猪红细胞CR1-like膜分布状态的初步研究

为进一步研究猪红细胞的天然免疫调控机制,本研究合成免疫抗原肽段,制备获得了猪CR1-like单克隆抗体,并应用CR1-like单克隆抗体通过荧光免疫细胞化学技术观察猪红细胞CR1-like的天然分布状态,运用流式细胞检测技术检测了膜流动性变化对猪红细胞CR1-like发挥免疫黏附功能的影响。结果显示,于荧光显微镜下观察,猪红细胞表面可见绿色荧光,且经膜固定处理的猪红细胞表面的绿色荧光分布呈片状,未经膜固定处理的猪红细胞表面的荧光点呈颗粒状分布,较膜固定组分布明显成簇化;流式细胞仪检测荧光强度发现,膜固定组、未固定组均明显高于空白对照组,差异极显著(P<0.01);同时未固定组平均荧光强度明显高于膜固定组,差异极显著(P<0.01)。证实天然状态下猪红细胞表面的CR1-like分布呈分散状态,发挥免疫功能时,CR1-like表现出多价高效的结合特性,其分布状态表现为颗粒样成簇分布。

红细胞CR1基因组密度多型性与免疫粘附肿瘤细胞能力的相关性

目的：研究不同人群中红细胞ＣＲ１基因组密度多型性与红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力的相关性。方法：采用ＰＣＲ加ＨｉｎｄⅢ酶切技术测定红细胞ＣＲ１基因组密度多型性（ＨＨ型、ＨＬ型、ＬＬ型），采用肿瘤红细胞花环试验测定红细胞免疫粘附肿瘤细胞的能力。结果：在不同人群中，ＨＨ型红细胞免疫粘附肿瘤细胞的能力明显大于ＨＬ型红细胞，而ＨＬ型红细胞免疫粘附肿瘤细胞的能力明显大于ＬＬ型红细胞。结论：红细胞免疫粘附肿瘤细胞的能力与ＣＲ１基因组密度多型性有关。

知母宁对老化红细胞CR_1活性及脂质过氧化物水平的影响

观察不同浓度的知母宁（Ｃｈｉｍｏｎｉｎ）温育后的老化红细胞免疫指标和过氧化脂质（ＬＰＯ）水平的改变，发现５、１５μｇ知母宁时，ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ、ＲＢＣ－ＩＣＲ、ＲＢＣ－ＣａＲ有上升的趋势但和对照组相比无明显的差异（Ｐ＞０．０５），而５０、１００μｇ浓度时ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ、ＲＢＣ－ＩＣＲ、ＲＢＣ－ＣａＲ和对照组相比有明显的升高（Ｐ＜０．０１）。知母宁５、１５、５０、１００μｇ温育后的老化红细胞ＬＰＯ含量的改变，以知母宁５０、１００μｇ浓度时ＬＰＯ水平明显降低，和对照组相比差异有显著意义（Ｐ＜０．０５）。提示一定剂量知母宁提高红细胞ＣＲ１活性，可能与抑制脂质过氧化反应有关。

新风胶囊对类风湿性关节炎补体调节蛋白红细胞CR1及CD59的影响

目的:探讨新风胶囊对类风湿性关节炎(RA)补体调节蛋白的影响及其作用机制。方法:将40例RA患者按随机数字表分为新风胶囊实验组(20例)和正清风痛宁对照组(20例),并设10名健康者为健康对照组,观察两组RA患者治疗前后补体调节蛋白红细胞CR 1、CD 59以及临床症状、体征关节疼痛度、关节肿胀度、关节压痛度、晨僵时间、握力、步行15 m时间和实验室指标〔血沉(ESR),类风湿因子滴度(RF),C反应蛋白(CRP),补体C 3、C 4,免疫球蛋白IgG、IgM、IgA,α1糖酸蛋白(1αAGP),红细胞计数(RBC)〕的改善情况。结果:RA患者治疗前红细胞CR 1与CD 59表达水平均显著低于健康对照组(P均<0.05);治疗后两组RA患者临床症状、体征及实验室指标均较治疗前有明显改善(P均<0.05),其中实验组关节疼痛度、晨僵时间、双手平均握力、15 m步行时间及ESR、补体C 3、RBC改善程度均较对照组显著(P<0.05或P<0.01)。两组治疗后红细胞CR 1、CD 59均比治疗前显著升高(P均<0.05),治疗后实验组的红细胞CR 1、CD 59均值均显著高于对照组(P均<0.01)。结论:新风胶囊能有效提高体内过低的补体调节蛋白红细胞CR 1、CD 59含量,进而抑制过亢的体液免疫反应,使补体有效清除体内循环免疫复合物,并减少补体对自身细胞的攻击损伤,从而控制病情活动,这也是其治疗RA的机制之一。

