重组恶性疟原虫红细胞结合抗原175功能区的制备及联合免疫

目的 :全合成恶性疟原虫 eba- 1 75 f2基因并在毕氏酵母中进行高效分泌表达 ,用该重组蛋白与我室研制的疟疾疫苗候选抗原 Pf CP- 2 .9进行联合免疫以观察是否存在竞争性免疫抑制。方法 :采用不对称 PCR法拼接合成 eba- 1 75 f2基因(95 9bp) ,用电转化方法将合成基因导入毕氏酵母中并进行诱导表达 ,采用离子交换层析和分子筛层析纯化 EBA- 1 75 F2蛋白。 结果 :全合成 eba- 1 75 f2基因在毕氏酵母中高效分泌表达。重组 EBA- 1 75 F2和 Pf CP- 2 .9联合免疫后 ,以 EL ISA和IFA检测 ,针对 2个蛋白联合免疫的抗体滴度明显高于 2个蛋白单独免疫的滴度。 结论 :重组 EBA- 1 75 F2和 Pf CP- 2 .9联合免疫时不存在竞争性免疫抑制 ,这

高原低氧对健康人体内磺胺甲噁唑的蛋白和红细胞结合率的影响

目的观测高原低氧对健康人体内磺胺甲噁唑的蛋白和红细胞结合率的影响。方法取平原和高原地区健康男性志愿者口服磺胺甲噁唑后1.5、12和48h时间点血样,抗凝,一半保留全血,另一半分离血浆,超率法测定蛋白结合率,红细胞结合率用红细胞压积、血浆和全血药物浓度计算。药物浓度均采用反相高效液相色谱法测定。结果平原健康男性志愿者体内磺胺甲噁唑的蛋白和红细胞结合率分别为65.31%和5.96%,高原健康男性志愿者体内磺胺甲噁唑的蛋白和红细胞结合率分别为69.60%和9.41%,高原健康男性志愿者体内磺胺甲噁唑的蛋白和红细胞结合率显著高于平原健康男性志愿者。结论高原低氧使健康人体内磺胺甲噁唑的蛋白和红细胞结合率均显著升高。

恶性疟原虫裂殖子表面主要蛋白与人红细胞结合的研究(英文)

目的 :研究恶性疟原虫裂殖子表面主要蛋白 - 1( P195)与人红细胞的结合作用。方法 :在大肠杆菌中分 8段表达 MAD2 0株恶性疟原虫 P195蛋白。各段表达蛋白经复性及用同位素 12 5I标记后与人红细胞进行结合实验。结果 :氨基酸序列为 12 3- 30 2 ( M3) ,384 - 595( M6) ,10 78- 12 51( M9)的三段蛋白具有红细胞结合作用。其中 M6不能与胰酶处理过的红细胞结合 ,且与正常红细胞结合的 M6片段能被酸性缓冲液洗脱。而 M3,M9与红细胞结合不受胰酶影响 ,且不能被酸性缓冲液洗脱。结论 :M6与红细胞的结合位点可能为红细胞膜表面蛋白受体 ,M3,M9与红细胞的结合点不在膜表面 ,而在红细胞内。

世居高原藏族健康人体内磺胺甲噁唑的蛋白、红细胞结合率测定

目的测定世居高原藏族健康人体内磺胺甲噁唑的蛋白、红细胞结合率。方法取世居高原藏族健康男性志愿者口服磺胺甲噁唑后1.5、12和48 h时间点血样,抗凝,一半保留全血,另一半分离血浆,超率法测定蛋白结合率。红细胞结合率依据红细胞压积数、血浆浓度和全血药物浓度计算而得。药物浓度均采用反相高效液相色谱法测定。结果世居高原健康男性志愿者体内磺胺甲噁唑的蛋白、红细胞结合率分别为70.47%、8.29%。结论世居高原藏族健康人体内磺胺甲噁唑的蛋白结合率显著高于高原汉族,但红细胞结合率略低于高原汉族。*

甲亢患者红细胞结合荧光标记羊抗人IgG值的测定及其临床意义(附34例病例分析)

本文应用荧光免疫技术测定了34例甲亢患者的红细胞IgG值,同时观察了抗甲状腺球蛋白抗体及抗甲状腺微粒体抗体,结果显示:甲亢患者红细胞抗体结合值高于正常对照组(P<0.01),支持甲亢存在多种免疫异常的观点。

