纤维介素2在卵巢癌中的表达及其对SKOV3细胞生物学特性的影响

目的 探讨纤维介素2(FGL2)在上皮性卵巢癌中的表达情况及其对人卵巢癌SKOV3细胞生物学特性的影响及相关机制。方法 (1)取2018年7月—2020年5月在河北省人民医院行手术治疗的40例浆液性卵巢癌以及16例卵巢浆液性囊腺瘤患者的切除组织标本,免疫组化法检测组织标本中FGL2蛋白表达情况。(2)取SKOV3细胞,实验设空白组、FGL2 siRNA转染组和阴性对照siRNA组,采用Western blot法检测细胞中FGL2蛋白表达情况,以确定FGL2 siRNA转染效率;后续通过CCK-8法以及Transwell实验检测FGL2 siRNA转染组和阴性对照siRNA组SKOV3细胞增殖、侵袭及迁移能力,Western blot法检测细胞中白细胞介素-6(IL-6)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)蛋白表达情况,观察沉默FGL2对SKOV3细胞增殖、侵袭及迁移能力和IL-6/STAT3信号通路的影响。结果 浆液性卵巢癌患者组织标本中FGL2蛋白高表达率明显高于卵巢浆液性囊腺瘤患者[80.0%(32/40)比37.5%(6/16),P<0.05]。FGL2 siRNA转染组FGL2蛋白相对表达量明显低于阴性对照siRNA组(P<0.05);FGL2 siRNA转染组转染后48 h、72 h、96 h、120 h的SKOV3细胞增殖活性均明显低于同期阴性对照siRNA组(P均<0.05);Transwell加基质胶侵袭实验和不加基质胶迁移实验显示FGL2 siRNA转染组穿膜细胞数均明显少于阴性对照siRNA组(P均<0.05);FGL2 siRNA组IL-6和p-STAT3蛋白相对表达量均明显低于阴性对照siRNA组(P均<0.05)。结论 卵巢癌组织中存在FGL2高表达,沉默FGL2抑制IL-6/STAT3信号通路的活性可影响卵巢癌细胞的生物学特性,推测FGL2可作为卵巢癌诊治的靶点之一。

纤维介素蛋白2(FGL-2)在大鼠角膜移植排斥反应中的作用

目的研究纤维介素蛋白2(fibrinogen-like protein 2,FGL-2)在大鼠角膜移植排斥反应发生发展过程中的作用及糖皮质激素对其表达的影响。方法 60只成年雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组、自体角膜移植组、同种异体角膜移植组和糖皮质激素组。正常对照组大鼠未行任何手术,自体角膜移植组、同种异体角膜移植组及糖皮质激素组均行穿透性角膜移植术。术后裂隙灯显微镜下观察术眼角膜炎性反应情况,按照Larkin的标准进行排斥反应评分,计算排斥反应指数,并在术后9 d和14 d分别取眼球制备角膜组织切片,行组织病理学检查和免疫组织化学检测,观察角膜组织的炎性反应和FGL-2在角膜组织中的表达;采用实时荧光定量PCR法检测FGL-2 mRNA在大鼠角膜植片中的相对表达量。结果术后9 d内各组角膜植片均出现不同程度的水肿、混浊及新生血管生长。同种异体角膜移植组大鼠平均在角膜移植术后9.8 d发生排斥反应并获病理学支持;自体角膜移植组和糖皮质激素组大鼠术后排斥反应计分均未达到诊断标准。免疫组织化学结果显示,不同时间点同种异体角膜移植组炎性细胞明显多于自体角膜移植组和糖皮质激素组。术后3组手术干预组角膜FGL-2 mRNA的表达均增加,在术后9 d和14 d时同种异体角膜移植组均较自体角膜移植组和糖皮质激素组高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 FGL-2可能参与角膜移植免疫排斥反应,糖皮质激素可能通过降低其表达发挥抗排斥作用。

