美洲红点鲑不同授精方法的对比试验

本试验通过对比美洲红点鲑不同人工授精方法,筛选出符合生产的最佳方式,从而提高美洲红点鲑鱼的受精率和发眼率,扩大发眼卵生产规模。试验表明,采用同步干导授精法受精率最高,为84.21%。试验可供相关从业者参考。美洲红点鲑(Salvelinus fontinalis)属于鲑科红点鲑属,一个优良的鲑鳟鱼养殖品种,其生长速度比虹鳟快20%~30%,抗病力强,成活率高,其味道鲜美,刺少肉细,口感滑嫩。

美洲红点鲑和白斑红点鲑及其杂交子代幼鱼的生长曲线拟合

自2011年11月至2013年1月,对美洲红点鲑(Salvelinus fominalis)和白斑红点鲑(Salvelinus leucomaenis)及其杂交子代从受精卵到1年零两个月幼鱼的生长特性进行了研究。以美洲红点鲑和白斑红点鲑为亲本,建立2×2双列杂交组合,采用Logistic、Gompertz和Von Bertalanffy 3种动物生长模型对美洲红点鲑(A)和白斑红点鲑(B)及其杂交子代进行生长曲线拟合并分析比较其生长性能。实验设置自交组AA、BB和杂交组AB(A♀×B♂)、BA(B♀×A♂)4个实验组。根据模型拟合的R2值判断各组生长性能的拟合程度,并对其体质量、体长、成活率及肥满度进行比较。结果发现,Gompertz生长模型的拟合效果最好,R2均大于0.99,其中AB组生长优势明显。成活率由高到低依次为:AA、AB、BA、BB,但AA组与其他3组的成活率差异不显著(P>0.05)。增重率(g/d)和肥满度(g/cm3)等生长指标均由高到低依次为:AB、AA、BA、BB,各组间差异显著(P<0.05)。研究结果显示,正交子代(A♀×B♂)幼鱼生长性能明显高于反交子代(B♀×A♂)及其亲本,可见此杂交组合可能具有较高的推广潜力。

鸭绿江花羔红点鲑的生长模型和生活史类型研究

用特殊ＶＢＧＦ生长模型对鸭绿江花羔红点鲑（Ｓ．ｍａｌｍａ）的生长进行拟合。经检验表明：特殊ＶＢＧＦ生长模型可较好地反映鸭绿江花羔红点鲑的生长过程及其变化规律。应用ｒｋ选择型理论，根据主要生态学参数判断出鸭绿江花羔红点鲑的生活史类型属ｒ选择型。

3种养殖模式下北极红点鲑肌肉营养成分分析与评价

为了评价循环水模式(工厂化)、半流水模式(池塘)和全流水模式(山泉全流水)3种养殖模式下北极红点鲑的肌肉营养成分,对3种养殖模式下2龄北极红点鲑(体质量平均为764.29～831.22 g)肌肉营养成分进行了测定。结果表明:常规营养成分中,全流水模式下北极红点鲑肌肉的水分(74.06%)、灰分(1.34%)和粗蛋白质(21.34%)含量最高;3种养殖模式下北极红点鲑肌肉中均测出18种氨基酸,氨基酸酸总量为54.92%～73.36%,必需氨基酸指数(EAAI)依次为半流水模式(81.20%)>循环水模式(80.47%)>全流水模式(80.42%),其中赖氨酸含量均最高,第一限制氨基酸均为蛋氨酸+胱氨酸;肌肉脂肪酸种类与含量在各模式下有所不同,循环水养殖的脂肪酸种类、饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸和EPA+DHA总量最高,全流水模式的多不饱和脂肪酸总量最高;肌肉微量元素中,全流水模式下锌元素含量最高(4.21 mg/kg),循环水模式下铁元素含量(6.90 mg/kg)最高。研究表明,无论哪种模式养殖的北极红点鲑均是一种高蛋白质、脂肪酸和矿物元素的鱼类,3种模式下全流水模式的氨基酸总量最高,循环水模式的脂肪酸含量尤其是EPA+DHA含量最高。

