袭能力。

促红细胞生成素产生肝细胞受体-配体系统在胚胎着床和发育中的作用

促红细胞生成素产生肝细胞受体(erythropoietin-producing hepatocellular receptor,Eph受体)是受体酪氨酸激酶家族成员之一,通过与配体Ephrin结合发挥生物功能。Eph-Ephrin系统有16个受体成员和8个配体成员,均为膜蛋白结构,受体配体结合后发生细胞双向信号传递,调节胚胎对子宫内膜的粘附和侵入,引导胚胎血管重塑,促进胚胎多个系统发育。本文综述了Eph-Ephrin系统在胚胎着床和发育中的作用。

促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EphA2)SAM结构域对激酶结构域的脂质体结合能力与激酶活性的调控研究

促红细胞生成素产生肝细胞受体(Eph receptor)是受体酪氨酸激酶(RTK)家族中最大的亚家族,其介导的双向信号传导对细胞的形态、黏附、运动、增殖、生存及分化都有重要的调控作用。EphA2是Eph受体家族中一个被广泛研究的重要亚型,在白内障和乳腺癌等病理发生过程中发挥了重要作用。既往研究发现:EphA2受体的激酶结构域可结合细胞膜,其激酶活性受磷脂膜的调控,但是相邻的SAM结构域对激酶结构域与脂膜的相互作用以及激酶活性的影响尚不清楚。在此项研究中,通过与磷酸酶PTP1B1-301活性片段共表达的方式,表达、纯化了EphA2受体的胞内段激酶-SAM串联结构域,通过比较胞内段激酶-SAM串联结构域与单独激酶结构域的脂质体结合能力,以及测定对应的激酶活性,发现:EphA2受体胞内段的SAM结构域使其激酶结构域与脂质体(4 mg/mL)的结合能力增强约6倍(P<0.001);磷酸化后的EphA2胞内段激酶-SAM串联结构域结合脂质体(4 mg/mL)的能力比非磷酸化的胞内段激酶-SAM串联结构域提高2.5倍(P<0.05);而结合脂质体后,激酶结构域的激酶活性也被进一步提高,从而形成正反馈。综上所述,本研究的发现提示:EphA2胞内段的酪氨酸激酶结构域与相邻的SAM结构域可形成一个完整的结构功能单位,其激酶活性和脂质体结合能力与单独的激酶结构域相比都形成了明显的差异,我们的这一发现对进一步理解Eph受体家族其他亚型的激酶结构域的活性调控提供了参考与思路。

促红细胞生成素产生肝细胞受体在肝纤维化、肝癌发病机制中的作用

促红细胞生成素产生肝细胞(Eph)受体是受体酪氨酸激酶家族中最大的亚族,参与机体胚胎发育、血管生成、轴突导向等生理过程。近来有研究显示,Eph受体过量表达于肝纤维化及肝癌组织中,并在肝癌的生长、侵袭、转移中发挥重要作用。探讨了Eph受体在肝纤维化及肝细胞癌中的作用机制,提示Eph受体可能是肝纤维化、肝癌发生发展过程中的重要分子。

重组人促红细胞生成素在脑白质损伤新生鼠经细胞外信号调节激酶信号通路对血管内皮生长因子受体2的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素在脑室周围白质损伤中颅内经细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路对血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的影响。方法选取出生后4日龄SD大鼠,采用随机数余数分组法分为假手术组、缺氧缺血组和药物干预组。缺氧缺血和药物干预组幼鼠结扎右侧颈总动脉并吸入6%的氮氧混合气体2 h,假手术组幼鼠仅游离右侧颈总动脉。药物干预组脑室内给予重组人促红细胞生成素1次(0.6 IU/g体质量),假手术组和缺氧缺血组给予等量的生理盐水。用Western blot方法检测术后60、90 min脑组织中的ERK和磷酸化-ERK及术后2、4 d脑组织中的VEGFR2表达情况。结果术后60及90 min,缺氧缺血组磷酸化-ERK较假手术组显著增多(P<0.05),促红细胞生成素干预后磷酸化-ERK表达进一步上调(P<0.05)。术后2 d,缺氧缺血组和假手术组大鼠的VEGFR2表达差异无统计学意义,术后4 d缺氧缺血组VEGFR2表达增加(P<0.05),药物干预组VEGFR2的表达较缺氧缺血组显著增加(P<0.05)。结论促红细胞生成素可能通过影响颅内ERK信号通路调节VEGFR2的表达。