白细胞介素-22激活Nrf2通路对肝纤维化小鼠结肠屏障的影响

目的研究白细胞介素(IL)-22对肝纤维化小鼠结肠屏障的影响及与Nrf2通路的关系。方法将小鼠分为对照组(CON组)、模型组(MOD组)、IL-22组、IL-22+ML385组(ML385为Nrf2抑制剂),每组10只,造模周期为8周。除CON组外,其余各组均给予含乙醇的液体饲料及四氯化碳橄榄油腹腔注射;IL-22组在此基础上给予IL-22;IL-22+ML385组于IL-22处理前1 h腹腔注射ML385。造模结束,对肝脏进行苏木精-伊红(HE)、马松(Masson)染色,明确是否发生纤维化;收集小鼠粪便,检测球菌与杆菌的比值,观察肠道菌群生长情况;对结肠进行HE染色、免疫荧光和免疫组织化学检测,分析紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Nrf2通路蛋白(Nrf2、HO-1、NQO1)表达情况。结果与CON组比较,MOD组小鼠肝组织呈现明显纤维化、结肠组织出现炎细胞浸润、紧密连接蛋白表达下降(P<0.05),粪培养基未见各种致病菌过度生长,球杆比值无明显差异。与MOD组比较,IL-22组肝脏及结肠组织病理损伤均减轻,紧密连接蛋白表达升高,Nrf2、NQO1、HO-1表达水平亦升高(P<0.05),IL-22+ML385组无明显改变。结论IL-22可改善肝纤维化小鼠结肠屏障功能,其机制与Nrf2抗氧化应激通路激活有关。

白细胞介素-33/瘤变抑制因子2信号通路与心力衰竭心肌纤维化关系的研究进展

心力衰竭(heart failure,HF)是各种心血管疾病的终末阶段,具有较高的发病率与死亡率[1]。我国最新流行病学调查数据显示,HF患者患病率在年龄≥35岁人群中为1.3%(约1370万人),已成为重要的公共卫生问题,严重影响着我国居民健康。

阻断白介素-17对博来霉素诱导小鼠肺纤维化及肺组织Bax/Bcl-2表达的影响

目的:研究阻断白介素(interleukin,IL)-17对博来霉素诱导小鼠肺纤维化和肺组织Bax/Bcl-2表达的影响。方法:80只C57BL/6小鼠随机分为模型组、抗IL-17处理组、同型Ig G处理组和PBS处理组。小鼠气管内一次性注入博来霉素诱导肺纤维化形成,PBS处理组给予等量生理盐水。4组小鼠分别从造模前1 d每隔3 d通过尾静脉给予抗鼠IL-17单克隆中和抗体或同型对照抗体或PBS。在造模后28 d,取各组小鼠肺组织,利用Masson染色及羟脯氨酸含量测定检测各组小鼠肺纤维化程度,通过流式细胞术测定肺组织细胞凋亡情况,采用免疫组织化学法检测肺组织Bax和Bcl-2的表达。结果:阻断IL-17后,小鼠肺纤维化程度明显降低(P<0.01),羟脯氨酸含量显著下降(P<0.01),细胞凋亡率明显降低(P<0.01),Bax表达明显减弱(P<0.01),Bcl-2表达虽无明显变化,但Bax/Bcl-2比值显著下降(P<0.01)。结论:阻断内源性IL-17后,能显著降低博来霉素诱导的肺纤维化,显著降低肺组织细胞凋亡率和Bax/Bcl-2比值,这些数据提示阻断内源性IL-17活性改善博来霉素诱导的小鼠纤维化程度,可能与Bax/Bcl-2介导的线粒体细胞凋亡通路有关。