水温和体重对白斑红点鲑临界游泳速度和游动耗氧率的影响

为了揭示水温和体重对白斑红点鲑(Salvelinus leucomaenis)临界游泳速度和游动耗氧率的影响,利用试验生态学方法测定了不同体重(1龄组、2龄组和3龄组)的白斑红点鲑在4、8、12、16、20和24℃共6个水温的临界游泳速度和游泳耗氧率。结果表明:水温和体重对临界游泳速度的单独效应均显著(P<0.05),但水温和体重交互作用效应却不显著(P>0.05),在相同水温下白斑红点鲑临界游泳速度均随着年龄的增长(体重增加)而增加。水温4℃时3个年龄组白斑红点鲑临界游泳速度均最低,分别为(21.6±1.06)、(22.93±0.61)和(30.27±1.29)cm/s,随着水温的升高临界游泳速度均不断增加,当水温升高到16℃时临界游泳速度达到最大值,分别为(39.6±0.80)、(46.80±0.80)和(53.73±1.22)cm/s,此后随着水温进一步升高到20℃,临界游泳速度虽出现略微降低,但经统计分析16℃和20℃时临界游泳速度无显著性差异(P>0.05),当水温达到24℃时却出现明显降低。水温和流速以及二者的交互作用对游泳耗氧率的影响均达到显著水平(P<0.05),白斑红点鲑在适宜的相同水温和流速时体重越大其游泳耗氧率越低,整体观察3个年龄组白斑红点鲑鲑游泳耗氧率均随着水温和流速的增高而增高,但当水温和流速升高到一定值游泳耗氧率却出现降低。研究得出体重较大的个体在相同水温下抵抗水流的游泳能力较强,3个年龄组白斑红点鲑适宜的最高水温不应超过20℃,最高流速依次不应超过32、40和48 cm/s。

白斑红点鲑人工繁殖

于2007年至2009年,对白斑红点鲑进行了人工繁殖、胚胎发育和苗种驯化的研究。结果表明：白斑红点鲑在水温低于18℃水泥池中培育,3龄性腺发育成熟,亲鱼每年产卵均在水温降低至10℃时,且产卵时间比较一致,繁殖期雌雄性亲鱼形态区别明显,经统计4龄亲鱼怀卵量、受精率和孵化率均优于3龄亲鱼;白斑红点鲑受精卵为橙黄色沉性卵,具有卵膜较厚卵黄含量多,胚盘较小等特点,受精卵在水温4.56~8.17℃条件下,积温达到429.29℃.d开始孵化出膜,积温达到729.38℃.d开始摄食,此时卵黄囊吸收到1/2,苗种经过5个驯化阶段历时49 d,完成人工驯化,白斑红点鲑人工繁殖技术研究为人工养殖打下坚实技术基础。

美洲红点鲑溃烂病的病原菌研究

对从患病美洲红点鲑(Salvelinus fontinalis)体表患病部位和肾脏分离到菌株进行了鉴定及药物筛选。结果显示:人工感染试验证实为病原菌,该菌革兰氏染色阴性,菌体呈短杆状。综合该菌形态、生理生化分析结果初步鉴定两株菌均为杀鲑气单胞菌(American salvelinus)杀鲑亚种。用引物AP1和AP2对纯化后的细菌进行PCR扩增,结果扩增出长度为550 bp的DNA片段,对扩增片段进行测序,用NCBI BLAST在GenBank中搜寻相似序列,结果与杀鲑气单胞菌各株A层蛋白部分编码基因有99%以上的序列同源性。进一步证明了鉴定结果。该菌对强力霉素、左氟沙星、氟罗沙星、庆大霉素等13种药物均敏感。

白斑红点鲑(Salvelinus leucomaenis)形态性状对体重影响效果

采用相关分析、通径分析和多元线性回归分析方法,分析了不同年龄组白斑红点鲑(Salvelinus leucomaenis)形态性状对体重的影响效果。统计分析表明:1龄组保留了对体重影响极显著的4个性状,其对体重的决定程度由大到小依次为体高>体长>尾柄长>吻长,4个性状与体重的相关指数高达0.915,充分说明保留的性状是影响体重的主要形态性状;2龄组保留了体长和体高,体长高于体高对体重的决定程度,2个性状与体重的相关指数最高为0.99;3龄组保留了全长、体长、体高和吻长,对体重的决定程度由大到小依次为体高>全长>体长>吻长,4个性状与体重的相关指数高达0.936。同时以体重为依变量(y),形态性状为自变量(x),分别建立了3个年龄组的最优多元回归方程,并且详细的分析了不同年龄组间的差异,该研究可为白斑红点鲑的选择育种提供坚实的理论依据。

