ABO血型新生儿溶血病患儿红细胞致敏抗体热放散效果与红细胞量的关系

目的比较不同量的患儿压积红细胞进行热放散的放散效果差异,进而研究达到最强放散效果的压积红细胞最适使用量。方法以14例疑似新生儿溶血病(HDN)患儿的血标本为研究对象,每例标本分别吸取100μL、200μL、300μL、500μL、1mL的患儿压积红细胞进行放散试验,采用微柱凝胶法检测放散后抗体,比较不同量的压积红细胞放散效果的差异。结果 14例疑似HDN患儿中,确诊为HDN 11例。11例标本随着压积红细胞量增加,放散抗体凝集强度均增加,到500μl增到最大,1mL与500μL凝集强度相同。其中8例标本(72.7%),5个梯度压积红细胞均可放散出抗体;3例标本(27.3%),红细胞量200μL以上才可放散出抗体。结论不同量的患儿压积红细胞进行热放散的放散效果不同,随着红细胞量增加,放散抗体凝集强度增加,红细胞量过少可能导致放散试验假阴性。

试管法红细胞致敏反应对微柱凝集法间接抗人球蛋白试验灵敏度的影响

目的:探讨红细胞致敏反应在试管内完成对微柱凝集法抗人球蛋白试验灵敏度的影响。方法:以微柱凝集法间接抗人球蛋白试验分别检测抗D(IgG)抗体梯度浓度样本盘、两份阳性室间质评样本梯度浓度样本盘和10份临床红细胞不规则抗体阳性样本(红细胞同种抗体)梯度浓度样本盘。其中:红细胞致敏反应采用两种场景对比检测,方法一:抗原细胞与待测样本按说明书要求分别加入微柱反应,方法二:红细胞致敏反应在试管内完成。另外,观察红细胞在微柱反应腔内的沉降情况。结果:抗D(IgG)抗体递度浓度样本盘检测,两种方法在1∶32和1∶64两个稀释度凝集强度均为5,而在更高的稀释度(1∶128、1∶256及1∶512)时,采用方法二反应的红细胞凝集强度明显高于方法一。室间质评样本递度浓度样本盘和临床样本递度浓度样本盘检测阳性孔凝集强度,方法一均弱于方法二。10分钟末肉眼可见红细胞明显沉降,15分钟末沉降更明显。结论:红细胞致敏反应在试管内完成,实验易于充分混匀,还可以有效地避免抗人球蛋白抗体中和游离的待测抗体,同时增加混匀次数可使致敏反应更加充分,可提高微柱凝集法间接抗人球蛋白试验的灵敏度。

解离红细胞致敏抗体的3种方法比较

目的 寻找一种快速、简便、敏感的放散试验方法。方法 分别用氯仿和传统加热、乙醚法对 1 3例被IgG和IgM血型抗体同时致敏的红细胞进行放散试验 ,检测放散液中红细胞抗体效价。 结果 在 3种放散方法中 ,氯仿法不仅所获的放散液量多、颜色浅而透明 ,而且敏感性也不低。结论 氯仿法放散试验操作简便快速 ,安全 (试剂不易燃烧 ) 。

红细胞在不同pH下致敏对头孢他啶针剂的IgM和IgG抗体检测结果的影响

目的研究在用微柱凝胶免疫法检测人血中头孢他啶针剂的IgM和IgG抗体时,红细胞在不同pH下被药物致敏后对检测结果的影响。方法 O型红细胞在苯巴比妥缓冲液(pH=7.0,8.0,9.6)中用头孢他啶于室温下孵育2小时后作为致敏后的红细胞,以致敏后的红细胞(pH=9.6)为初试抗原,测试600份待检血清,根据检测结果选出10份血清样品,阳性3份,弱阳性3份,阴性4份,再分别用经pH8.0及pH7.0时致敏的红细胞检测,比较结果的异同。结果红细胞在不同pH下致敏对4份阴性结果的血清和3份阳性结果的血清都没影响,但3份弱阳性标本在pH8.0时一份转阴,在pH7.0时3份都转阴。结论用微柱凝胶免疫技术检测人血中头孢他啶IgM和IgG抗体时,红细胞致敏的pH小于9.6可能出现假阴性结果。