纤维介素2在慢性病毒性肝炎患者中的表达水平及临床意义

目的探讨可溶性纤维介素2(sFgl2)检测对预测慢性病毒性肝炎患者临床转归和预后的价值。方法采用ELISA法分别检测85例慢性肝炎患者(42例乙型肝炎和43例丙型肝炎)、108例肝硬化患者(35例乙型肝炎和73例丙型肝炎)及72例健康对照者外周血sFgl2的水平,并与Child-Pugh分级及肝功能指标进行Spearman相关性分析。结果血清sFgl2水平在肝硬化组显著高于非肝硬化组及健康对照组,且在肝硬化患者中,随Child-Pugh评分升高,外周血sFgl2水平逐渐升高。Spearman相关性分析显示,不考虑病原学,sFgl2水平与TBIL呈正相关,与ALB呈负相关。但与病毒载量、ALT或AST无相关性。结论证实了外周血sFgl2在肝硬化患者中明显升高,同时发现sFgl2水平与肝硬化患者Child-Pugh分级呈正相关,提示sFgl2水平与肝病严重程度相关,可能成为评估肝硬化患者预后的因素之一。

白介素-2、α-干扰素对人皮肤瘢痕组织成纤维细胞增殖的影响

目的观察白介素-2、α-干扰素对人皮肤瘢痕组织成纤维细胞增殖的影响。方法通过细胞培养的方法研究了瘢痕疙瘩和正常皮肤的成纤维细胞对白介素-2(200u/ml)和α-干扰素(100u/ml)的反应。结果白介素-2和α-干扰素抑制瘢痕疙瘩及正常皮肤成纤维细胞的生长。结论白介素-2和α-干扰素是瘢痕形成过程中的一种负性调节因子,有望在病理性瘢痕防治中发挥重要作用。

纤维介素蛋白2在小鼠自身免疫性肝炎中的作用分析

目的:探讨可溶性纤维介素蛋白2(soluble fgl2,sfgl2)在小鼠自身免疫性肝炎中的作用。方法:将S-100肝抗原与弗氏完全佐剂经腹腔注入到C57BL/6小鼠体内。通过肝脏病理改变和血清ALT和AST水平观察肝脏的损伤程度。用免疫组织化学方法检测肝脏和脾脏组织中纤维素介素蛋白2(fgl2)的表达;免疫印迹方法检测脾脏混合淋巴细胞培养的上清液和细胞中fgl2的表达;免疫组化双染检测小鼠肝脏中fgl2与纤维蛋白的表达,肝脏连续切片中用免疫组化法分别检测fgl2与纤维蛋白的表达。结果:ALT和AST明显升高,肝脏组织中可见大量炎性细胞浸润和坏死形成。免疫组化观测模型组肝脏非实质细胞和脾脏中有fgl2的明显高表达。Western-blot方法发现脾脏淋巴细胞培养的上清液中有fgl2的表达,而沉淀的细胞则没有;免疫组化双染观测到fgl2与纤维蛋白的沉积无关,在连续切片同一部位中,只有fgl2的表达而没有纤维蛋白的表达。结论:Sfgl2是由脾脏的T淋巴细胞所分泌的,在肝抗原诱导的自身免疫性肝炎小鼠模型中发挥了重要的作用。

纤维介素蛋白2凝血酶原酶在人肝癌细胞增殖和凋亡中的作用

目的:探讨纤维介素蛋白2凝血酶原酶(fibrinogen-like protein 2/fibroleukin,fgl2)在人肝癌(hepatocel-lular carcinoma,HCC)细胞系HCCLM6细胞的表达及在肿瘤生长中的作用。方法:用RT-PCR方法检测HCCLM6细胞在静息和细胞因子作用下fgl2mRNA水平的表达;用RNA干扰技术建立fgl2敲除的HCCLM6细胞模型;以流式细胞技术检测fgl2敲除后的HCCLM6细胞体外培养细胞周期和增殖指数的改变以及对TNF-α(肿瘤坏死因子-α)诱导凋亡的抵抗能力改变。结果:IFN-γ(干扰素-γ)、IL-1β(白介素-1β)和TNF-α均可在mRNA水平上调HCCLM6细胞fgl2的表达,以TNF-α诱导作用最为显著;fgl2干扰后HCCLM6细胞增殖指数显著降低,细胞周期分析S期比例显著下降;fgl2干扰对HCCLM6细胞在全培养基和无血清培养基中培养的凋亡率无显著影响,但在合并大剂量TNF-α诱导下,fgl2干扰可显著提高HCCLM6细胞的凋亡率。结论:炎性细胞因子可诱导HCCLM6细胞表达fgl2,fgl2的表达可直接促进肿瘤细胞的生长,并增强对TNF-α诱导凋亡的耐受。

