红花清肝十三味丸通过抑制炎性细胞浸润改善小鼠肝损伤的研究

[目的]研究蒙药红花清肝十三味丸(HHQG)通过抑制炎性细胞浸润改善小鼠肝损伤的作用机制。[方法]选取6~8周龄的雄性C57BL/6小鼠54只,随机分为对照组、模型组和HHQG保肝组,每组18只。HHQG保肝组连续7 d每天灌胃1次HHQG,剂量为0.6165 g/(kg·BW),对照组和模型组每天灌胃1次等体积的生理盐水;第7天灌胃4 h后,对照组腹腔注射剂量为0.1 mL/(10 g·BW)的橄榄油,模型组和HHQG保肝组均腹腔注射等剂量的CCl_(4)与橄榄油混合物(CCl_(4)∶橄榄油=1∶4,V/V)。肝损伤造模后第2、5、7天,通过检测血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活力、观察肝脏组织病理学变化(HE染色及Masson染色),评价肝损伤模型制备是否成功以及HHQG对肝损伤的缓解作用;通过免疫组织化学技术检测肝脏组织中性粒细胞和单核/巨噬细胞浸润情况;应用免疫组织化学技术和反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术分析肝脏组织中炎性因子TNF-α的表达情况;运用转录组测序(RNA-seq)及RT-qPCR技术分析HHQG对肝脏组织中黏附分子基因表达的影响。[结果]综合多项评价指标,模型组小鼠出现明显的肝损伤症状,提示CCl_(4)诱导的肝损伤模型制备成功。与模型组相比,肝损伤后第2天,HHQG保肝组小鼠血清中AST和ALT活力极显著(P<0.01)降低。HHQG可减少肝损伤区域中性粒细胞和单核/巨噬细胞等炎性细胞浸润,缓解胶原纤维物质沉积,通过促进肝细胞增殖进行组织修复。HHQG保肝组小鼠肝损伤区域TNF-α表达量减少;与模型组相比,肝损伤后第2、7天以及第5天,HHQG保肝组的肝脏组织中TNF-α基因的mRNA相对表达量分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)降低。转录组数据分析表明,HHQG可显著下调肝损伤后与中性粒细胞和单核/巨噬细胞浸润相关的黏附分子基因群;RT-qPCR验证试验结果显示,与模型组相比,肝损伤后第5、7天,HHQG保肝组的肝脏组织中VCAM-1基因的mRNA相对表达量极显著(P<0.01)降低;肝损伤后第2天以及第5、7天,HHQG保肝组的肝脏组织中ICAM-1基因的mRNA相对表达量分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)降低。[结论]HHQG通过减少以中性粒细胞和单核/巨噬细胞为主的炎性细胞浸润,下调肝损伤区炎性因子TNF-α的表达,以及抑制黏附分子的表达,减轻肝损伤后发生的炎症,从而发挥抗炎保肝作用。

