B→O血型改造动物实验研究——α-半乳糖苷酶酶解猕猴红细胞表面类人B抗原

目的 :观察α_半乳糖苷酶对猕猴类人B抗原的酶解效果及α_半乳糖苷酶酶解后的红细胞进行异种血型动物输血的安全性。方法 :用 10 0U/mlα_半乳糖苷酶酶解猕猴红细胞表面的类人B血型抗原 ,吸收放散法检测猕猴血型及α_半乳糖苷酶酶解后猕猴红细胞类人B血型抗原清除情况 ;同时检测酶解对红细胞结构与功能的影响 ;回输实验检测红细胞存活率以及观察酶解后红细胞的安全性。结果 :α_半乳糖苷酶可以清除猕猴红细胞表面类人B抗原 ,而不影响红细胞结构、功能及其在体内存活 ;α_半乳糖苷酶酶解的类人B型红细胞输给类人A型血的猕猴 ,未发生输血反应 ;受血猴的血液生化及尿液各项指标与输血前相比 ,无明显变化。结论 :α_半乳糖苷酶可以清除猕猴红细胞表面类人B抗原 ,酶解后的红细胞输给类人A型猕猴是安全的。

B→O血型转换批量制备通用型红细胞的研究

目的建立B→O血型转换红细胞(通用型红细胞)批量制备工艺,为临床提供通用型红细胞制品。方法用不同pH值的缓冲液对1个使用单位(200ml)的B型红细胞进行预处理。在专门设计的转型密闭处理系统中,用α半乳糖苷酶对B型红细胞表面B抗原进行酶解,并检测酶解后红细胞ABO血型抗原及结构、功能。结果酶解前用pH4.2缓冲液预处理组上清游离Hb含量显著低于pH2.8缓冲液处理组;经α半乳糖苷酶(100Uml红细胞)在pH5.6,26℃条件下酶解60min,红细胞B型抗原被完全清除,转换为O型;红细胞形态、变形性、ATP、2,3DPG、胆固醇含量、乙酰胆酐酯酶活性、渗透脆性、pH、上清游离Hb、K+、Na+含量与对照组(正常红细胞)比较差异无显著意义,均在正常范围。结论建立了B→O血型转换通用型红细胞的批量制备工艺。通用型红细胞结构、功能、形态均正常,细菌、热原实验合格。

Rh蛋白家族及Rh复合体

Rh血型系统的抗原具有强烈免疫原性,主要由RhD、RhCE蛋白携带。RhAG糖蛋白是一类重要的Rh相关蛋白,影响Rh蛋白在红细胞表面的表达。近年来发现红细胞膜表面的其它一些蛋白,诸如LW糖蛋白、血型糖蛋白B,可参与Rh复合体的形成。Rh复合体是近年研究热点。目前已发现Rh复合体除携带Rh抗原外,还影响红细胞的形态稳定,可能还具有离子通道功能。