高效液相色谱法测定桃仁红花配伍药对中羟基红花黄色素A含量的变化

【目的】观察桃仁红花不同配伍比例（质量比分别为1：1、1：2、1：3）在水煎液环境中对羟基红花黄色素A（HSYA）含量的影响：【方法】采用反相高效液相色谱（RP—HPLC）法，色谱柱为Luna C18柱（4．6mm×150mm，5μm），以甲醇-0．12mmol／L磷酸水溶液（28：72）为流动相，检测波长403nm，流速1．0mL／min，柱温30℃。【结果】HSYA在4．0～160．0μg／mL浓度范围内线性关系良好，其回归方程Y=25396X＋40247（r=0．9997），平均加样回收率为94．76％，相对标准偏差（sR）为2．93％。HSYA含量基本随着红花用量比例的增加而呈相应倍数递增，与桃仁用量无明显关系。【结论】本研究建立的HSYA含量测定方法简便准确，重复性好，可用于红花药材及其复方制剂质量标准的控制，桃仁对HSYA的溶出无明显影响。

红花提取物在急性血瘀大鼠体内的药代动力学研究

目的:考察红花提取物在急性血瘀大鼠体内的药代动力学特征。方法:通过皮下注射肾上腺素(0.07mL/kg)和冰水刺激造战大鼠急性血瘀模型,将正常组和模型组分别灌胃给予红花提取物5.62g/kg(含HSYA 100 mg),并分别测定大鼠在不同时间点下血浆样品中羟基红花黄色素A(HSY)A的药物浓度。结果:血瘀大鼠的血药浓度-时间曲线符合二室开放模型,AUC为19.17±1.24mg/L.h-1,t1/2β为1.67±0.76 h,t1/2α为0.66±0.12h,Cmax为8.05±0.57mg/L;而正常大鼠的AUC为7.32±0.44mg/L.h-1,t1/2β为1.21±0.36h,t1/2α为0.25±0.08 h,Cmax为4.89±0.61mg/L。结论:红花提取物在急性血瘀大鼠体内吸收和代谢均明显慢于正常机体内,说明中医的证可以改变药物的代谢过程。

藏红花素与灯盏细辛对慢性高眼压模型大鼠视神经保护作用的比较

背景 青光眼视神经损害的主要机制是视觉神经元的凋亡和视网膜血液供应的减少,灯盏细辛已证实对高眼压大鼠视网膜神经节细胞（RGCs）和视神经有保护作用.研究发现,藏红花提取物具有抗炎、抑制神经元凋亡和调节血流等作用,但其能否保护青光眼患者的RGCs尚不清楚. 目的 探讨藏红花素对慢性高眼压模型大鼠视神经的保护作用.方法 采用随机数字表法将32只SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、灯盏细辛组、藏红花素组,每组8只,均以右眼为实验眼.模型对照组、灯盏细辛组、藏红花素组大鼠采用巩膜静脉烧灼法建立慢性高眼压模型;假手术组大鼠仅剪开结膜,灯盏细辛组和藏红花素组大鼠于术前30 rmin和术后每日分别腹腔内注射灯盏细辛注射液150 mg/kg（0.5 ml）和藏红花素20 mg/kg（0.5 ml）,共给药4周,假手术组和模型对照组大鼠以同样的方式注射0.5 ml生理盐水.各组大鼠均于术前和术后1d、3d、1周、2周、3周、4周测量眼压.术后4周制备大鼠眼球及视神经标本,采用苏木精-伊红染色法测定视网膜厚度;采用TUNEL染色法计数RGCs凋亡数量;采用透射电子显微镜观察各组大鼠视神经轴突超微结构的变化;采用Western blot法检测视网膜中bcl-2和bax蛋白的表达.结果 模型对照组、灯盏细辛组和藏红花素组大鼠造模和干预后不同时间点眼压均明显高于假手术组,造模后不同时间点大鼠的眼压值均明显高于造模前,各组大鼠在造模前后不同时间点眼压值的变化差异均有统计学意义（F分组=169.079,P=0.000;F时间=50.505,P=0.000）.假手术组、模型对照组、灯盏细辛组和藏红花素组大鼠视网膜厚度分别为（192.72±4.28）、（165.15±3.89）、（177.75±3.35）和（182.48±4.12） μm,藏红花素组大鼠视网膜厚度值明显低于假手术组而高于模型对照组和灯盏细辛组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.假手术组、模型对照组、灯盏细辛组和藏红花素组大鼠RGCs凋亡率分别为（2.58±1.33）％、（42.10±4.71）％、（28.34±2.96）％和（19.95±2.93）％,藏红花素组大鼠RGCs凋亡率明显低于模型对照组和灯盏细辛组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.藏红花素组大鼠视神经有髓纤维数量和bcl-2/bax值均明显高于模型对照组和灯盏细辛组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.结论 藏红花素可抑制RGCs凋亡和视神经纤维的变性,对慢性高眼压大鼠视网膜神经细胞发挥保护作用,其对视神经的保护作用强于灯盏细辛.

脑得生片物质基础的HPLC-DAD-MS^n分析

目的:明确脑得生片的化学物质基础。方法:采用高效液相-二极管阵列-质谱(HPLC-DAD-MSn)联用技术检测并鉴定其主要化学成分。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×250mm,i.d,5μm),流动相为0.05%甲酸-水和乙腈,流速为0.5 ml.min-1。结果:在脑得生片中共检测到43个化学成分,通过比对紫外吸收图谱、标准品ESI-MSn质谱图提供的分子量及结构式,并结合文献报道,推断鉴定出其中22个化合物,分别为羟基红花黄色素A、4'-O-葡萄糖基葛根素、3'-羟基葛根素、大豆苷元-8-C-芹菜糖基(1-6)葡萄糖苷、葛根素、6″-O-木糖基葛根素、6″-O-芹菜糖基葛根素、3'-甲氧基葛根素、3'-甲氧基-6″-O-木糖葛根素、大豆苷、5,7-三羟基异黄酮-7-糖苷、葛根苷A、三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、大豆苷元、鹰嘴豆素A、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3和人参皂苷Rd。结论:初步明确了脑得生片的化学物质基础,为进一步提高脑得生片的质量控制标准提供了科学数据。

Chemical constituents from the Rhodiola genus plants

The Rhodiola genus（Crassulaceae） is composed of about 90 species, mainly growing in high and cold regions. Some species are used as medicinal herbs to treat many diseases, such as cerebral hypoxia, cardiovascular disease, plateau response and so on. Up to now, about 180 constituents which are mainly glycosides, flavonoids, terpenoids, tannins, sterol and other compounds have been identified in the genus. The present review summarizes the chemical constituents isolated from the Rhodiola genus over the past few decades, with particular emphasis on Rhodiola crenulata（HK. f. et Thoms.） H. Ohba which is being studied by our research group.