红花水提物对ox-LDL损伤心肌微血管内皮细胞的保护作用及ESR谱研究

目的:观察红花水提物对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)致体外培养大鼠乳鼠心肌微血管内皮细胞损伤的保护作用,并初步探讨其抗氧化作用机制。方法:采用第3代大鼠乳鼠心肌微血管内皮细胞,用红花水提物预处理(500,100,20 mg.L-1)24 h后,ox-LDL(100 mg.L-1)孵育24 h进行损伤,实验结束后取上清液,测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)和黄嘌呤氧化酶(XOD)活性,用自旋捕集技术结合电子自旋共振波谱技术(electron spin resonance,ESR)检测各组细胞悬液中氧自由基信号的强弱。结果:红花水提物各剂量组能够明显减少内皮细胞LDH的释放,降低培养液中MDA含量和XOD的活性,同时提高SOD,NO,NOS和GSH-Px的活性,使细胞悬液中的ESR自由基信号明显减弱。结论:红花水提物具有抗ox-LDL致体外培养大鼠乳鼠心肌微血管内皮细胞损伤的作用,其机制与其减少氧自由基产生、增强自由基的清除、增强内源性抗氧化剂的活性,使高毒性的自由基转化成无害物质等有关。

红花水提物对急性心肌梗死大鼠心肌保护机制研究

目的研究了红花水提物对急性心肌梗死大鼠心肌保护作用。方法选取45只SD大鼠,采用结扎大鼠左冠状动脉前降支建立AMI模型,并随机分为模型组、红花水提物10 mg/kg、20 mg/kg和40 mg/kg组,另取15只大鼠为假手术组,只分离血管,不结扎,不插线。模型组和对照组给予等体积的生理盐水灌胃。末次给药后24 h处死各组大鼠,取心肌组织,采用RT-PCR法和Western bolt法分别测定各组大鼠心肌组织中caspase-3 mRNA和蛋白水平;采用比色法测定各组大鼠心肌组织中MDA含量和SOD的活性。结果与对照组比较,模型组、红花水提物10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg组大鼠心肌组织中caspase-3 mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05),MDA水平显著上升(P<0.05),SOD活性显著下降(P<0.05)。与模型组比较,红花水提物10 mg/kg、20 mg/kg和40 mg/kg组大鼠心肌组织中Caspase-3 mRNA和蛋白质水平显著下降(P<0.05),MDA水平显著下降(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05)。结论红花水提物可显著降低急性心肌梗死大鼠心肌组织细胞的凋亡和氧化损伤,对心肌具有一定的保护作用。

草红花水提物对心肌缺血-再灌注损伤引起心肌细胞凋亡的影响

目的观测草红花水提物对大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡的影响。方法采用大鼠左冠状动脉前降支结扎法制备心肌缺血再灌注模型。实验分为3组假手术组,缺血再灌注组,草红花水提物治疗组。缺血30min,再灌注120min,检测心肌细胞凋亡指数AI、Bcl-2、Bax基因蛋白表达。结果与假手术组比较,缺血再灌注组AI增加,Bax阳性表达增强,Bcl-2阳性表达减弱(P<0.01);与缺血再灌注组比较,草红花水提物治疗组,AI、Bax阳性表达下降(P<0.01),Bcl-2阳性表达上调(P<0.05)。结论草红花水提物具有抑制心肌缺血再灌注损伤引起的心肌细胞凋亡作用。

大鼠口服红花水提物和红花黄色素后羟基红花黄色素A的排泄研究

建立简便的高效液相色谱法(HPLC)测定大鼠口服红花水提物和红花黄色素后尿、粪和胆汁中主要活性成分羟基红花黄色素A(HSYA)的含量。色谱柱为Hypersil BDS-C18(250×4．6mm,5μm),流动相为乙腈-0．3%冰醋酸水溶液梯度洗脱,检测波长320nm,葛根素或对羟基苯甲醛为内标。尿、粪和胆汁中的HSYA的日内精密度小于3．1%,日间精密度小于5．8%。提取回收率为79．2%～102．1%。该方法首次研究了大鼠口服红花水提物和红花黄色素后羟基红花黄色素A的排泄情况。