乳腺癌组织中促红细胞生成素受体表达与ER、PR及Her-2关系的研究

背景与目的:有研究发现乳腺癌肿瘤细胞表面有促红细胞生成素受体(erythropoietin-receptor,Epo-R)的表达,本研究旨在通过免疫组织化法检测乳腺癌肿瘤细胞中Epo-R的表达以及雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone,PR)和人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2, Her-2)的表达,探讨它们之间的关系和临床意义。方法:收集60例乳腺癌患者的标本,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中Epo-R的表达,同时检测肿瘤组织中的微血管密度(microvascular density,MVD),分析其与Epo-R与ER、PR和Her-2之间的关系。结果:60例肿瘤标本中47例表达Epo-R(78.3%),平均阳性细胞数(39±24)%;肿瘤组织中的MVD为25±9,与Epo-R呈正相关。Epo-R阳性患者的MVD明显高于Epo-R阴性患者(t=3.4252,P<0.01)。ER和PR的表达与Epo-R和MVD的表达均无明确的关系,而Her-2的表达与Epo-R和MVD的表达均明显相关。Epo-R的表达与临床分期、有无淋巴结转移和肿瘤大小均明显相关(均为P<0.001);MVD与有无淋巴结转移有相关性,与分期及肿块大小无相关性。结论:乳腺癌患者高表达Epo-R,与MVD呈正相关性;Epo-R和MVD的表达与Her-2表达均有相关性,但与ER和PR的表达均无相关性。联合检测Epo-R和MVD的表达更有利于正确判断乳腺癌患者的临床病理特征及其预后。

浸润性肺腺癌组织中促红细胞生成素肝细胞A7和基质金属蛋白酶-2的表达及临床意义

目的观察促红细胞生成素肝细胞(Eph)A7和基质金属蛋白酶(MMP)-2在浸润性肺腺癌中的表达特征,分析其临床意义及相关性。方法 61例浸润性肺腺癌患者临床资料及术后蜡块组织为实验组,正常肺组织36例为对照组,应用免疫组化二步法检测两组EphA7和MMP-2表达。结果 EphA7和MMP-2在两组中的表达差异具有统计学意义(P<0.001)。实验组EphA7和MMP-2表达与肿瘤淋巴结转移和肺膜累犯相关,EphA7表达与肿瘤最大径相关,二者均与患者的年龄、性别无相关性。相关分析显示二者不具有相关性。结论浸润性肺腺癌中EphA7和MMP-2表达升高可能对肿瘤进展有一定促进作用,EphA7对促进肿瘤生长有一定作用。

促红细胞生成素受体在肝癌组织中的表达及意义

目的检测促红细胞生成素受体(EPOR)在肝癌组织中的表达,探讨其与微血管密度(MVD)及肝癌临床病理特征的关系。方法应用RT-PCR方法检测30份肝癌组织、10份癌旁组织、10份正常组织中EPOR mRNA表达量,并检测MVD,分析EPOR与MVD及肝癌临床病理特征的关系。结果肝癌组织中EPOR mRNA高表达;EPOR与MVD呈显著正相关(r=0.71,P<0.01);EPOR mRNA表达量在有包膜侵犯、病理组织学低分化及有转移肝癌组织中的阳性表达强度明显高于癌旁组织及正常组织(P均<0.05)。结论 EPOR在肝癌组织中表达显著升高,其可能作为新的血管生成调节因子参与肝癌血管生成,EPOR高表达与肝癌复发、转移及预后密切相关。

消瘤汤对裸鼠结直肠移植癌组织中促红细胞生成素肝细胞激酶B4及其配体EphrinB2表达的影响

目的探讨消瘤汤对裸鼠结直肠移植癌组织中促红细胞生成素肝细胞激酶B4(EphB4)及其配体EphrinB2蛋白表达的影响。方法将200只裸小鼠随机分为对照组、中药组、单抗组、联合组,各50只。另取25只裸鼠,将结直肠癌患者新鲜手术标本移植到培养裸鼠皮下;肿瘤成长后,取出肿瘤组织移植到各组裸鼠结肠系膜侧。移植3 d后,对照组给予蒸馏水灌胃,中药组给予消瘤汤灌胃,单抗组静脉注射贝伐单抗,联合组给予消瘤汤灌胃联合静脉注射贝伐单抗。给药6周后,检测各组裸鼠结直肠癌组织中EphrinB2和EphB4蛋白的表达情况。结果中药组、单抗组、联合组裸鼠结直肠癌组织中EphrinB2、EphB4的蛋白表达水平均低于对照组,且中药组和联合组均低于单抗组(均P<0.05),但中药组与联合组差异无统计学意义(P>0.05)。结论消瘤汤能抑制结直肠癌组织中EphrinB2和EphB4蛋白的表达,EphB4及其配体EphrinB2或可成为今后治疗结直肠癌的新靶点。