固相致敏红细胞吸附技术快速检测肝硬化患者血清中TIMP-1

目的 建立一种改良固相致敏红细胞吸附技术(SPASE)用于快速检测肝硬化患者血清中 TIMP- 1.方法 用 TIMP- 1单克隆抗体包被微量血凝板 ,加热冲洗后加入待检血清标本 ,最后加入单克隆抗体致敏红细胞 .应用致敏红细胞作为指示系统 ,观察红细胞吸附状况来判定结果 .结果 SPASE法全过程仅需要 2 .5～ 3h,40 8例肝病患者血清检测 TIMP- 1结果为急性肝炎组检出阳性率 16 .4% ;慢性肝炎组阳性率为 33.3% ;肝硬化组阳性率为 73.6 % .结论 血清中 TIMP- 1的变化可作为肝纤维化较为有用的诊断指标 .SPASE法具有较高的敏感性、特异性和快速性 ,试剂用量少 ,且不需复杂的仪器设备 ,实验程序又简单 。

凝聚胺试验检测抗体致敏红细胞

红细胞膜抗原与其抗体结合,形成致敏红细胞,是体内发生免疫性溶血的证据之一,它对于溶血性输血反应,新生儿溶血病,自身免疫性溶血性贫血等疾病的临床诊断及与其它疾病的鉴别诊断具有重要的意义。通过实验发现,凝聚胺试验是检测抗体致敏红细胞的方法之一。现报告如下: 1 材料与方法 1.1 试剂与来源 1.1.1 凝聚胺试剂武汉金宏科技发展公司 1.1.2 单特异性抗IgG

用微波加速制备致敏红细胞

用微波加速制备致敏红细胞桑胜云胡宗煌王德凤（成都军区昆明总医院，昆明６５００３２）关键词微波ＩｇＧ抗体致敏红细胞致敏红细胞是间接抗人球蛋白试验（ＩＡＴ）中的重要步骤。ＩＡＴ常规操作需要３０～６０ｍｉｎ致敏红细胞。我们用微波缩短红细胞致敏时间，并与常规...

致敏红细胞和未致敏红细胞物理特性比较

目的研究致敏红细胞和未致敏红细胞形态大小及渗透脆性的差异。方法对健康献血者O型和Rh(+)型红细胞用IgG型抗-D致敏后,与未致敏的相同献血者的红细胞用血细胞分析仪进行检测,比较两种红细胞的平均红细胞体积和红细胞分布宽度,用红细胞渗透脆性试验对二者进行渗透脆性比较。结果致敏红细胞平均体积大于未致敏红细胞(P<0.05),未致敏红细胞分布宽度大于致敏红细胞(P<0.01),致敏红细胞渗透脆性大于未致敏红细胞。结论红细胞致敏后在体积上大于未致敏红细胞,渗透脆性降低,可能与红细胞膜上血型抗原与相应抗体结合后对红细胞膜的结构和稳定性有一定的影响。

微柱凝胶技术检测致敏红细胞的临床应用

目的 探讨微柱凝胶抗球蛋白法 (MGCT)在检测致敏红细胞中的应用价值。方法 采用微柱凝胶抗球蛋白法、凝聚胺法 (MPT)和抗球蛋白法 ,对抗A、抗B、抗D致敏红细胞和 5 1例疑为新生儿溶血病患儿血液标本平行检测。结果 MGCT法对IgG抗A(抗B)灵敏度较抗球蛋白法和MPT法高 2个滴度以上 ;对Rh系统中抗D较抗球蛋白法高 2个滴度以上 ,而与MPT法相似。 5 1例新生儿溶血病患儿血液标本中 ,MGCT法检出阳性标本 36例 ,MPT法、抗球蛋白法检出阳性标本分别为 2 3例和 2 1例。经统计学方法处理 ,MGCT法与MPT法和抗球蛋白法间有显著性差异 (χ2 值分别为 6 .79、8.95 ,P <0 .0 1)。结论 MGCT法灵敏度高、特异性强、操作简单方便 ,可取代抗人球蛋白法和MPT法 。

淋巴细胞单抗致敏的红细胞花环试验和荧光染色法检测人外周血液的淋巴细胞

本文应用T、B淋巴细胞和T细胞亚群单抗致敏的红细胞花环试验结合荧光染色法,检测了50例健康人外周血液内的淋巴细胞。人外周血液中与T_3单抗致敏红细胞形成花环的T_^+细胞平均百分率为61.29±11.686,与T_4单抗致敏红细胞形成花环的T_4^+细胞平均百分率为32.76±8.974,与T_8单抗致敏红细胞形成花环的T_8^+细胞平均百分率为21.66±7.443,B细胞以单抗致敏红细胞识别的B细胞平均百分率为19.55±10.018,但标准差过高,个体间淋巴细胞的百分率波动范围相当大。用同一方法和试剂连续检测同一个体的淋巴细胞和T细胞亚群的百分率亦很难得到重复性结果。我们对检测人外周血液中的淋巴细胞的方法判断人体的免疫状态,和作为各种疾病的诊断指标进行了讨论。