红花清肝十三味丸通过激活HNF4α改善肝功能的保肝机制研究

[目的]探讨红花清肝十三味丸(HHQG)通过激活肝细胞核因子4α(hepatocyte nuclear factor 4α,HNF4α)改善肝功能的保肝作用机理。[方法]将45只C57BL/6J小鼠随机分为对照组、CCl_(4)损伤组、HHQG组,每组15只;HHQG组小鼠灌胃剂量为0.6165 g/(kg·BW)的HHQG,每天1次,持续7 d,对照组和CCl_(4)损伤组灌胃等体积的无菌蒸馏水;末次灌胃4 h后,对照组小鼠腹腔注射剂量为5 mL/(kg·BW)的橄榄油,CCl_(4)损伤组和HHQG组小鼠腹腔注射相同剂量的CCl_(4)与橄榄油混合液(CCl_(4)∶橄榄油=1∶4,V/V)进行肝损伤造模;分别在造模后第2、5、7天采集各组小鼠血液及肝脏组织样本;记录各组小鼠在试验期间的体重;测定血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)及总超氧化物歧化酶(SOD)活力;采用HE染色法及Masson染色法观察肝脏病理组织学变化;应用转录组测序(RNA-seq)技术分析差异基因富集通路;利用免疫组织化学技术检测HNF4α蛋白的表达情况。[结果]与对照组相比,在造模后第1~4天以及第6~7天,CCl_(4)损伤组小鼠体重显著(P<0.05)或极显著(P<0.01或P<0.001)降低;与CCl_(4)损伤组相比,在造模后第4天以及第6~7天,HHQG组小鼠体重显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)增加。与对照组相比,在造模后第2天,CCl_(4)损伤组小鼠血清ALT和AST活力极显著(P<0.001)升高;与CCl_(4)损伤组相比,在造模后第2天,HHQG组小鼠血清ALT和AST活力显著(P<0.05)降低。HE染色及Masson染色观察结果显示,在造模后第2、5、7天,与CCl_(4)损伤组相比,HHQG组小鼠肝脏组织损伤程度明显改善。KEGG信号通路富集分析表明,与CCl_(4)损伤组相比,HHQG组小鼠肝脏组织中过氧化物酶体增殖物激活受体、脂肪酸降解、脂肪酸代谢等信号通路上调,核糖体、甘油磷脂代谢、甲状腺癌症等信号通路下调。与CCl_(4)损伤组相比,HHQG组小鼠肝脏组织中与肝脏分化相关的基因群(HNF4α、ATF5、Cebpb等)显著上调。免疫组织化学分析显示,与CCl_(4)损伤组相比,在造模后第2、5天,HHQG组小鼠肝脏组织中HNF4α表达量明显增加。[结论]HHQG通过激活HNF4α,抑制肝脏氧化损伤、促进肝脏组织修复以及维持肝脏功能,改善小鼠肝损伤,从而发挥保肝效应。

基于HPLC-Q-Exactive MS和网络药理学探讨红花清肝十三味丸治疗非酒精性脂肪肝的药效物质基础及作用机制

目的利用高分辨液相色谱-质谱联用仪,快速准确地对红花清肝十三味丸中复杂的化学成分进行分析鉴定,旨在明确其缓解非酒精性脂肪肝的有效成分,同时结合网络药理学和分子对接,探索红花清肝十三味丸潜在的作用机制。方法使用甲醇和含有0.1%甲酸的水溶液作为流动相,进行梯度洗脱;采用正负离子交替扫描模式切换扫描,扫描范围m/z 110~1200;通过与对照品、参考文献与自建数据库比对后对复方中化合物进行识别鉴定;基于液质联用数据,通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库进一步筛选活性化合物,并利用SwissTargetPrediction、GeneCards等在线数据库预测分析红花清肝十三味丸在治疗非酒精性脂肪肝可能的靶点并进行KEGG与GO的富集分析;利用蛋白质-蛋白质相互作用网络筛选核心靶点;最后运用分子对接技术验证活性化合物与靶点的潜在结合活力。结果从红花清肝十三味丸中共鉴定出75个化合物,其中黄酮类化合物31个,有机酸类化合物17个,鞣质类化合物9个,环烯醚萜类化合物8个,木质素类化合物3个及其他类化合物7个。利用网络药理学方法筛选出核心靶点5个:丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、表皮生长因子受体(EGFR)、人表皮生长因子受体2/酪氨酸激酶受体2(HER2/ERBB2)、磷脂酰肌醇-3-激酶调节亚基1(PI3KR1)及非受体酪氨酸激酶Src。KEGG富集通路主要为:PI3K-AKT信号通路、EGFR酪氨酸激酶抑制剂抵抗通路、ERBB信号通路。结论对红花清肝十三味的复杂化学成分进行了快速准确地分析鉴定,同时探讨其治疗非酒精性脂肪肝的可能作用机制,为红花清肝的质量控制及后续研究提供科学参考。

红花清肝十三味丸辅助治疗乙型肝炎肝硬化效果观察

目的观察红花清肝十三味丸辅助治疗乙型肝炎肝硬化的效果。方法选取该院2020年1月至2023年6月收治的乙型肝炎肝硬化患者100例,随机分为对照组与观察组各50例。对照组采用抗病毒、护肝、降酶等对症治疗。观察组在对症治疗基础上加服红花清肝十三味丸。两组均连续治疗3个月,比较疗效、不良反应发生情况,以及治疗前后肝纤维化、肝功能指标。结果观察组治疗总有效率(84.0%,42/50)高于对照组(66.0%,33/50),治疗后Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白、天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶、总胆红素、碱性磷酸酶水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应发生率6.0%(3/50),对照组4.0%(2/50),差异无统计学意义(P>0.05)。结论红花清肝十三味丸辅助治疗乙型肝炎肝硬化,可提高疗效,抑制肝纤维化,促进肝功能恢复,且未明显增加不良反应发生风险。

