红花多糖治疗雌二醇诱导的小鼠胸腺萎缩的药效作用研究

目的:雌二醇诱导小鼠胸腺萎缩模型,评价红花多糖治疗胸腺萎缩的药效。方法:75只雌性ICR小鼠分为5组:正常对照组、模型组、乌苯美司组、SPS高、低剂量组,除对照组外,其余各组隔天腹腔注射苯甲酸雌二醇注射液,共6次;药物治疗组于末次注射24 h后开始给药,1次/d,共10 d。末次给药24 h后牺牲小鼠,观察体质量、免疫器官指数、血浆MDA与GST水平、外周血细胞与T细胞变化,并对胸腺组织进行HE染色、TUNEL细胞凋亡染色,检测胸腺输出能力。结果:高、低剂量红花多糖均可显著提高小鼠胸腺指数(P<0.05),提高外周血白细胞数量(P<0.05)、CD3^(+)CD4^(+)T、CD3^(+)CD8^(+)T细胞比例(P<0.05)及CD4^(+)T/CD8^(+)T,并改善胸腺组织损伤。高剂量红花多糖可显著减少胸腺组织细胞凋亡,并提高胸腺输出能力。结论:红花多糖对雌二醇诱导的小鼠胸腺萎缩具有治疗作用。

Box-Behnken优化红花多糖提取工艺研究

采用单因素和Box-Behnken响应面法优化实验条件,确定红花多糖提取的最佳条件.红花多糖的最佳提取工艺参数为:料液比1∶20(g/mL)、提取时间90 min、提取温度90℃、粉碎度0.600~0.125 mm,此条件下多糖得率为38.27%.因素的显著性顺序是粉碎度>提取温度>提取时间>料液比.红花多糖可作为一种新型抗氧化药物及食物开发.

红花多糖对菌群失调小鼠肠道菌群及细胞因子的影响

目的探究红花多糖对盐酸林可霉素引起的小鼠肠道菌群失调的改善效果。方法选取50只昆明小鼠适应性饲养1周后,随机取10只为对照组,其余40只给予盐酸林可霉素连续灌胃3 d,构建肠道菌群失调模型小鼠,然后随机分为模型组、红花多糖组(150 mg/kg)、丽珠肠乐组(7 mg/kg)、自然恢复组,每组各10只。除模型组外,其他各组第4天起灌胃给药,对照组、自然恢复组灌胃等体积的生理盐水,连续灌胃7 d。灌胃结束后,用酶联免疫吸附法(ELISA)对各组小鼠血清白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)进行检测。无菌收集小鼠回盲部内容物对肠道菌群计数。结果小鼠给予一定剂量的盐酸林可霉素后肠杆菌和肠球菌数量显著增加(P=0.000),双歧杆菌和乳酸杆菌数量明显下降(P=0.000,P=0.003);血清中IL-6和TNF-α水平显著提高(P=0.000)。红花多糖干预后,双歧杆菌和乳酸杆菌数量显著增加(P=0.001),肠杆菌和肠球菌数量显著减少(P=0.037,P=0.002);IL-6和TNF-α水平显著降低(P=0.000)。结论红花多糖对小鼠的肠道菌群失调具有调节作用,并使其恢复正常状态。

红花多糖诱导SMMC-7721细胞增殖阻滞的实验研究

目的:通过研究红花多糖(Safflower polysaccharide,SPS)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的影响,进一步探讨SPS抗肿瘤作用的分子机制。方法:应用MTT法测定SPS对SMMC-7721细胞增殖的影响;流式细胞术检测SPS对细胞周期和ROS的影响。结论:SPS可以抑制SMMC-7721细胞的增殖,最佳剂量为0.64 mg/ml;细胞增殖阻滞于G2/M期;细胞内ROS的产生随SPS浓度增高而增多,与对照组相比具有统计学意义(P<0.001)。SPS可能通过诱导ROS的产生而使细胞增殖阻滞,进而起到抗肿瘤的作用。