固相致敏红细胞吸附技术快速检测肝硬化患者血清中TIMP-1

目的 建立一种新的固相致敏红细胞吸附技术(SPASE)用于快速检测肝硬化患者血清中TIMP-1。方法 用TIMP-1单克隆抗体包被微量血凝板,加热冲洗后加入待检血清标本,最后加入单克隆抗体致敏红细胞。应用致敏红细胞作为指示系统,观察红细胞吸附状况来判定结果。结果 SPASE法全过程仅需要2.5～3小时,408例肝病患者血清检测TIMP-1结果为急性肝炎组检出阳性率16.41％;慢性肝炎组阳性率为33.31％;肝硬化组阳性率为73.58％。结论 血清中TIMP-1的变化可作为肝纤维化较为有用的诊断指标。SPASE法具有较高的灵敏性、特异性和快速性,试剂用量少,且不需复杂的仪器设备,加之实验程序简单,更适于医院及基层医疗单位应用。

聚凝胺试验用于致敏红细胞和不完全抗体初筛的探讨

目的 探索 MPT用于致敏红细胞和不完全抗体初筛的可能性。方法 设计了用 MPT测定致敏红细胞的方法 ,即先吸取 3%～ 5 %的待检红细胞悬液 2滴和健康献血员 AB型血浆 (血清 ) 1滴混合 ,AB型血浆作为一种抗红细胞“粘壁”现象的惰性介质 ;设计了用 MPT测定血清中有无不完全抗体的方法 ,即先吸取待检血清 2滴加入 3%～ 5 %的 Rh( D)阳性混合健康献血员 O型红细胞悬液 1滴 ,O型红细胞作为检测不完全抗体是否存在的载体 ;接下去按一般的 MPT步骤操作。通过模拟试验和临床应用来论证MPT的这一新用途。结果 多量蛋白质的存在不影响 MPT结果 ,蛋白质过少会导致 MPT中红细胞“粘壁”现象 ,通过加入适量血浆 (血清 )能消除 ;MPT能检测最高稀释度为 1∶ 2 5 6的抗 D( Ig G)和 1∶ 64的免疫性抗 A血清制备的模拟致敏红细胞和不完全抗体。MPT检测凝胶法抗球蛋白试验阳性 1 5例 ,MPT结果比试管法敏感 ,和凝胶法一致 ;检测试管法阴性 2 0例临床标本 ,MPT结果与试管法符合。结论 MPT可用于致敏红细胞和相应不完全抗体的初筛 ,比试管法抗球蛋白试验敏感、快捷。

致敏红细胞Rh血型系统的六种鉴定方法比较

目的 :探讨红细胞上的致敏抗体对各种Rh血型系统检测方法的影响。方法 :10 5例新生儿溶血病患儿红细胞被分别用抗球蛋白法、凝聚胺法、盐水法、微柱凝胶法 (Rh血型系统测定型 )以及抗血清加微柱凝胶法、盐水法加微柱凝胶法 (IgG型 )进行Rh血型系统检测 ,同时在 4 5℃抗体释放后再检测。结果 :72例直接抗人球蛋白试验阴性患儿的Rh系统血型 6 9例 6种方法所获结果一致 ,3例结果不一致 ;33例直接抗人球蛋白试验阳性患儿的Rh系统血型 2 1例结果不一致。 4 5℃抗体释放后测定的结果一致 ,盐水法和微柱凝胶法抗体释放前后的结果一致。结论 :红细胞上的致敏抗体达到一定数量可影响抗球蛋白法、凝聚胺法、抗血清加微柱凝胶法和盐水法加微柱凝胶法 ,而盐水法和微柱凝胶法则影响不大 ,是一种较好的检测方法。

简易致敏红细胞血小板血清学技术和应用的研究

在血小板血型抗原,抗体反应的研究和临床应用工作中,方法学的解决是主要关键。本成果突破了此难题。重点攻克了直接指示血小板抗原-抗体免疫反应的关键性指示系统-抗人IgM和抗人IgM致敏红细胞的研究难题。研究建立了一套完整的特异性血小板抗原抗体反应检测方法,即简易致敏红细胞血小板血清学技术(SEPSA)。

禽大肠杆菌间接血凝抗体测定中致敏红细胞的选择

采取健康公鸡血液,提取红细胞。以禽病原性大肠杆菌O78-166分离的LPS分别致敏新鲜红细胞和醛化红细胞,置4℃下保存。在致敏后1～8d,应用上述致敏红细胞分别测定6个O78-166免疫鸡阳性血清,以比较上述红细胞的敏感性和有效使用期。结果表明:以LPS致敏的新红细胞做定量试验较为精确,以LPS致敏的醛化红细胞做大肠杆菌定性试验较为快捷、方便。