蒙药红花清肝十三味丸治疗酒精性肝损伤的临床观察

目的:研究蒙药红花清肝十三味丸治疗酒精性肝损伤的治疗效果。方法:选取2022年1月—2023年12月,于我院门诊部就诊的30例酒精性肝损伤患者,予红花清肝十三味丸口服,于治疗前、治疗后,比较肝功能、消化不良、右上腹痛等蒙医证候积分,观察临床疗效。结果:红花清肝十三味丸治疗酒精性肝损伤总有效率为93.33%(28/30)。治疗前ALT、AST及蒙医证候积分与治疗后比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:红花清肝十三味丸可有效改善肝功能,减轻酒精性肝损伤患者症状,临床疗效显著。

反相高效液相色谱法测定红花清肝十三味丸中羟基红花黄色素A的含量

目的:建立红花清肝十三味丸中羟基红花黄色素A的含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.18%乙酸溶液(20:80),检测波长为403 nm,流速为1.0 mL·min^(-1)。结果:羟基红花黄色素A在0.168～16.8μg范围内具有良好的线性关系,r=0.999 9,平均加样回收率为99.76%,RSD为0。6%。结论:本方法快速、准确,重复性好,可用于红花清肝十三味丸中羟基红花黄色素A的含量测定。

红花清肝十三味丸质量标准研究

目的建立红花清肝十三味丸的质量标准。方法采用薄层色谱法对红花、丁香、木香、诃子、栀子、紫檀香、人工牛黄进行定性鉴别,并采用HPLC法测定栀子中栀子苷、红花中羟基红花黄色素A、丁香中丁香酚。结果薄层色谱斑点清晰;栀子苷在0.106 5～2.236 5μg范围内呈良好的线性关系(r=1.000 0),平均回收率为97.24%,RSD为1.2%;羟基红花黄色素A在0.064 66～0.775 89μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为96.75%,RSD为2.0%;丁香酚在0.227 8～4.783 8μg范围内呈良好的线性关系(r=1.000 0),平均回收率为98.56%,RSD为1.8%。结论该方法简便易行,重复性好,可用于红花清肝十三味丸的质量控制。

蒙药红花清肝十三味丸中丁香酚含量的测定方法研究

目的:建立内在质量监控指标,提高药品质量标准。方法:采用气相色谱法测定丁香酚的含量。结果:丁香酚在40ng～400ng范围内呈良好线性关系,回归方程Y=1387.6X-2812.2 R=0.9995,平均回收率为99.78%,RSD为0.62%。结论:该方法简便、灵敏、准确,可用于红花清肝十三味丸的内在质量监控。

蒙药红花清肝十三味丸

红花清肝十三味丸是蒙医传统用药。作者以不同的检索词,从2016年6月起追溯至无文献报道为止,全面系统地论述了红花清肝十三味丸的组方、功能与主治、安全性研究、临床应用等研究情况,以求指导并推进蒙药红花清肝十三味丸的广泛应用。

红花清肝13味丸研究进展

对蒙药红花清肝13味丸的传统应用及其近年来相关化学成分、药理作用、剂型改进、质量控制等现代研究进展进行了文献综述,为该蒙药的进一步研究、推广及开发应用提供参考。

蒙药红花清肝十三味丸联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎的临床观察

目的:临床观察蒙药红花清肝十三味丸联合恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎48周的疗效。方法:70例患者随机分为观察组与对照组,观察组和对照组均给予恩替卡韦0.5mg,口服,1次/d,观察组另外加用蒙药红花清肝十三味丸15粒,2次/d。结果:治疗6个月、12个月时HBV-DNA数值及转阴率,血清ALT复常率与对照组比较,统计学有明显的差异。结论:蒙药红花清肝十三味丸联合恩替卡韦能有效抑制乙肝病毒复制,促进乙肝患者恢复,安全性好。