血管生成素及其受体Tie-2在肝细胞癌中的研究进展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)属于血管过多性肿瘤,血管新生在其进展中起重要作用。血管生成素、Tie-2在HCC血管新生、肿瘤进展中有重要作用,而且其表达水平对于HCC预后和术后生存率有提示作用。本文就血管生成素及其受体Tie-2在HCC中的研究进展作一综述。

促红细胞生成素受体在肝细胞癌组织中表达及对肿瘤血管生成的影响

采用免疫组化法检测60例肝细胞癌(HCC)组织、10例正常肝组织中促红细胞生成素受体(EPOR)的表达水平,并计数微血管密度(MVD)。结果HCC组织中EPOR表达明显高于正常肝组织(P<0·01),且与HCC组织学分级具有相关性(r=0·483,P<0·05);HCC组织中EPOR阳性者MVD明显高于阴性者。提示EPOR与HCC的血管生成有关,可促进HCC的发生、发展。

不同炎症因子对人牙周膜成纤维细胞促红细胞生成素肝细胞激酶受体和配体的影响

目的观察不同炎症因子对人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)促红细胞生成素肝细胞激酶受体(Eph)和ephrin配体的影响。方法采用10ng/ml肿瘤坏死因子α(TNF-α)或10ng/ml白细胞介素1β(IL-1β)刺激人牙周膜成纤维细胞,分别在0、1、2、6、12、24h时,检测hPDLFsEph受体及ephrin配体在mRNA和蛋白水平的表达变化。结果TNF-α和IL-1β均可引起hPDLFsEph受体和ephrin配体发生时间依赖性变化。两组中ephrinA2表达量24h内均呈明显上升趋势(P均<0.05),TNF-α组的ephrinA2 mRNA 1h时即出现明显高表达,24h时TNF-α组的表达量明显高于IL-1β组(P<0.05)。EphB4在短时间高表达后,呈时间依赖性下降趋势。结论TNF-α和IL-1β均可引起hPDLFs EphB4和ephrinA2的表达变化,两者引起的表达变化趋势一致,但TNF-α的作用更显著。

促红细胞生成素肝细胞激酶受体及配体对骨改建的调控作用

在骨改建过程中,破骨细胞和成骨细胞相互作用以维持骨吸收和骨形成的平衡。研究表明促红细胞生成素肝细胞激酶受体及其配体介导的双向信号传导可调控成骨-破骨细胞间的耦联作用,本文主要综述Eph家族蛋白的分子结构、信号转导机制,及其调控骨改建、牙槽骨改建等。

促红细胞生成素肝细胞激酶受体及其膜结合配体对牙槽骨改建作用的研究进展

促红细胞生成素肝细胞激酶受体及其膜结合配体(ephrin/Eph)是除核因子κB受体活化因子配体/核因子κB受体活化因子/骨保护素(RANKL/RANK/OPG)外与骨改建相关的新的信号通路。在牙槽骨改建过程中ephrin/Eph相关因子不仅与骨细胞之间的相互作用相关,同时还受牙周膜细胞的影响。与正常骨组织相比,牙槽骨组织改建过程中相关因子表达存在明显差异,这说明了ephrin/Eph相关因子对骨改建过程的调控具有复杂性和重要性。本文就ephrin/Eph通路在骨细胞与牙周膜成纤维细胞中的相互作用进而参与牙槽骨改建的研究进展进行综述。

促红细胞生成素肝细胞激酶受体及其膜结合配体相关因子在口腔疾病中的表达及作用机制的研究进展

促红细胞生成素肝细胞激酶受体及其膜结合配体(Eph/ephrin)可以通过细胞与细胞间短距离的信号传导,参与调节生长发育,促进疾病发生发展的各个过程。研究Eph/ephrin与口腔相关疾病的机制可以为口腔疾病的治疗提供新的思路。近年来,针对Eph/ephrin通路调控口腔相关疾病,尤其是在牙周疾病防治、正畸骨改建以及口腔肿瘤的生物学治疗领域的研究逐渐深入,本文即对这3个方面的研究进展进行综述。