红花多糖对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制

目的探讨红花多糖对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及可能机制。方法 Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,红花多糖低[25 mg/(kg·d)]、中[50 mg/(kg·d)]、高[100 mg/(kg·d)]剂量组及尼莫地平组[15 mg/(kg·d)],术前15 d开始灌胃给药,每天1次,假手术组及模型组用等体积的生理盐水替代;末次给药1 h后,线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,检测红花多糖对神经功能学评分、脑组织梗死体积及含水量、脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)表达等指标的影响。结果与模型组比较,红花多糖预处理能够使大鼠神经功能缺陷症状明显改善(P<0.05),梗塞区体积比及含水量也均有不同程度的降低;红花多糖低、中、高剂量组均能降低脑组织TNF-α和IL-1β的量,增加IL-10的量,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);各剂量红花多糖组大鼠脑组织Caspase-3与PARP表达与模型组比较均显著性降低(P<0.05)。结论红花多糖具有保护大鼠脑缺血再灌注损伤的作用,该作用与其抑制炎症因子的产生及减少神经细胞凋亡有关。

红花多糖对荷S180肉瘤小鼠血清IL-10和IL-12及TNF-α的影响

目的探讨红花多糖(SPS)对荷S180肉瘤小鼠免疫功能的影响及其抗肿瘤的作用机制。方法 40只雄性BABL/c小鼠随机分为5组:空白对照组、模型对照组、SPS低剂量组、SPS中剂量组及SPS高剂量组。模型对照组及SPS低、中、高剂量组小鼠均于右侧腋窝皮下接种0.2 mL浓度为1×107.mL-1瘤细胞悬液,制备成荷S180肉瘤鼠模型;空白对照组不造模。模型制备后,SPS低、中、高剂量组小鼠分别经腹腔注射SPS 20、40、80mg/(kg.d),空白对照组和模型对照组给予同体积生理盐水。给药10 d后测定各组小鼠肿瘤生长抑制率,酶联免疫吸附法检测荷瘤鼠血清中白细胞介素(IL)-10、IL-12及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果 SPS低剂量组荷瘤鼠肿瘤生长未受到明显抑制(P>0.05),而SPS中、高剂量组荷瘤鼠肿瘤生长受到明显抑制(P<0.05);SPS低剂量组荷瘤鼠血清IL-10含量显著降低(P<0.01),但TNF-α、IL-12含量升高不明显(P>0.05);SPS中、高剂量组荷瘤鼠血清IL-10含量显著降低(P<0.01),同时TNF-α、IL-12含量显著升高(P<0.01)。结论 SPS可能是通过提高荷瘤鼠血清IL-12和TNF-α的含量,降低IL-10含量,从而起到调节细胞免疫功能及抑制肿瘤生长的作用。

红花多糖对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用

目的:观察红花多糖(Safflower polysaccharide,SPS)对SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用。方法:不同浓度SPS处理体外培养的SMMC-7721细胞株,采用MTT法测定SPS对SMMC-7721细胞增殖的影响;倒置显微镜观察细胞形态学变化;吖啶橙(AO)染色荧光显微镜观测以及Annexin-V/PI双染流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:MTT法检测结果显示SPS对人肝癌SMMC-7721细胞体外增殖具有明显的抑制作用,该抑制作用呈明显的时间和剂量依赖性(P<0.05或P<0.01)。光镜下可见SPS组贴壁细胞数明显减少,细胞变小、变圆,折光性差,贴壁不牢,悬浮细胞增多。AO染色荧光显微镜下观察,24h部分细胞出现胞质浓缩,体积缩小,核固缩,染色增强,荧光更为明亮,形成致密浓缩的绿色荧光等;48h和72h部分细胞可见细胞核固缩为新月状。流式细胞术结果显示细胞凋亡率随药物浓度增加亦呈增长趋势。结论:SPS能显著抑制人肝癌细胞SMMC-7721生长且呈明显的量效和时效关系。SPS可诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡,具有一定的剂量依赖性。