新型间日疟原虫红细胞结合蛋白在中国中部及周边国家边境地区的遗传多样性研究

为分析新型间日疟原虫红细胞结合蛋白(PvEBP)在中国中部地区(安徽)及周边国家边境地区(缅甸和越南)的遗传多样性和种群分布特征,提取31例中国(安徽)和22例缅甸(Laiza镇)间日疟原虫患者基因组DNA,经PCR扩增并测序,同时从GenBank中分别获取缅甸和越南地区相应基因序列共34例,进行PvEBP基因多态性和遗传分化分析。结果显示PvEBP核苷酸多态性和单倍型多样性在我国中部地区安徽较低(π=0.00051,Hd=0.634),在缅甸和越南地区相对较高;三个流行区分离株中PvEBP-RII受到正向选择压力的影响(dN/dS>1),突变集中在PvEBP-RII;不同群体间PvEBP基因的遗传分化程度较高;三个群体共享单倍体型较少,仅单倍型Hap_4同时出现在三个不同流行区。结果表明,中国(安徽)和周边国家(缅甸和越南)分离株PvEBP的基因多态性及分化程度因地理隔离差异较大,PvEBP-RII可作为间日疟原虫红内期候选疫苗的重要靶点。

银染法观察胶体金标记的恶性疟原虫裂殖子表面主要蛋白与人红细胞的结合作用

恶性疟原虫裂殖子表面主要蛋白－１，又称Ｐ１９５，与人红细胞膜具有结合作用，这种结合是裂殖子识别红细胞的基础。为了确定Ｐ１９５蛋白与人红细胞的结合位点，我们在大肠杆菌中分８段表达了Ｐ１９５蛋白。各段表达蛋白经过提纯与复性后，用胶体金标记。标记后的各段蛋白分别与人红细胞共孵育。然后将此红细胞加入到银显影液中。结果发现，红细胞在与一段Ｐ１９５蛋白（Ｍ６，氨基酸序列为３８４－５９５）共孵育并加入到银显影液中后，红细胞表面出现黑色银沉淀。而红细胞在与其它各段Ｐ１９５蛋白进行同样操作后，红细胞表面没有出现黑色银沉淀。这表明经胶体金标记后的Ｍ６与人红细胞具有结合作用。Ｍ６所对应的区域可能就是Ｐ１９５蛋白的红细胞结合区域。

磺胺甲噁唑在不同居住时间、不同海拔高度汉族、藏族健康者体内与蛋白和红细胞的结合率

目的比较磺胺甲噁唑在久居平原、急进高原、久居高原、世居高原汉族和藏族健康者体内与蛋白、红细胞的结合率。方法取健康男性志愿者口服磺胺甲噁唑后1.5、12.0和48.0 h时间点血样。超率法测定蛋白结合率;红细胞结合率通过红细胞压积、血浆和全血药物浓度计算。药物浓度均采用反相高效液相色谱法测定。结果久居平原、急进高原、久居高原、世居高原汉族和藏族健康者体内的蛋白结合率分别为65.24%、77.50%、71.33%、67.33%和70.47%,红细胞结合率分别为6.04%、6.90%、9.24%、7.39%和8.29%。与平原组比较,急进高原、久居高原和世居高原藏族健康人体内磺胺甲噁唑的蛋白结合率均显著升高。久居高原、世居高原汉族和藏族健康人体内磺胺甲噁唑的红细胞结合率显著高于平原。结论高原低氧使健康人体内磺胺甲噁唑的蛋白和红细胞结合率均显著升高。

促红细胞生成素肝细胞激酶受体及其膜结合配体对牙槽骨改建作用的研究进展

促红细胞生成素肝细胞激酶受体及其膜结合配体(ephrin/Eph)是除核因子κB受体活化因子配体/核因子κB受体活化因子/骨保护素(RANKL/RANK/OPG)外与骨改建相关的新的信号通路。在牙槽骨改建过程中ephrin/Eph相关因子不仅与骨细胞之间的相互作用相关,同时还受牙周膜细胞的影响。与正常骨组织相比,牙槽骨组织改建过程中相关因子表达存在明显差异,这说明了ephrin/Eph相关因子对骨改建过程的调控具有复杂性和重要性。本文就ephrin/Eph通路在骨细胞与牙周膜成纤维细胞中的相互作用进而参与牙槽骨改建的研究进展进行综述。

