瑞芬太尼、舒芬太尼和芬太尼对蟾蜍上腭纤毛摆动频率的影响

目的:对比瑞芬太尼、舒芬太尼和芬太尼对蟾蜍上腭纤毛摆动频率(CBF)的影响。方法:取30只中华大蟾蜍,每只在显微镜下从上腭黏膜分离出一个约2mm×2mm的黏膜块,随机分为瑞芬太尼组、舒芬太尼组和芬太尼组。生理盐水稀释瑞芬太尼、舒芬太尼和芬太尼,终浓度分别为4,0.5,2μg/L,每个黏膜块在浸入药液前及浸入后5,30和60min时,使用相差显微镜及成像分析技术测量纤毛上皮的CBF。结果:舒芬太尼组和芬太尼组CBF在各时间点与基础值比较均无显著差异(P>0.05);瑞芬太尼组CBF在各时间点与基础值比较明显降低(P<0.05)。各组CBF基础值无显著差异(P>0.05);在其他时间点,瑞芬太尼组CBF较舒芬太尼和芬太尼组明显降低(P<0.05)。结论:瑞芬太尼降低蟾蜍上腭纤毛摆动频率,舒芬太尼和芬太尼则没有影响。

气道纤毛摆动调节和钙离子通道

气道粘液-纤毛转运系统对维护气道的防御功能有重要意义,它主要通过纤毛的摆动,将粘附于粘液层的异物颗粒和病原微生物由肺部排向咽部,继而被吞咽或被咯出得以排出体外.

ATP对人鼻腔纤毛摆动频率的影响

目的观察不同浓度三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）对体外培养人鼻腔纤毛运动的影响。方法采用组织块培养法，应用高速数字化显微成像系统观察1umol／L、10umol／L和100umol／LATP对人鼻腔纤毛摆动频率（ciliary beat frequency，CBF）的影响。结果①Hanks平衡盐溶液（Hanks balanced salts solution，HBSS）对CBF无明显影响。②1umol／LATP使CBF由（9．2±1．8）Hz升至（10．3±2．0）Hz（n=10）（P〈0．05）。10umol／LATP使CBF由（9．5±1．7）Hz升至（11．5±2．0）Hz（n=10）（P〈0．05）。③100umol／LATP使CBF由（8．7±1．1）Hz升至（11．5±1．4）Hz（n=10）（P〈0．05）。结论ATP可刺激体外培养人鼻腔纤毛摆动频率升高，在1～100umol／L范围内，ATP对CBF的刺激呈浓度依赖性。

阿片类镇痛药对离体兔气管上皮纤毛摆动频率的影响

目的观察阿片类麻醉性镇痛药对离体兔气管上皮纤毛摆动频率(CBF)的影响。方法新西兰白兔30只,用剥离法获得气管黏膜上皮组织4块/只(0.5mm2)进行体外培养,将每只白兔的4块组织随机分为A、B、C、D4组:0.9%氯化钠溶液、阿片药物临床用药浓度×1/10、临床用药浓度、临床用药浓度×10,120块组织随机加入以上浓度的4种溶液中,分别测量用药前,用药后20、40、60min纤毛摆动频率(CBF)。利用相差显微镜观测标本,测量纤毛摆动频率(CBF)。结果与0.9%氯化钠溶液组比较,只有临床用药浓度及10倍临床用药浓度的瑞芬太尼在用药后20min时,CBF降低(P<0.05)。芬太尼、舒芬太尼的3种浓度的4个时点及瑞芬太尼用药后60min CBF的变化差异无统计学意义(P>0.05)。应用瑞芬太尼20min时,临床用药浓度×10较临床用药浓度的CBF变化差异有统计学意义(P<0.05)。结论瑞芬太尼临床用药浓度可以降低离体兔气管上皮纤毛摆动频率,其作用随瑞芬太尼浓度的增加而加大。舒芬太尼、芬太尼对离体兔气管纤毛摆动频率无影响。

丙泊酚对蟾蜍上腭纤毛摆动频率的影响

目的 了解丙泊酚对蟾蜍上腭纤毛摆动频率 (CBF)的影响。方法 取 30只中华大蟾蜍 ,每只在显微镜下将上腭粘膜分离成多个约 2mm× 2mm大小粘膜块 ,并分为四组 ,生理盐水稀释丙泊酚 ,终浓度分别为 0 0 1、1、10和 2 0 μg/ml,每组粘膜块随机加入一种浓度丙泊酚。在加入前、及加入后 5、30和 6 0min ,使用相差显微镜及成像分析技术测量纤毛上皮的CBF。结果 0 0 1μg/ml组及 1μg/ml组 ,CBF在各时间点与基础值比均无显著差异 (P >0 0 5 ) ;10 μg/ml组和 2 0 μg/ml组 ,CBF在各时间点与基础值比 ,有显著差异 (P <0 0 5 )。各组间的CBF基础值无显著差异 (P >0 0 5 ) ;在其他时间点比较 ,丙泊酚浓度增加 ,CBF也增加 ;组间有显著差异 (P <0 0 5 )。结论 丙泊酚增加蟾蜍上腭纤毛摆动频率。