微柱凝胶免疫分析技术及简易致敏红细胞血小板血清学试验检测血小板抗体的效果比较

在临床上,人体内血小板存在功能性缺陷或者明显减少等现象,便导致出血症状,该病症的有效治疗方法为血小板输注,能起一定的防治作用。近年来,随着临床成分输血的日益成熟、骨髓移植及联合化疗等治疗方法的日益普及,血小板输注方法在临床的使用也呈不断升高的趋势[1]。

红细胞免疫功能检查及其在中医药与肝病中的应用

近年来国内外学者的大量研究征明,越是高等动物(特别是人),红细胞免疫功能就越健全。红细胞的许多免疫功能是其他免疫细胞所无法替代的。该免疫功能的生理基础是红细胞免疫粘附(RICA)作用,即抗原抗体复合物与补体C3b结合后可粘连到动物的未致敏红细胞表面。目前,评价红细胞的免疫功能都采用RCIA活性指际。自郭峰首创“红细胞受体花环(RBC—C3b)”和“红细胞免疫复合物花环(RBC—IC)”两项检测方法以来,由于其简便易行且有一定的特异性。

IVIG对PMA诱导的人巨噬细胞吞噬功能的影响

目的研究静脉注射人免疫球蛋白（intravenous immunoglobulin,IVIG）对佛波酯（phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA）体外诱导分化成的人巨噬细胞吞噬功能的影响,探讨IVIG对自身免疫性疾病的免疫抑制作用。方法首先利用PMA体外诱导人急性单核白血病细胞THP-1分化形成巨噬细胞;然后利用流式细胞技术比较不同浓度的IVIG对巨噬细胞吞噬致敏红细胞的吞噬功能的影响。结果使用100 ng/m L PMA诱导THP-1细胞24 h,可成功诱导分化形成巨噬细胞。此外,当IVIG浓度为10μg/m L时,可完全抑制巨噬细胞对致敏红细胞的吞噬作用。结论IVIG可以有效地抑制巨噬细胞的吞噬功能,且抑制作用呈剂量依赖性。本研究可为进一步保障IVIG制品的质量奠定方法学基础。

头孢类抗生素致敏红细胞的检测

目的:探究药物诱导型溶血性贫血在临床中的发生频率。方法:采用微柱凝胶抗球蛋白法对1 595例血标本进行直接抗人球蛋白试验(DAT),对DAT阳性标本采用抗生素类药物诱导型溶血性贫血检测试剂盒(微柱凝胶法)进行抗体特异性分型。结果:1 595例被检者中DAT阳性108例,阳性率为6.77%,DAT阳性类型分布为IgG型28例(25.93%),IgG+C_3型70例(64.81%),C_3型10例(9.26%)。检出自身免疫因素诱导红细胞致敏12例(11.11%),非自身免疫因素96例(88.89%),其中确定为头孢类抗生素诱导红细胞致敏3例(3.13%),非药物依赖性自身抗体8例(8.33%)。有输血史者DAT阳性率显著高于无输血史者(P<0.01)。结论:临床大量使用抗生素类药物的患者有可能诱导机体红细胞致敏而发生药物诱导型溶血性贫血,因此抗生素类药物致敏红细胞的检测具有重要意义。

人胎胸腺细胞的异质性荧光及其与T淋巴细胞分化阶段关系的形态学研究

以７６９０－Ｘｕ荧光染色法结合ＷｕＴ３、ＷｕＴ４、ＷｕＴ８致敏红细胞花环实验观察经胸腺细胞分层液分离所得高密度亚群和低密度亚群人胎胸腺细胞的异质性荧光及其膜分化抗原ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８的表达。结果表明：不同胎龄胎儿胸腺细胞悬液呈现相似形态和相似分布特征的８种异质性荧光的细胞，其中，墨黑核细胞和桔红核细胞分布于两密度亚群，表型为ＣＤ３－ＣＤ４－ＣＤ８－；少数深蓝核和蓝核细胞分布于低密度亚群．表型为ＣＤ３＋，属成熟的胸腺细胞；大多数深蓝核和蓝核细胞、灰蓝核细胞、灰黄核细胞及部分淡桔黄核细胞分布于高密度亚群，表型为ＣＤ３－、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋，为处于中间发育阶段的胸腺细胞。推测这些细胞胞核由深蓝、蓝、灰蓝、灰黄到淡桔黄的荧光光谱的偏移可能与中间发育阶段所发生的生物及理化变化有关。