人工养殖的哲罗鱼、白点鲑和美洲红点鲑血液指标

为掌握哲罗鱼、白点鲑和美洲红点鲑血液学原始数据,测定了哲罗鱼、白点鲑和美洲红点鲑血液生理、生化指标,以及在5.75/S,9.6/S、11.5/S、23.0/S、46.0/S、115.0/S、230.0/S7个切变率(γ)全血粘度和230/S切变率血浆粘度;将3种鱼在不同切变率下的全血黏度拟合成逆函数回归曲线,其全血质量分数都呈典型幂函数变化,其曲线回归方程分别为:哲罗鱼y=12.328x-0.1353,R2=0.9917;白点鲑y=7.8942x-0.1046,R2=0.9979;y=7.5059x-0.1062,R2=0.9931。统计分析表明:3种鱼Fb值呈显著性差异P<0.05;Tp差异不显著(P>0.05),但存在大小关系:白点鲑>美洲红点鲑>哲罗鱼;红细胞聚集性指数(A1、A2)相互之间差异不显著(P>0.05),白点鲑与美洲红点鲑之间红细胞刚性系数差异不显著(P>0.05),均与哲罗鱼呈显著性差异(P<0.05)。

美洲红点鲑血液生理生化指标和流变学性质的研究

首次测定美洲红点鲑血液生理、生化指标,同时测定5.75s-1,9.60s-1,11.50s-1,23s-1,46.0s-1,115.0s-1,230.0 s-1 7个切变率全血粘度和230s-1切变率测定血浆粘度。并统计分析生理和生化指标与全血粘度关系,结果表明影响全血粘度主要因子为血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)、血清总蛋白(Tp)、血清白蛋白(Ap)、血清胆固醇(Cho),而影响血浆粘度的主要因子是红细胞压积(HCT)。

白斑红点鲑幼鱼对几种常见药物耐受性试验

采用改良的Karber法,求出拜净、硫酸铜、甲醛和食盐对于白斑红点鲑幼鱼,全长(8.7±0.3)cm,24、48、72和96 h的LC50值和安全浓度(SC)。结果表明,4种药物对白斑红点鲑幼鱼的敏感性为:拜净>硫酸铜>甲醛>食盐,安全浓度依次为0.32、0.54、18.86和2 423.65 mg.L-1;24 h的半致死浓度依次为1.39、3.59、146.31和13 412.14 mg.L-1;48 h的半致死浓度依次为1.21、2.67、108.35和10 087.46 mg.L-1;72 h的半致死浓度依次为1.01、2.45、89.52和9 939.32 mg.L-1。试验结果表明,甲醛和食盐对于白斑红点鲑幼鱼是比较理想的日常病害防治药物,且食盐具有净化水质、辅助治疗、刺激食欲等作用。

温度对北极红点鲑生长及非特异性免疫指标的影响

为研究温度对北极红点鲑生长和非特异性免疫指标的影响,设置10,13,16,19℃4个温度梯度,选取1龄北极红点鲑（161.7±2.59）g,经过42 d的养殖试验,结果表明：温度对体重增长率影响极显著（P〈0.01）,温度为16℃时体重最大,19℃时体重最小;对摄食率影响不显著（P〉0.05）;对饵料系数影响显著（P〈0.05）。16℃时体重增长率和饵料利用率最高,19℃时最低。温度对SOD、MDA、CAT、AKP、ACP等非特异性免疫指标的影响均为极显著（P〈0.01）,13~16℃非特异性免疫机能能较好的发挥作用,19℃时非特异性免疫机能降低。说明北极红点鲑的适宜养殖温度为16℃左右,最好控制在19℃以下。

红点鲑属鱼类资源现状及保护利用

本文综述了国内外红点鲑属鱼类的种类、资源及其发展利用现状 。

花羔红点鲑和白斑红点鲑肌肉营养成分分析

测定了花羔红点鲑(Salvelinusmalma)和白斑红点鲑(S.leucomaenis)的肌肉营养成分,并对其进行比较。结果显示:(1)花羔红点鲑肌肉的蛋白质含量、脂肪含量均显著高于白斑红点鲑(P<0.05),而其灰分含量值则低于白斑红点鲑,但其差异并不显著(P>0.05);(2)花羔红点鲑在氨基酸总量、必需氨基酸含量和非必需氨基酸含量上显著高于白斑红点鲑(P<0.05),但两者在鲜味氨基酸含量上差异并不显著(P>0.05);(3)肌肉营养品质评价结果表明,花羔红点鲑肌肉必需氨基酸指数EAAI(70.44)明显高于白斑红点鲑(63.67)。研究结果表明作为土著品种的花羔红点鲑的肌肉营养价值要明显优于引进品种白斑红点鲑。