基于COM的呼吸道纤毛摆动频率测量软件开发

纤毛摆动频率是准确评估纤毛运动状况的一项重要参数,为实现纤毛摆动频率测量过程的全自动化,设计并开发了基于COM的呼吸道纤毛摆动频率的测量软件。将纤毛摆动频率的精确测量方法和Visual Basic友好的界面结合在一起;使用COM和ACTIVEX客户端技术开发一个独立运行的应用程序获取用户的输入指令,经过和OLE服务器之间的通讯,获取服务器的数据处理结果并返回给用户;软件还提供曲线图表绘制及其它辅助功能以方便用户对测量结果进行分析。实现了对纤毛摆动频率的全自动化精确测量。

米非司酮对人输卵管上皮纤毛摆动频率及雌、孕激素受体的影响

目的·探讨米非司酮在体外对人输卵管上皮纤毛摆动(CBF)及雌、孕激素受体表达的影响。方法·将25例人输卵管上皮组织在体外经米非司酮(0.1、1、10μmol/L)、孕酮10μmol/L、米非司酮(0.1、1、10μmol/L)+孕酮10μmol/L分别培养24 h后(另设空白对照组),测得CBF值;应用实时荧光定量PCR和免疫组织化学技术分析经米非司酮处理后人输卵管上雌激素受体α(ERα)和孕激素受体(PR)的变化;透射电子显微镜观察10μmol/L米非司酮对人输卵管上皮超微结构的影响。结果·与空白对照组相比,米非司酮在0.1、1、10μmol/L浓度时对输卵管CBF无显著影响(P=0.728,P=0.405,P=0.941);孕酮10μmol/L组CBF明显下降(P=0.000),米非司酮在0.1、1、10μmol/L浓度时,呈剂量-反应拮抗孕酮下调CBF的效应(P=0.484,P=0.000,P=0.000)。经米非司酮培养24 h后,输卵管上的ERα、PR表达上调;输卵管上皮纤毛超微结构与空白对照组比较,无明显差异。结论·米非司酮在人输卵管上发挥孕酮拮抗效应,这可能是这类常用口服紧急避孕药的输卵管避孕机制。

呼吸道上皮细胞培养模式与纤毛摆动频率的研究进展

呼吸道上皮细胞在呼吸疾病的发生发展中占有重要的地位,哺乳动物呼吸道上皮表面覆盖有纤毛,纤毛的摆动可以保护呼吸系统免于细菌、病毒以及其他致病因素的损害。因此纤毛摆动频率(CBF)的调控成为许多呼吸疾病发生发展的关键因素,可以用来研究呼吸道炎症、吸烟、感染、呼吸系统肿瘤等多种疾病。体外研究CBF的方法多是采用借助呼吸道上皮细胞培养以及活体呼吸道上皮分离等手段,但呼吸道上皮细胞的原代培养具有杂细胞多、不易分化纤毛等诸多问题。呼吸道上皮细胞的培养模式不断发展,本文简述了呼吸道上皮细胞主要的两种原代培养模式及各自的主要培养方法及改进发展情况,同时介绍并总结了呼吸道上皮细胞纤毛分化的鉴定及其摆动频率的检测,明确了各类培养模式对操作流程、培养周期、尤其是纤毛分化及摆动频率的影响,为在现有培养模式下改进技术得到能够诱导纤毛分化的有效培养方法奠定了基础。

异丙酚对离体气管纤毛摆动频率的影响

目的 观察异丙酚对离体气管上皮细胞纤毛摆动频率(CBF)的影响。方法 从8例喉癌病人气管造口手术中获取离体气管标本,每例标本分离出4块纤毛摆动活跃的组织块。生理盐水稀释异丙酚,终浓度分别为0.01、1、10、20μg·ml^(-1),组织块依上述浓度分为4组,每块标本随机加入一种浓度异丙酚,在加入前及加入后5、10和20min,使用相差显微镜及成像分析技术测量纤毛上皮的CBF。结果 0.01μg·ml^(-1)组及1μg·ml^(-1)组,CBF在各时间点与基础值比较差异均无显著性(P>0.05);10μg·ml^(-1)组和20μg·ml^(-1)组,CBF在各时间点与基础值比较,差异有显著性(P<0.05)。各组间的CBF基础值差异不显著(P>0.05);在其他时间点比较,异丙酚浓度增加,CBF也增加,组间差异有显著性(P<0.05)。结论 异丙酚增加离体气管上皮细胞纤毛摆动频率。