肿瘤患者红细胞天然免疫分子CR1密度相关基因组多态性分布变化与年龄的相关性及其意义分析

探讨肿瘤患者红细胞CR1密度相关基因多态性与年龄变化是否有关。采用PCR方法测定肿瘤患者红细胞CR1密度相关基因多态性。结果 132例肿瘤患者红细胞CR1密度相关基因高表达率 (5 6 8% )明显低于 2 0 1例正常人 (78 11% ) ,而青年患者 (33 3% )比老年患者 (6 1 3% )更为低下 ;

壮、汉、苗族β-地中海贫血患者与正常人红细胞CR_1密度相关基因组的多态性研究

目的:探讨壮、汉、苗族β-地中海贫血患者与正常人红细胞补体受体1(CR1)密度相关基因组多态性分布及CR1活性变化。方法:采用PCR、HindⅢ酶切技术(RFLP)和酵母菌花环试验法测定壮、汉、苗族β-地中海贫血患者红细胞CR1密度相关基因组多态性和CR1的活性,并与正常壮、汉、苗族人群组作比较。结果:β-地中海贫血患者HH型占40.91%,HL型占27.27%,LL型占31.82%;壮、汉、苗族β-地中海贫血患者之间红细胞CR1密度相关基因组多态性分布无明显差异。正常壮族人群组HH型占36.67%,HL型占30.00%,LL型占33.33%;正常汉族人群组HH型占57.69%,HL型占36.54%,LL型占5.77%;正常苗族人群组HH型占42.31%,HL型占38.46%,LL型占19.23%。β-地中海贫血患者RBC-CRIR为10.86±1.15,其中壮族人群组27.36±1.19;汉族人群组26.72±1.29;苗族人群组28.36±1.07。β-地中海贫血患者LL型与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),汉族β-地中海贫血患者LL型比例明显比正常汉族人群高(P<0.01)。正常壮、汉、苗族之间LL型比较差异有统计学意义(P<0.01)。β-地中海贫血患者RBC-CR1R比例比正常壮、汉、苗族人群低(P<0.01)。结论:桂西地区壮、汉、苗族正常人群红细胞CR1密度相关基因组多态性异常分布增高,β-地中海贫血患者CR1基因LL型比率增高,红细胞CRI免疫黏附功能降低,该地区壮、汉、苗族β-地中海贫血发生率与其红细胞CR1密度相关基因组多态性异常分布无明显因果关系。

红细胞CR1密度相关基因组多态性与血细胞免疫活性相关性研究

目的 对正常人红细胞CR1密度相关基因组多态性与血细胞免疫活性相关的意义进行探讨。方法 采用CR1基因PCR PFLP方法和红细胞或淋巴细胞粘附肿瘤细胞的方法以及混合淋巴细胞培养3H TdR法测定红细胞CR1密度相关基因组多态性和血细胞的天然免疫和特异免疫活性。结果 发现红细胞CR1基因组HH型正常人 (32例 ) ,血细胞天然免疫活性都比HLA型 (1 7例 )或LL型 (1例 )天然免疫活性高。在供者中红细胞CR1基因HH型混淋刺激指数明显高于HL型或LL型。结论 红细胞CR1密度相关基因组多态性与血细胞免疫活性之间相关性在外周血干细胞移植治疗中的临床应用价值 。

红细胞CR1分子在Ⅱ型糖尿病患者表达及意义的探讨

目的 通过检测 型糖尿病 ( NIDDM)患者红细胞膜补体受体 1型分子 ( CR1 )的数量表达水平变化 (即活性变化 ) ,探讨患者红细胞 CR1分子活性变化与 NIDDM及发生并发疾病的关系。方法 采用酶联法测定红细胞 CR1分子的数量。结果 NIDDM患者红细胞 CR1分子的数量表达低于正常人平均水平 ( P<0 .0 1 ) ,有并发症组红细胞 CR1分子的数量表达水平显著低于无并发症组 ( P<0 .1 0 )。结论 NIDDM患者红细胞 CR1分子的活性降低 ,有并发症患者低于无并发症患者 ,CR1分子的活性的降低可能是其并发心血管系统疾病及感染的因素。 NIDDM患者 CR1分子的活性降低 ,为拓宽治疗途径提供了理论根据。检测 NIDDM患者红细胞 CR1分子的数量 ,对判定病情及并发疾病的预防也具有理论指导意义。