红花多糖对人胃癌SGC-7901细胞线粒体膜电位及增殖的影响

目的体外观察红花多糖(SPS)对人胃癌SGC-7901细胞线粒体膜电位(MMP)及细胞增殖的影响,初步探讨SPS对SGC-7901细胞的抑制机制。方法不同浓度的SPS处理SGC-7901细胞,倒置显微镜观察SGC-7901细胞的形态学变化,透射电镜观察SGC-7901细胞超微形态结构变化,罗丹明123染色观察SGC-7901细胞MMP变化,MTT比色法检测SGC-7901细胞的增殖。结果倒置显微镜观察到经SPS处理的贴壁细胞体积变小,部分细胞崩解,有凋亡小体形成,随剂量增加愈加明显;透射电镜观察到经SPS处理的细胞线粒体肿胀、胞核浓缩偏移,呈凋亡形态改变;罗丹明123染色可见经SPS处理的细胞内荧光强度显著下降,该作用呈明显的时间依赖性;MTT检测显示经SPS处理的细胞体外增殖受抑制,该作用呈明显的剂量依赖性。结论 SPS可以降低人胃癌SGC-7901细胞MMP,同时能明显抑制SGC-7901细胞体外增殖并可诱导细胞凋亡,该作用呈一定的时间与剂量依赖。

红花多糖对人胃癌SGC-7901细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响

目的观察红花多糖(SPS)对人胃癌SGC-7901细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA及其蛋白表达的影响,探讨SPS抑制人胃癌细胞的作用机制。方法 SPS在不同时间(0、24、48、72 h)处理体外培养的人胃癌SGC-7901细胞,采用Real-time PCR检测Bcl-2、Bax mRNA表达水平,采用Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达水平的动态变化。结果 SPS处理的人胃癌SGC-7901细胞,Bcl-2基因及蛋白表达量明显下降,而Bax基因及蛋白表达量明显升高。结论 SPS可能是通过提高Bax基因表达、降低Bcl-2基因表达,而诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡,其作用具有一定的时间依赖性。

红花多糖对人PBMC增殖活性及分泌细胞因子的影响

[目的]探讨红花多糖(SPS)对人外周血单个核细胞(PBMC)的增殖作用及PBMC诱生细胞因子的影响。[方法]采集健康成人外周血,常规分离PBMC,体外与不同浓度的SPS共同培养,检测PBMC的增殖活性及白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)的水平。[结果]SPS对PBMC增殖有促进作用,以1.25g/L和0.625g/L剂量组增殖活性增加明显(P<0.05);红花多糖(SPS)各组IL-2和IFN-γ水平明显高于对照组(P<0.05),而各组TNF-α的水平无显著性差异。[结论]SPS可促进PBMC的增殖,提高IL-2和IFN-γ水平,增强免疫功能。

红花多糖超声提取的条件优化及其红外光谱分析

目的利用响应面法优化红花多糖的超声提取工艺,并对其进行红外光谱分析。方法以红花多糖得率为评价指标,在单因素实验的基础上,选取料液比、超声温度、超声时间3个因素,采用Box-Behnken中心组合设计,通过3因素3水平实验和响应面回归分析得出最优提取工艺。利用红外光谱对提取物进行定性分析。结果红花多糖的最佳提取工艺为料液比1:25 (m:V),超声温度69℃、超声时间60 min、超声功率630 W,在该条件下,红花多糖的提取率为14.16%,并通过红外光谱分析确认所提取物为多糖类物质。结论该提取工艺设计合理,操作简便,可用于红花多糖的提取,对红花多糖的深入研究具有重要意义。

红花多糖抑制PI3K/Akt信号通路诱导人胃癌细胞凋亡的研究

目的 探讨红花多糖通过抑制PI3K/Akt信号通路调控胃癌细胞凋亡的机制.方法 MTT比色法观察SPS对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖的抑制作用,流式细胞仪（FCM）分析细胞凋亡,实时荧光定量RT-PCR法和Western Blot法检测蛋白激酶B（Akt）基因及蛋白的表达情况.结果 红花多糖在一定范围内以剂量依赖方式和时间依赖方式抑制SGC-7901胃癌细胞生长.流式细胞仪检测,SGC-7901细胞经红花多糖处理24h,其早期凋亡率、细胞坏死或晚期凋亡率显著增加,呈现明显的剂量依赖性.Real-time PCR和Western Blot检测发现,SPS处理的细胞Akt基因及蛋白表达量明显下降.结论 红花多糖对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖具有明显的抑制作用,该抑制作用具有一定的时间依赖性和剂量依赖性;红花多糖能够下调Akt mRNA表达,降低Akt和p-Akt蛋白的表达量,抑制Akt通路发挥抗肿瘤作用.