体外培养的人鼻腔黏膜纤毛的摆动频率

目的通过测量体外培养的人鼻腔纤毛上皮细胞的纤毛摆动频率(ciliray beat frequency,CBF),为人鼻腔黏液纤毛运输系统功能的研究提供理论依据。方法应用组织块培养法和高速数字化摄像系统,测量体外培养的人鼻腔钩突、下鼻甲黏膜的CBF。结果体外培养的正常鼻腔黏膜上皮细胞和鼻窦炎鼻腔黏膜上皮细胞的CBF,两者之间差异无统计学意义(t=0.419,P=0.678);测量来源相同体外培养的钩突和下鼻甲纤毛上皮细胞的CBF,两者的CBF是一致的,之间的差异无统计学意义(t=-0.087,P=0.931)。结论体外培养的鼻窦炎患者的鼻腔黏膜可代表正常人的鼻腔黏膜进行黏液纤毛运动的研究;钩突黏膜更容易获得,可代替下鼻甲黏膜进行体外培养。

鼻用糖皮质激素对大鼠鼻纤毛运动的影响评估

背景纤毛在气道防御机制中发挥着重要作用。由于观察技术和设备的限制,既往关于鼻用糖皮质激素对纤毛运动影响的研究主要是基于离体试验,尚无相关的在体动物研究。目的使用一种新的方法观察并比较鼻用糖皮质激素对在体与离体鼻黏膜纤毛运动的影响。方法60只大鼠随机分为在体观察组和离体观察组,每组又随机分为布地奈德、糠酸莫米松和丙酸氟替卡松3个亚组,各亚组均以磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)作为对照,每个试验组和对照组各5只大鼠。在体观察组将大鼠麻醉后立即手术暴露鼻中隔黏膜;离体观察组将大鼠过量麻醉后断头处死,取其鼻中隔黏膜放置于培养基中。两组皆放置于新型数码显微系统下观察鼻黏膜表面的纤毛运动情况,计算并比较60 min内在体与离体观察组大鼠鼻黏膜表面滴加药物前后纤毛摆动频率(ciliary beat frequency,CBF)的差异。结果在体观察组大鼠鼻黏膜的CBF显著高于离体观察组[(9.83±0.94)Hz vs(6.10±0.91)Hz,P<0.001]。在体观察发现,布地奈德、糠酸莫米松和丙酸氟替卡松在60 min内对大鼠鼻黏膜CBF无显著影响;而离体观察条件下,与PBS对照组相比,布地奈德使CBF即刻下降,在60 min内组间各时间点的CBF差异均有统计学意义(P<0.05);糠酸莫米松使CBF持续下降,且加药5 min后各时间点的CBF差异均有统计学意义(P<0.05);丙酸氟替卡松使CBF波动下降,且在0~5 min和20~60 min内各时间点的CBF差异均有统计学意义(P<0.05)。结论布地奈德、糠酸莫米松和丙酸氟替卡松对在体鼻黏膜的纤毛运动无显著影响,对离体鼻黏膜的纤毛运动均产生了不同程度的抑制作用,这表明鼻用糖皮质激素无显著的纤毛毒性,具有良好的安全性;同时本研究所使用的在体评估系统弥补了离体观察与机体真实环境差异较大的不足,可用于客观评价鼻用药物的安全性和纤毛毒性。

纤毛研究进展

纤毛广泛分布于人体多种类型细胞表面,是一种结构复杂、功能精细的细胞器,其基本结构包括轴丝和外被的纤毛膜。纤毛在机体各组织器官中发挥着重要的生理功能,其结构和功能异常会导致多种纤毛相关疾病的发生。根据微管的组成及排列方式不同,哺乳动物的轴丝主要表现为9+2和9+0两种类型。9+2纤毛多具有运动功能,而9+0纤毛则多呈静止状态,主要功能是感知环境中信号变化并协助信号转导至细胞内部。纤毛运动受Ca2+,胞内pH以及cAMP、cGMP、PKC等激酶依赖性蛋白磷酸化等多因素调控。深入了解纤毛的结构、功能及运动调控机制,对相关疾病的诊疗具有指导意义。

