表达人红细胞生成素裸质粒治疗肾性贫血的实验研究

目的:观察表达人红细胞生成素(EPO)基因裸质粒通过电脉冲转移法导入大鼠和猕猴体内治疗腺嘌呤所致的肾性贫血的效果。方法:实验选择了喂含腺嘌呤饲料所致大鼠和猕猴的肾性贫血模型,电脉冲转移法把质粒导入动物股四头肌。实验分正常组、模型组、表达大鼠EPO基因裸质粒对照组(仅在大鼠肾性模型中)和不同剂量表达人EPO基因裸质粒组。动态检测血细胞比容(HCT)水平;提取给药部位肌肉组织总RNA进行逆转录PCR,检测EPO基因在肌细胞当中的表达;用EPO酶联免疫(ELISA)试剂盒测定血清EPO水平。结果:电脉冲肌肉转移表达EPO裸质粒可在局部有效表达和分泌。在大鼠模型中,给药后第2～5周,表达大鼠EPO基因裸质粒对照组和表达人EPO基因裸质粒组的HCT水平明显高于模型组。在猕猴模型中,表达人EPO基因裸质粒组在给药后第4～5周HCT水平明显高于模型组。在大鼠模型中,表达人EPO基因裸质粒组的血清有明显的中和活性,可抑制BEF-2细胞的增殖。结论:电脉冲转侈表达EPO基因裸质粒对腺嘌呤所致猕猴肾性贫血和大鼠肾性贫血具有明显的治疗作用。