红花多糖对人非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨不同浓度的红花多糖(safflower polysaccharide,SPS)对人非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响。方法根据台盼蓝染色法绘制细胞生长曲线及计算细胞活力;用不同浓度(0.04,0.08,0.16,0.32,0.64,1.28,2.56mg/m L)的红花多糖处理A549细胞24、48、72h后在倒置显微镜下观察细胞形态学改变;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度(0.04,0.08,0.16,0.32,0.64,1.28,2.56mg/m L)的红花多糖对人非小细胞肺癌细胞体外生长的抑制作用,Annexin V-FITC/PI荧光双标流式细胞术检测细胞凋亡率。结果台盼蓝染色后发现在第2-6天细胞呈对数生长,在第3-5天细胞活力最好;不同浓度SPS处理24,48,72h后,各时间点均以0.64mg/m L的SPS抑制率最高;不同浓度SPS处理48h后,倒置显微镜下A549细胞表现为皱缩、变圆等细胞凋亡性;各浓度组A549细胞的凋亡率增加呈剂量依赖性,而1.28mg/m L组除外。结论红花多糖能明显抑制人非小细胞肺癌A549细胞的增殖,诱导A549细胞的凋亡,在SPS浓度为0.64mg/m L最为显著。

红花多糖对人PBMC和CD8＋T细胞增殖作用的影响

目的探讨红花多糖（safflower polysaccharide，sPs）体外对人外周血单个核细胞（PBMC）和CD8＋T细胞增殖作用的影响。方法采用葡聚糖-泛影葡胺密度梯度离心法（ficoll-hypaque density gradient centrifugation）从健康成人外周血中分离PBMC，在体外与不同浓度的SPS共同培养，用3H-TdR法检测PBMC增殖活性；流式细胞术检测CI）8＋T细胞的增殖情况。结果SPS能够促进PBMC增殖，尤其1．25g·L-1和0．625g·L-1。两组PBMC增殖作用明显，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；SPS对CD8＋T细胞的增殖有促进作用，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论SPS可促进PBMC、CD8＋T细胞的增殖，增强机体非特异性和特异性免疫功能。

新疆不同产地红花多糖含量测定及抗氧化活性研究

目的探索水提醇沉法提取红花多糖的最佳提取工艺,测定塔城、伊犁、和田3个不同产地红花中多糖的含量,并考察其体外抗氧化活性。方法在单因素实验的基础上,采用Box-behnken中心组合实验原理,以料液比、提取温度、提取时间为自变量,多糖提取率为响应值,设计3个因素3个水平实验,进行红花中多糖最佳提取工艺的优化。采用蒽酮-硫酸比色法测定红花中多糖的含量。以伊犁红花为研究对象,采用DPPH·、·OH及铜离子还原实验3种方法评价红花多糖的体外抗氧化活性。结果各因素对红花多糖提取率的影响次序依次为:提取温度>提取时间>料液比,最佳提取工艺为:料液比1∶51(g/mL),提取温度94℃,提取时间1.8h。测得塔城、伊犁、和田3个地区红花多糖的含量依次为(32.7±6.2)、(34.6±8.4)、(28.9±7.6)mg/g。红花多糖对DPPH·和·OH有较好的清除能力,对铜离子有较强的还原能力,且呈一定的量效关系。结论该提取方法简便易行,结果准确可靠,适用于红花多糖的提取,红花多糖具有较强的抗氧化活性,有望被开发成为天然的抗氧化剂。

红花多糖对胃癌MGC-803细胞增殖和侵袭的影响

目的:探讨红花多糖对胃癌MGC-803细胞增殖和侵袭的影响及其分子机制。方法:以不同浓度(0、0.16、0.32和0.64 mg/ml)红花多糖作用于MGC-803细胞48 h后,分别采用MTT法、克隆形成实验、流式细胞仪和Transwell法检测细胞的增殖能力、克隆形成能力、周期分布情况和侵袭能力,Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin、c-Myc、CyclinD1、VEGF和MMP-9的表达情况。采用0.32 mg/ml红花多糖和Wnt/β-catenin信号通路抑制剂VXAV939单独或联合处理MGC-803细胞48 h后,进一步观察细胞的增殖和侵袭情况。结果:与对照组(0 mg/ml)相比,0.16、0.32和0.64 mg/ml红花多糖处理组细胞增殖率、克隆形成率、侵袭细胞数和细胞内β-catenin、c-Myc、CyclinD1、VEGF、MMP-9蛋白的表达水平均显著降低,而细胞在G0/G1期所占百分比显著升高(P<0.05)。使用VXAV939后,红花多糖对MGC-803细胞的上述作用进一步加强。结论:红花多糖可抑制胃癌MGC-803细胞增殖和侵袭并诱导细胞周期阻滞于G0/G1期,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