γ射线照射对前列腺癌细胞金属基质蛋白酶和促红细胞生成素受体表达的影响

目的:前列腺癌PC-3细胞接受不同剂量γ射线照射后,观察其金属基质蛋白酶-2(M M P2)、金属基质蛋白酶-9(M M P9)及促红细胞生成素受体蛋白(E PO-R)表达的变化,阐明γ射线对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响。方法:分别用1G y、3G y、5G y剂量的60C oγ射线,照射体外培养的PC-3细胞系。用流式细胞术检测M M P2、M M P9及E PO-R的含量;并测定细胞生长曲线及克隆形成率。结果:(1)1G y剂量即可明显抑制细胞的生长,并且细胞克隆形成率随着剂量的增加而降低;(2)E PO-R表达在1G y和3G y组高于对照组,5G y组低于对照组;(3)M M P2总体上出现降低趋势;M M P9表达在1～5G y组均高于对照组。结论:虽然60C oγ射线照射可明显抑制前列腺癌PC-3细胞的生长,但是M M P9及E PO-R表达却增高,提示亚致死剂量的γ射线照射可使存活细胞的浸润性增高。

重组人促红细胞生成素对尿毒症患者细胞免疫功能和sIL-2R表达的影响

目的观察基因重组人促红细胞生成素（r-HuEPO）对慢性肾衰竭（CRF）患者外周血T-淋巴细胞免疫功能和红细胞免疫功能的影响。方法应用流式细胞仪、双抗体夹心ELISA法和红细胞酵母菌花环实验及红细胞免疫调节因子一步法分别检测观察90例CRF患者经r—HuEPO治疗后，外周血T-淋巴细胞亚群（CD3、CD4和CD4／CD8）、可溶性白介素-2受体（sIL-2R）、红细胞Gb受体花环试验（RNC-C3bRR）、红细胞免疫复合物花环试验（RN2-ICR）、红细胞免疫粘附促进因子（RFAR）和红细胞免疫粘附抑制因子（RFIR）的变化。结果①90例CRF患者外周血清中sIL-2R水平、RBC-ICR和RFIR明显高于正常对照组（P〈0．01），CD3、CD4、CD4／CD8、RBC-C3bRR和RFAR明显低于正常对照组（P〈0．01）；②r-HuEPO治疗后，RBC—C3bRR、RBC—ICR、RFAR和RFIR均有好转（P〈0．05），同时sIL-2R、CD3、CD4和CD4／CD8亦有所改善，但无统计学差异（P〉0．05）。结论CRF患者存在明显的细胞免疫功能和红细胞免疫功能低下，rHuEPO治疗对红细胞免疫功能有较好的提升和调节作用，对细胞免疫功能改善不明显。

阿米巴肝脓肿患者红细胞免疫功能与sIL-2R的相关性

目的 :研究阿米巴肝脓肿患者红细胞免疫功能与sIL - 2R的相关性。方法 :采用郭峰法检测患者外周血红细胞免疫功能 ;采用双抗体ELISA法检测sIL - 2R。结果 :患者外周血红细胞免疫功能 (RBC -C3bRR)非常显著地低于正常对照组 ,而血清sIL - 2R的水平非常显著地高于正常对照组。相关分析显示 :血清sIL -2R水平与RBC -C3bRR呈显性负相关 (r=- 0 .95 ,P <0 .0 5 )。结论 :阿米巴肝脓肿患者sIL - 2R水平增高 ,可能是导致红细胞免疫功能低下的原因之一。

促红细胞生成素产生肝细胞受体A2基因沉默对人卵巢癌细胞生物学性状的影响

目的探讨促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EphA2)基因沉默对人卵巢癌HeyA8-MDR细胞生长、迁移和侵袭的影响。方法利用质粒和脂质体介导转染法,经稳定筛选后,采用Western blot检测细胞EphA2蛋白表达情况,应用CCK-8和Transwell小室侵袭实验,观察EphA2基因沉默对卵巢癌HeyA8-MDR细胞生物学性状的影响。采用SPSS21.0软件进行统计分析。结果与HeyA8-MDR(阴性对照组)、HeyA8-MDR+空白对照组进行比较,HeyA8-MDR+实验组EphA2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),细胞增殖能力、迁移和侵袭能力均受到抑制(P<0.05)。结论EphA2基因沉默可抑制卵巢癌HeyA8-MDR细胞生长、迁移和侵袭,为卵巢癌的治疗提供了新思路。