献血者红细胞CR1分子基因表达与献血后免疫状况相关性研究

目的 研究无偿献血者红细胞CR1基因高中低表达者献血后免疫状况 ,为安全献血提供依据。方法 随机选择 176位无偿献血者血液 ,应用PCR和HindⅢ酶切技术测定CR1基因表达 ;应用酶联免疫吸附法测定红细胞CR1分子数量A40 5值 ,随机抽样调查 33位高表达者及 2 5位中低表达者 ,在献血后 6个月时测定免疫球蛋白、C3 、C4及淋巴细胞亚群 ,并详细询问献血后状况。结果 献血者红细胞CR1高表达者与中低表达者在CR1A40 5值分子数量上存在显著性差异 (t=7.4 0 ,P <0 .0 1) ,但是两者献血后机体一般状况与部分免疫指标检测均无显著性差异(P >0 .0 5 )。结论 红细胞CR1高中低表达的无偿献血者献血后机体的体液与细胞免疫状况无明显变化。

原发性肝癌患者红细胞CR1数量基因型及活性的检测

目的：探讨红细胞免疫功能与原发性肝癌发病之间的关系。方法：应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法检测９４例肝癌、４９例肝硬化、４６例乙型肝炎患者及８０例正常人红细胞ＣＲ１数量基因型；同时利用ＥＬＩＳＡ方法检测红细胞ＣＲ１活性，并进行比较。结果：原发性肝癌、肝硬化患者红细胞ＣＲ１数量基因型与正常人比较相差显著（Ｐ＜０．０５），其红细胞免疫粘附（ＲＣＩＡ）活性明显低于正常人（Ｐ＜０．０１，＜０．０５）；乙肝、肝硬化、肝癌患者红细胞免疫复合物（ＩＣ）高于正常人（Ｐ＜０．０５）；不同疾病同基因型组间ＲＣＩ－Ａ活性相差不显著，而在于同种疾病不同基因型间ＲＣＩＡ活性相差显著（Ｐ＜０．０５）。

淫羊藿－蜂胶合剂对鸡红细胞CR_1增强作用的实验研究

用不同浓度的淫羊藿－蜂胶合剂与鸡红细胞在体外进行孵育，然后测其红细胞补体Ｉ型受体（ＣＲ１）的活性，以判定淫羊霍－蜂胶合剂对红细胞免疫功能的增强作用。结果显示：经２０％、１０％和５％的淫羊藿－蜂胶合剂处理后的鸡红细胞ＣＲ１花环率（ＣＲ１－Ｒ）分别为：３８．９％、２２．０％和９．０％，面对照组鸡红细胞ＣＲ１－Ｒ是９．３％。此结果表明：淫羊藿－蜂胶合剂具有明显的增高红细胞ＣＲ１活性作用，并与剂量有关。

肝炎肝硬化患者红细胞 CR1粘附活性与肝功能损伤程度的相关性研究

目的研究肝炎肝硬化患者红细胞 CR1粘附活性与肝功能损伤严重程度的相关性。方法采用红细胞天然免疫粘附肿瘤细胞的测定方法对88例肝炎肝硬化病人、30例正常人的红细胞 CR1分子粘附活性进行测定,5个或以上红细胞牯附1个肿瘤细胞为一个结合单位,计算粘附率。结果肝炎肝硬化患者红细胞 CR1分子粘附活性显著低于正常人群(P<0.01),失代偿性肝硬化患者的红细胞 CR1分子粘附活性显著低于代偿性肝硬化患者(P<0.01),肝炎肝硬化患者红细胞 CR1分子粘附活性的变化与胆碱酯酶(CHE)密切相关,按 Child Pugh 分级。肝炎肝硬化患者随 Child 积分的升高,其红细胞 CR1分子粘附活性相应下降。结论肝炎肝硬化病人红细胞CR1分子粘附活性的变化与其病情的严重程度密切相关,该项可作为判断肝病患者肝功能损伤程度的重要指标。

原发性肾病综合征中医辨证分型与红细胞CR1密度相关基因及数量表达和黏附活性的相关性

目的:探讨原发性肾病综合征(PNS)中医辨证分型与红细胞CR1密度相关基因及数量表达和黏附活性的 关系。方法:检测56例PNS患者和30例健康人的红细胞CR1密度相关基因及数量表达、黏附活性。结果:健康对照组及 PNS肝肾阴虚型、脾肾阳虚型、阴阳两虚型的红细胞CR1密度相关基因高、中、低表达无差异。红细胞CR1数量表达与黏 附活性,健康对照组及PNS肝肾阴虚型、脾肾阳虚型、阴阳两虚型依次降低,健康对照组明显高于肝肾阴虚型、脾肾阳虚 型、阴阳两虚型,与三组比较均有统计学差异(P<0.01,P<0.05);阴阳两虚型低于肝肾阴虚型和脾肾阳虚型,比较有统计 学差异(P<0.05)。结论:红细胞CR1数量表达与黏附活性与PNS中医辨证分型密切相关,可以作为判断虚证的一项量 化指标。