中西医结合治疗真性红细胞增多症19例

目的:观察中西医结合治疗真性红细胞增多症的临床疗效。方法:对19例真性红细胞增多症患者据临床表现分为痰湿瘀阻、血瘀气滞、心肝火旺、热入营血、气血亏虚、肝肾阴虚6型治疗,并配合静脉放血、化疗、α-干扰素、沙利度胺等进行治疗。结果:19例患者治疗1疗程完全缓解7例,临床缓解6例,好转4例,无效2例。结论:西医药在抑制红细胞增生、控制疾病症状方面有优势,中医药在延缓疾病进展和转化方面有特长,中西医结合分期与分型相结合、辨病与辨证相结合,取长补短、相得益彰、经济实用,能达到预防和治疗并发症,减少骨髓纤维组织增生,阻止真性红细胞增多症向骨髓纤维化和白血病方面转化的治疗目的。

重组SIRPα1的体外表达及其在红细胞CD47-SIRPα信号通路研究中的应用

目的获得野生型信号调节蛋白α1（SIRPα1）功能结构域重组蛋白,以用于研究正常或异常红细胞的吞噬和清除中CD47-SIRPα信号通路的作用。方法全基因合成人源野生型SIRPα1 IgV结构域编码区;将合成片段构建入携带组氨酸（His）标签的pET-21a大肠杆菌载体,获得重组表达载体。使用大肠杆菌BL21 （DE3）细胞体外表达重组SIRPα1,并通过亲和层析法纯化;利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定重组SIRPα1;采用基于ELISA的红细胞结合试验评估2名Rh缺失表型献血者与正常Rh表型个体对照在红细胞结合水平的差异;流式细胞术检测红细胞CD47表达;采用单因素方差分析对数据做统计分析。结果成功构建重组表达载体,纯化获得野生型重组SIRPα1。成功建立了基于ELISA的红细胞结合试验方法并应用于评估重组SIRPα1与红细胞的结合。伴随CD47表达量的明显降低,Rh缺失表型个体的红细胞和正常个体相比,其与重组SIRPα1的结合能力下降。结论 CD47-SIRPα信号通路可能在Rh缺失表型红细胞的清除中发挥了作用。

促红细胞生成素肝细胞激酶受体及其膜结合配体相关因子在口腔疾病中的表达及作用机制的研究进展

促红细胞生成素肝细胞激酶受体及其膜结合配体(Eph/ephrin)可以通过细胞与细胞间短距离的信号传导,参与调节生长发育,促进疾病发生发展的各个过程。研究Eph/ephrin与口腔相关疾病的机制可以为口腔疾病的治疗提供新的思路。近年来,针对Eph/ephrin通路调控口腔相关疾病,尤其是在牙周疾病防治、正畸骨改建以及口腔肿瘤的生物学治疗领域的研究逐渐深入,本文即对这3个方面的研究进展进行综述。

野苋菜花粉性哮喘红细胞免疫功能的研究

目的 :了解野苋菜花粉性哮喘患者的红细胞免疫功能变化情况。方法 :我们选择了 12 4例野苋菜花粉皮试阳性的哮喘病人 ,测定其红细胞免疫功能 ,并选择了 12 0例螨性哮喘患者及 5 0例正常对照组进行比较。结果 :野苋菜花粉性哮喘患者的红细胞C3b受体花环率为 13.4 1+ / -2 .83,较正常对照组 18.6 4 + / - 4 .85显著下降 (P <0 .0 1) ,与螨性哮喘患者 12 .6 2 + / - 3.70 ,无明显差异 (P >0 .0 5 )。而红细胞免疫复合物花环 (ICR)结合率 14.83+ / - 2 .2 4高于正常对照组6 .72 + / - 2 .90 (P <0 .0 5 ) ,与螨性哮喘患者 14.39+ / - 3.5 5无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论

