用噬菌体呈现技术表达抗人红细胞血型B抗原的单链抗体

本研究的目的是构建表达抗人红细胞血型B抗原5D12杂交瘤细胞的单链抗体(ScFv)。应用重组噬菌体抗体技术，分离与构建5D12McAb单链抗体基因，将其克隆入噬粒pHEN-1中，转化E．coliTGl，M13KO7辅助噬菌体援救构建5D12噬菌体单链抗体库；用完整虹细胞亲和富集法淘选阳性重组噬菌体，重组噬菌体鉴定及序列测定分析；免疫杂交试验检测重组噬菌体单链抗体的特异性抗原活性。经M13K07援救E．coli TG1转化菌中的pHEN-1重组噬菌体，得到滴度为3×10^9pfu／m1噬菌体单链抗体库；免疫杂交试验证实表达产物保留了亲本单抗对人红细胞血型B抗原的特异性亲和力。本研究成功地构建5D12McAb单链噬菌体抗体库，为进一步研制；与特异性和高亲和力的基因工程原核血型检定抗体试剂奠定了基础。

α-半乳糖苷酶酶解B型长臂猿细胞回输A型长臂猿的研究

使用基因重组咖啡豆α 半乳糖苷酶体外处理B型长臂猿红细胞 ,使其转变为O型 ,再回输给A型长臂猿 .α 半乳糖苷酶可以清除B型长臂猿红细胞表面B抗原 ,而不影响红细胞结构、功能及其在受体体内存活 .α 半乳糖苷酶酶解的B型红细胞输给A型血的长臂猿 ,未发生输血反应 ,受血猿的血液及尿液常规指标与输血前相比 ,无明显变化 .

B→O血型改造动物实验研究——α-半乳糖苷酶酶解猕猴红细胞表面类人B抗原

目的 :观察α_半乳糖苷酶对猕猴类人B抗原的酶解效果及α_半乳糖苷酶酶解后的红细胞进行异种血型动物输血的安全性。方法 :用 10 0U/mlα_半乳糖苷酶酶解猕猴红细胞表面的类人B血型抗原 ,吸收放散法检测猕猴血型及α_半乳糖苷酶酶解后猕猴红细胞类人B血型抗原清除情况 ;同时检测酶解对红细胞结构与功能的影响 ;回输实验检测红细胞存活率以及观察酶解后红细胞的安全性。结果 :α_半乳糖苷酶可以清除猕猴红细胞表面类人B抗原 ,而不影响红细胞结构、功能及其在体内存活 ;α_半乳糖苷酶酶解的类人B型红细胞输给类人A型血的猕猴 ,未发生输血反应 ;受血猴的血液生化及尿液各项指标与输血前相比 ,无明显变化。结论 :α_半乳糖苷酶可以清除猕猴红细胞表面类人B抗原 ,酶解后的红细胞输给类人A型猕猴是安全的。