蒙药红花水提物的毒性观察

目的:血清动态观察蒙药红花水提物(HS)对肝、心、肾的毒性作用。方法:将蒙药红花水提物分为低、中、高剂量组及正常组,分别灌胃3个月HS,每天灌胃1次,每14 d尾部采血1次,动态观察血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、三酰甘油酯(TG)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、尿素(Urea)、肌酐(Cr)水平的变化;3个月后处死大鼠,取肝、心、肺、肾、脾、胃、肠、脑组织做苏木精-伊红染色(HE)病理观察。结果:HS低、中、高剂量组持续用药3个月后大鼠血清GPT、GOT、TG、LDH、CK、Urea、Cr水平和组织病理切片结果发现对肝、心、肾基本无损伤。结论:根据血清GPT、GOT、TG、CK、LDH、Gr、Urea水平和组织病理学观察发现,服用HS(0.4767~8.5806 g/kg)长达3个月对肝、心、肾基本无毒性。

红花水提物对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)所致的心肌微血管内皮细胞损伤的影响

目的:观察红花水提物对血管内皮细胞的保护作用,探求其抗氧化的机制。方法:利用大鼠原代心肌微血管内皮细胞(rCMEC)的培养进行试验,并对获得的数据进行方差分析(ANOVA)及多组间比较等。结果:提示呈现红花水提物具有提高抗氧化酶活性、减少氧化产物生成及减轻ox-LDL损伤作用的趋势。结论:通过红花水提物预处理,可以减轻ox-LDL对内皮细胞的氧化损伤。

红花水提物对乳鼠心肌细胞H_2O_2所致损伤的保护作用及ESR谱研究

目的:观察红花水提物对体外培养大鼠乳鼠心肌细胞H2O2损伤的保护作用及电子自旋共振(ESR)波谱的影响。方法:建立心肌细胞H2O2损伤模型,实验分5组,空白对照组,模型对照组:H2O2(1 mmol.L-1)孵育1 h;红花水提物500,100,20 mg.L-1剂量组:分别给予不同浓度的红花水提物,预处理24 h,然后换为H2O2(1 mmol.L-1)孵育1 h。实验结束后分别收集细胞上清液测定乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)和黄嘌呤氧化酶(XOD)活性,用自旋捕集技术结合电子自旋共振波谱技术(Electron Spin Res-onance,简称ESR)检测各组细胞悬液中氧自由基信号的强弱。结果:红花水提物各剂量组能够明显提高H2O2损伤后的心肌细胞的搏动频率,使细胞存活率提高,减少心肌细胞LDH的释放,降低培养液中MDA和XOD的含量,同时提高SOD,NO和GSH-Px的活性,使细胞悬液中的ESR氧自由基信号明显减弱。结论:红花水提物对体外培养乳鼠心肌细胞具有保护作用,其机制与其减少活性氧产生、增强氧自由基的清除、增强内源性抗氧化酶的活性有关。

西红花苷对氧化性低密度脂蛋白致内皮细胞损伤的保护作用

目的利用ox-LDL致心肌微血管内皮细胞损伤模型,观察了西红花水提物对血管内皮细胞的保护作用。方法培养大鼠原代心肌微血管内皮细胞进行试验,然后对观察数据方差分析(ANOVA)及多组间比较等。结果发现与对照模型组相比,西红花水提物具有减少氧化产物生成、减轻ox-LDL损伤及提高抗氧化酶活性等作用,并且组间差异具有显著性。西红花水提物100μg.mL-1的ox-LDL溶液能够降低内皮细胞存活率(P<0.01)。结论西红花水提物减轻内皮细胞ox-LDL损伤的作用可能通过减少自由基产生而实现,与对照组比较,西红花水提物500μg.mL-1和20μg.mL-1的组细胞悬液中自由基信号明显减弱。