揿针埋针联合红花清肝十三味丸治疗早期麦粒肿患者的临床疗效

目的探索揿针埋针联合红花清肝十三味丸治疗早期麦粒肿患者的临床疗效。方法选取2017年7月至2019年6月本院收治的126例早期麦粒肿患者作为研究对象,采用区组随机化法分为参照组和实验组,各63例。参照组接受常规抗感染治疗,实验组在参照组基础上并行揿针埋针联合红花清肝十三味丸治疗,比较两组治疗前后主观症状积分、首发非接触泪膜破裂时间(nonin-vasivefirstbreak-uptime,NIKF-BUT)、平均泪膜破裂时间(noninvasive averagebreak-uptime,NIKav-BUT)及临床疗效。结果治疗7、14 d后,两组主观症状积分均下降,且实验组低于参照组(P<0.05);两组NIKF-BUT和NIKav-BUT水平均延长,且实验组长于参照组(P<0.05);实验组治疗总有效率为96.83%,显著高于参照组的80.95%(P<0.05)。结论揿针埋针联合红花清肝十三味丸治疗早期麦粒肿效果显著,能有效改善患者临床症状,消除肿痛,延长泪膜破裂时间。

红花清肝十三味丸治疗瘀胆型肝炎60例

目的探讨红花清肝十三味丸治疗瘀胆型肝炎的治疗方法。方法将瘀胆型肝炎90例随机分为两组,治疗组60例用红花清肝十三味丸,每次1g,3次/d,对照组30例用肝泰乐,10mg/次,3次/d。结果治疗组总有效率86.67%,对照组总有效率为70%,治疗组疗效明显优于对照组(P<0.01)。结论红花清肝十三味丸治疗瘀胆型肝炎效果良好,不良反应少,值得临床推广。

蒙药红花清肝13味丸治疗肝纤维化大鼠的实验研究

目的:观察蒙药红花清肝13味丸治疗肝纤维化的作用。方法:采用四氯化碳花生油皮下注射结合高脂饲料、酒水饮料复合因素诱导大鼠肝纤维化模型,以大黄虫丸为对照组,观察蒙药红花清肝13味丸对肝功能、肝组织病理形态学的影响。结果:蒙药红花清肝13味丸可显著改善肝纤维化大鼠的肝功能,明显减轻肝细胞损害、肝脏胶原纤维增生的程度。结论:蒙药红花清肝13味丸有显著减轻实验性肝纤维化程度的作用。

蒙药红花清肝十三味丸研究进展

红花清肝十三味丸是蒙医惯用的蒙药之一。通过文献论述红花清肝十三味丸的组方、质量标准、临床应用概况,力求为红花清肝十三味丸的进一步临床推广应用提供理论指导。

HPLC法测定蒙药红花清肝十三味丸(HHQG)的胆红素含量

目的:HPLC法测定蒙药红花清肝十三味丸(HHQG)的胆红素含量。方法:色谱柱C18(4.6 mm×200 mm,5μm);流动相甲醇-乙腈-1%冰乙酸(88∶10∶2);流速1 mL·min^-1;测定波长453 nm。结果:胆红素0.0118~0.472μg成线性关系(r=0.999);胆红素平均质量分数0.104 mg·g^-1。结论:本法测定胆红素的含量,操作简便,准确可靠,可用于药品的质量控制。

蒙药红花清肝十三味丸的基础研究

文章分析红花清肝十三味丸的基础研究进展,包括药理作用与质量标准,并提出研究方向。

蒙药红花清肝十三味丸治疗病毒性乙型肝炎的临床效果

目的:评价病毒性乙型肝炎采用蒙药红花清肝十三味丸治疗的效果。方法:选取2020年1—12月我院收治的120例病毒性乙型肝炎患者作为研究对象,随机分为对照组和观察组,各60例。对照组采用刺五加注射液治疗,观察组采用蒙药红花清肝十三味丸治疗。对两组治疗效果进行比对分析。结果:观察组治疗总有效率(96.67%,58/60)高于对照组(80.00%,48/60),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:病毒性乙型肝炎采用蒙药红花清肝十三味丸进行治疗能够提高治疗效率,对康复产生促进作用。