白消安联合龙胆泻肝汤治疗真性红细胞增多症疗效观察

【目的】观察白消安联合龙胆泻肝汤治疗真性红细胞增多症(PV)的临床疗效。【方法】13例患者在确诊后均给予白消安注射液静脉滴注,并联合龙胆泻肝汤(基本方药为:山栀子、黄芩、柴胡、车前草、生地黄、木通、泽泻、龙胆草、丹参、川芎)加减口服治疗。以1个月为1个疗程,3个疗程后判定疗效。【结果】(1)近期疗效:13例患者中,完全缓解8例,临床缓解3例,好转2例。(2)远期疗效:所有患者均在应用3次白消安后停止该药应用,改为羟基脲口服配合龙胆泻肝汤口服治疗,患者坚持在本科门诊随诊治疗,最长随访近5年。其中4例患者达到治愈标准,已停药,停药最长时间2年6个月;其余9例患者在继续用药的前提下,6例患者达到临床缓解,3例患者维持好转。(3)并发症情况:所有患者均无并发血栓、栓塞及出血等并发症。【结论】白消安联合龙胆泻肝汤治疗PV,疗效确切,复发率低,并发症少。

灸治关元穴对阳虚患者不同时辰红细胞免疫功能影响

目的：观察灸治关元穴对阳虚患者红细胞免疫功能的影响是否与时间有关连。方法：先对两组实验人员阳虚组患者35人及正常组35人在24小时内的（子、卯、午、酉）四个不同时辰进行抽血、操作、化验。随即进行艾灸关元穴治疗5天后，再对两组人员进行2h内的（子、卯、午、酉）四个不同时辰进行检验。并对结果进行统计学分析处理。结果：阳虚组、正常组组内灸前灸后存在明显差异（P〈0．05）；同组内午时、子时、卯时、酉时的花环率在统计存在明显差异。结论：①不论是阳虚组还是正常组，也不论是那个时辰，艾灸关元穴可以提高机体的免疫花环率；②灸前灸后正常组与阳虚组花环率均有差别，两组灸后的花环率均较灸前有所提高；③不论灸前还是灸后，不论正常组还是阳虚组红细胞花环结合率在不同的时辰内呈规律性变化。艾灸关元穴并无明显改变这种规律的趋势。

噬菌体随机环7肽库筛选恶性疟原虫EBA-175的结合肽

目的从噬菌体随机环7肽库中筛选恶性疟原虫EBA175抗原的结合肽。方法以EBA175重组蛋白为靶筛选噬菌体随机环7肽库,通过ELISA、竞争抑制试验、Westernblot等方法鉴定获得的噬菌体短肽与EBA175之间的结合特性。对阳性克隆进行DNA序列测定,推导其氨基酸序列并与GPA氨基酸全序列进行了同源性比较。结果获得9株可与EBA175结合的阳性噬菌体克隆,序列分析显示为3种氨基酸序列,P1(MLLITIR)、P2(TRKLPRT)、P3(KRLMPLK)。其中出现频率最高的P1序列中LLI与EBA175的受体GPA的108110位氨基酸同源。竞争性ELISA显示展示序列P1的噬菌体能竞争抑制EBA175与其单抗的结合。结论获得了可与EBA175特异结合的阳性噬菌体短肽,·LLI··几位氨基酸可能对EBA175与GPA的结合起重要作用。

TNF-α对牙周膜成纤维细胞ephrinB2/EphB4表达量的影响

目的:检测不同浓度TNF-α对牙周膜成纤维细胞ephrinB2/EphB4表达量的影响。方法:收集因正畸需要拔除的健康牙齿,培养原代牙周膜成纤维细胞;用不同浓度TNF-α分别刺激24 h,48 h后检测牙周膜细胞ephrinB2/EphB4 mRNA及蛋白表达量。结果:24 h组ephrinB2与EphB4 mRNA浓度均降低,差异有统计学意义(P<0.05);48 h低浓度组对ephrinB2 mRNA表达量无影响,0.1μg/L使EphB4 mRNA表达量增加,高浓度组使ephrinB2/EphB4 mRNA表达量下降;24 h组,TNF-α浓度为0.1~1μg/L时,ephrinB2/EphB4蛋白表达量无明显变化,TNF-α浓度为10~1000μg/L时ephrinB2/EphB4蛋白表达量下降;48 h组,0.1μg/L TNF-α作用后使EphB4蛋白表达量上升,ephrinB2蛋白表达量无明显变化,1μg/L作用后,ephrinB2/EphB4蛋白表达量均无明显变化,10~1000μg/L刺激后ephrinB2/EphB4蛋白表达量均下降。结论:24 h时TNF-α使ephrinB2/EphB4 mRNA与蛋白表达量均降低,但在48 h时,低浓度作用下EphB4表达量上升,是否可以为低浓度炎症状态下骨改建的研究提供参考。