红花多糖对人胃癌SGC-7901细胞抑制作用的初步研究

目的观察红花多糖(SPS)对人胃癌SGC-7901细胞增殖与凋亡的影响。方法不同浓度的SPS相同时间作用于人胃癌SGC-7901细胞,采用倒置显微镜观察SGC-7901细胞的形态学变化及增殖情况,吖啶橙染色观察SGC-7901细胞的凋亡情况。结果 SPS处理组贴壁细胞的数量明显减少,细胞体积变小,部分细胞崩解。吖啶橙染色结果显示,经SPS处理组细胞胞质浓缩、染色增强,部分细胞核固缩为新月状。结论 SPS能抑制人胃癌SGC-7901细胞体外生长,同时可诱导SGC-7901细胞凋亡,该作用呈一定的时间与剂量依赖。

红花多糖对人胃癌细胞SGC-7901凋亡的形态学实验研究

目的:从形态学角度探讨红花多糖(SPS)诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的作用。方法:MTT法观察SPS对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖的抑制作用。荧光显微镜和透射电镜观察细胞凋亡的形态学变化。Rhodamine 123染色观察SPS处理后细胞线粒体跨膜电位变化。结果:SPS能明显抑制SGC-7901细胞增殖,具有时间和剂量依赖性。显微镜下发现SPS处理后贴壁细胞减少,部分细胞变圆、皱缩、脱落,部分细胞崩解。荧光显微镜下和透射电镜下,SPS作用的细胞呈现典型凋亡细胞状态。胃癌细胞Rhodamine 123荧光强度明显减弱。结论:SPS对人胃癌细胞体外增殖有抑制作用,且具有明显的时间和剂量依赖性。

红花多糖对荷瘤鼠Ang-2、PTEN蛋白表达的影响

目的:研究红花多糖(SPS)对荷瘤鼠的移植瘤组织中Ang-2、PTEN蛋白表达的影响及意义。方法:选择昆明种小鼠80只制备荷瘤小鼠,随机分为4组,每组20只。对照组:模型组;实验组:环磷酰胺药物组、红花多糖+环磷酰胺药物联合组、受试药物红花多糖组。用药方法:(1)模型对照组给荷瘤鼠灌服生理盐水;(2)环磷酰胺药物组灌服环磷酰胺;(3)红花多糖+环磷酰胺药物联合组灌服环磷酰胺和红花多糖;(4)红花多糖组:红花多糖灌服荷瘤鼠。给药10天后停药,取肿瘤组织,称取湿重,计算抑瘤率。然后用S-P免疫组织化学法测定对照组、实验组荷瘤鼠移植瘤组织中Ang-2、PTEN蛋白的表达情况。结果:荷瘤鼠灌服生理盐水的模型对照组移植瘤组织中Ang-2的免疫组化阳性表达率显著高于各实验组(P<0.05),而PTEN蛋白的阳性表达率显著低于各实验组(P<0.01)。红花多糖、环磷酰胺联合用药组的抑瘤率最高,其次为环磷酰组、红花多糖组。结论:红花多糖具有抑制肿瘤组织生长的作用,可降低肿瘤组织中Ang-2的表达,从而增强PTEN蛋白的表达。

活性氧在红花多糖抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖中的作用

目的:研究活性氧(reactive oxygen species,ROS)在抑制人肝癌细胞增殖中的作用。方法:采用MTT法测定SPS对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响;倒置显微镜观察不同浓度的SPS作用肝癌细胞后,细胞的形态学变化;流式细胞仪检测不同剂量组细胞ROS的变化。结论:SPS可以抑制SMMC-7721细胞增殖,对其形态影响很大,可能与其促进ROS的增加有关。