美洲红点鲑、白斑红点鲑及杂交后代遗传分析

以美洲红点鲑和白斑红点鲑双列杂交F1及其自交形成的4个群体为试验材料,利用7对微卫星引物分析遗传结构。结果表明,7对引物均表现良好多态性,可作4个群体遗传结构分析;各组合PIC平均值0.5079~0.6467,属高度多态性;有效等位基因数4.3688~5.5764;平均观测杂合度0.6857~0.7143,平均期望观测杂合度0.6290~0.8234,杂交组中杂合度高于双亲,均显示子代高遗传变异水平;4个群体中,美洲红点鲑纯繁群体（AA）和美白杂交群体（AB）间遗传距离最大（0.757343）,最小遗传距离（0.366335）。UPGMA系统树显示,美白杂交群体（AB）和白美杂交群体（BA）亲缘关系最近,与白斑红点鲑纯繁群体（BB）聚为一类,达到改良目的,为分子标记辅助选育奠定基础。

引进美洲红点鲑群体遗传多样性微卫星的分析

为了解引进种美洲红点鲑种群遗传结构和种质资源现状,本研究利用15个微卫星标记对其养殖群体遗传多样性进行了分析。结果表明:在30个个体中,15对微卫星引物除1对扩增产物为单态外,其余14对在美洲红点鲑群体内扩增均出现了多态,14个多态性位点等位基因数目为3～7不等,共检测到等位基因数为69个,平均有效等位基因数为3.03;期望杂合度在0.540～0.809之间,平均期望杂合度为0.664;多态信息含量在0.360～0.719之间,平均多态信息含量为0.578,表明引进的美洲红点鲑遗传多样性水平较高,具有良好的选育潜力,可以作为良好的育种材料。

温度对北极红点鲑体成分和消化酶活力指标的影响

为研究温度对北极红点鲑体成分和消化酶指标的影响,设置10,13,16,19℃4个温度梯度,选取1龄北极红点鲑(161.7±12.94)g,经过42 d的养殖试验,结果表明:温度对北极红点鲑体成分影响显著(P<0.05),以16℃为转折点,水分随温度升高先降低后升高,粗蛋白质、粗脂肪和灰分随温度升高先升高后降低;温度对肝胰脏和肠道主要消化酶指标影响显著(P<0.05),其中胃蛋白酶、胰蛋白酶和脂肪酶活力在肝胰脏和肠道中变化趋势一致,胃蛋白酶活力和脂肪酶活力随温度升高而降低,胰蛋白酶活力随温度升高而升高。肝胰脏中淀粉酶活力随温度升高而升高,在肠道中随温度升高而降低;肠道中消化酶活力高于肝胰脏中消化酶活力。结果显示,温度对体成分和消化酶活力均有显著影响,16℃时肌肉品质最好,温度对不同消化酶的影响不同。

白斑红点鲑Salvelinus leucomaenis和美洲红点鲑Salvelinus fontinalis的分子鉴定

利用虹鳟Oncorhyncus mykiss的引物,采用PCR及胶回收测序的方法找到一种高效区分白斑红点鲑Salvelinus leucomaenis和美洲红点鲑Salvelinus fontinalis的简单、快速、可靠的分子鉴定方法。采用该方法对无直接亲缘关系的白斑红点鲑、美洲红点鲑和虹鳟进行鉴定,结果发现:AF346686引物扩增的分子标记可以准确迅速地鉴别白斑红点鲑、美洲红点鲑和虹鳟。

利用虹鳟微卫星标记评价白斑红点鲑养殖群体的遗传结构

本实验筛选出30个虹鳟Oncorhynchus mykiss微卫星标记在白斑红点鲑Salvelinus leucomaenis养殖群体中表现出多态性,并利用这30个标记来评价白斑红点鲑养殖群体的遗传结构。在随机采样的32个个体中共检测到143个等位基因,片段大小为106-454bp,标记的等位基因数（No）为2-11个,有效等位基因数（Ne）为1.135-7.161个,观测杂合度（Ho）为0.094-1.000,期望杂合度（He）为0.121-0.874,多态信息含量（PIC）为0.116-0.846。群体的5项遗传多样性参数平均值分别为4.767、3.006、0.423、0.568,及0.524。统计结果显示：白斑红点鲑养殖群体处于高度多态水平（PIC=0.524≥0.5）。经χ-2检验估计Hardy-Weinberg平衡,结果表明白斑红点鲑群体处于平衡状态,仅11个微卫星标记显著偏离了遗传平衡,其中OMM1112、OMM1130和OMM1231等6个标记表现为杂合子显著缺失（P〈0.05）,而OMM3006、OMM3044和OMM3144等5个标记表现为杂合子显著过剩（P〈0.05）。本实验从近缘种中鉴定可用于白斑红点鲑遗传分析的共显性标记,评估白斑红点鲑种质的遗传多样性,为该引进种种质的保护和持续利用提供参考。