小鼠鼻腔及气管黏膜上皮细胞的构成和纤毛反应性比较研究

目的比较小鼠鼻腔及气管黏膜上皮细胞的构成以及纤毛摆动频率对外源性刺激的反应性。方法 采用酶消化法获取小鼠鼻腔及气管黏膜纤毛细胞,观察纤毛细胞的得率以及ATP和苯扎溴铵对纤毛摆动频率的影响;采用免疫组化染色及扫描电镜观察鼻腔及气管黏膜上皮的细胞构成。结果 ①培养细胞中小鼠鼻甲的纤毛细胞得率可达(45±5)%,气管组织仅有(15±5)%;②免疫组化染色鼻腔及气管黏膜上皮细胞均有乙酰化α-tubulin阳性表达,鼻腔的纤毛细胞层更连续,细胞更密集;③100μmol/LATP均能引起鼻甲及气管的纤毛摆动频率增加,增加率分别为235.06%和118.49%;0.005%苯扎溴铵均能使2个部位的纤毛摆动频率下降,降至原有频率的50.31%和8.27%。2组频率比较差异均有统计学意义,P值分别为0.013和0.004;④扫描电镜观察,鼻腔黏膜上皮中纤毛细胞的比例(90%)明显高于气管上皮纤毛细胞比例(30%～40%)。结论 小鼠鼻腔和气管黏膜上皮中纤毛细胞的比例存在明显差异;2个部位的纤毛摆动频率对外源性刺激的反应程度存在明显差异;从纤毛细胞的数量上看,鼻腔远远高于气管,其中鼻甲是个不容忽视的丰富资源。

功能性内镜鼻窦手术后鼻黏膜纤毛转归的研究

功能性内窥镜鼻窦外科手术(FESS)已经成为治疗慢性鼻窦炎的主要手术方法,但仍需要客观的、特别是量化的证据来证明FESS后鼻黏膜纤毛功能得到恢复。我们对近年来有关FESS后鼻黏膜组织形态学、鼻黏膜纤毛功能转归的研究报道作一综述。

鼻粘膜纤毛功能评价方法研究进展

本文回顾了近年来鼻粘膜纤毛清除功能。

第二信使对呼吸道纤毛上皮细胞调控

呼吸道纤毛运输系统在呼吸道免疫防御中起着非常重要的作用,纤毛运输能力主要是由纤毛摆动频率决定的,目前研究第二信使对纤毛摆动频率的调节机制已成为热点,本文对钙离子(Ca2+)、环腺苷酸(cAMP)、环鸟苷酸(cGMP)、三磷酸肌醇(IP3)对纤毛摆动的调控作用综述如下。

输卵管胚胎运输的调控机制研究进展

输卵管是连接子宫和卵巢的弯曲管状结构,负责将胚胎及时运输到子宫中。输卵管运输功能的紊乱导致胚胎滞留在输卵管中,被认为是造成异位妊娠的主要因素之一。因此,明确输卵管胚胎运输的调控机制具有重要意义。文章综述了纤毛的摆动、肌肉收缩、输卵管液的流动和胚胎的状态对输卵管胚胎运输的影响;此外重点阐述了类固醇激素、前列腺素、气体信号和大麻素对输卵管肌肉收缩的影响,以明确这些调控机制对阐明输卵管异位妊娠的发病机制,为相关研究奠定基础。

滴鼻免疫疫苗对SPF鸡气管功能影响的研究

为研究疫苗滴鼻免疫对鸡气管功能的影响,本研究对SPF鸡滴鼻免疫新城疫疫苗后气管纤毛摆动速率、气管形态结构和黏液分泌进行了研究。80只7日龄SPF鸡随机分为对照组和试验组,每组40只,试验组SPF鸡滴鼻免疫新城疫弱毒疫苗,对照组滴鼻生理盐水;于免疫后的第0、2、4和6天,每组每次随机剖杀10只鸡,应用红细胞示踪法测定气管纤毛摆动速率,采集气管制备石蜡组织切片进行HE和奥新蓝pH 2.5和pH 1.0染色。结果发现,疫苗免疫后的第0和2天试验组SPF鸡纤毛摆动速率较对照组升高,但差异不显著(P>0.05);滴鼻免疫后SPF鸡气管结构完整,无明显损伤;滴鼻免疫后试验组SPF鸡气管酸性黏液分布容积在免疫后的第0和2天显著高于对照组(P<0.05),而后明显降低,于免疫后的第6天又有所升高,但差异不显著(P>0.05);硫酸化黏液分布容积在免疫后的第0和2天显著升高(P<0.05),而后降低并与对照组相一致。结果表明,新城疫疫苗滴鼻免疫后前两天SPF鸡气管黏液分泌增多,而后恢复到正常水平,疫苗的免疫对气管形态结构和纤毛的摆动速率无明显影响。

气道纤毛功能及相关呼吸系统疾病研究进展

正常的黏液纤毛清除功能要求黏液具有最佳的黏弹性和厚度,而足够数量、结构完整和一定摆动频率的纤毛则更重要.由于慢性阻塞性肺疾病,原发性纤毛运动障碍、囊性纤维化等多种疾病均存在纤毛结构和功能异常或纤毛周围的黏液流变学特征改变,因此气道黏液纤毛清除功能成为探索相关治疗的新领域之一.本文就影响纤毛结构及运动的因素及相关的呼吸系统疾病的研究进展作综述.