人纤维介素蛋白2在昆虫杆状病毒系统中的表达及活性检测

目的:利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞(Sf9细胞)中表达人纤维介素蛋白2(hfgl2)凝血酶原酶并检测其蛋白活性。方法:首先将PCR扩增的目的基因hfgl2和pENTR/D-TOPO载体连接,再将pENTR/D-TOPO-hfgl2质粒与BaculoDirectTM线性DNA进行体外基因重组,采用脂质体转染法将重组DNA转染到生长良好的Sf9细胞中进行病毒包装,经过对重组杆状病毒三轮扩增后,用RT-PCR和Western blotting从基因和蛋白水平检测hfgl2表达情况,一期凝固试验检测其蛋白活性。结果:重组杆状病毒感染后,Sf9细胞停止生长,体积变大,细胞开始悬浮,破裂,呈现颗粒样外观。RT-PCR扩增和Western blotting从基因和蛋白水平证实Sf9细胞能够表达hfgl2,蛋白分子量约为63kDa。同时,在细胞上清液中检测到了可溶性hfgl2的表达,蛋白分子量约为50kDa。一期凝固试验证明表达的跨膜型hfgl2具有凝血活性。结论:hfgl2在昆虫杆状病毒表达系统中成功表达并具有生物学活性,为进一步研究hfgl2跨膜型以及可溶性蛋白功能提供了工具,亦可应用于开发重型肝炎蛋白芯片或ELISA诊断试剂盒。

2-羟丙基三甲基氯化铵脱乙酰壳多糖和碱性成纤维细胞生长因子对白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α的影响

目的观察在脂多糖(LPS)刺激下,2-羟丙基三甲基氯化铵脱乙酰壳多糖(HTCC)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)分泌白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的影响。方法在50mg·L-1的LPS刺激下,采用酶联免疫吸附测定观察质量浓度为1g·L-1的HTCC和100μg·L-1的bFGF对50mg·L-1的LPS刺激hPDLF分别于24、48和72h分泌IL-1β和TNF-α的质量浓度变化。结果1g·L-1的HTCC具有促进LPS刺激hPDLF分泌IL-1β和TNF-α的作用,分泌量48h达高峰。在100μg·L-1的bFGF的作用下,LPS介导的hPDLF分泌IL-1β和TNF-α的质量浓度明显下降。HTCC与bFGF联合较单独应用时,IL-1β和TNF-α的质量浓度下降显著(P≤0.001)。结论HTCC对LPS介导hPDLF分泌IL-1β和TNF-α具有促进作用,HTCC与bFGF联合应用能有效地抑制IL-1β和TNF-α的分泌。

中枢神经系统白血病脑脊液中白细胞介素2受体、铁蛋白和纤维结合蛋白的变化及其临床意义

目的探讨中枢神经系统白血病脑脊液中可溶性白细胞介素2受体、铁蛋白和纤维结合蛋白的变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法检测中枢神经系统白血病组(CNSL组),无中枢神经系统白血病组(无CNSL组)脑脊液中可溶性白细胞介素2受体、铁蛋白和纤维结合蛋白的变化。结果 CNSL组脑脊液中可溶性白细胞介素2受体、铁蛋白和纤维结合蛋白均高于无CNSL组和对照组,有显著性差异(p<0.05)。结论脑脊液中可溶性白细胞介素2受体、铁蛋白和纤维结合蛋白在中枢神经系统白血病的诊断中有重要意义,提示其联合检测对早期诊断中枢神经系统白血病有意义。

重组人白细胞介素2对成纤维细胞生物学行为的影响 浓度依赖性效应及配体受体学说

目的:观察重组人白细胞介素2对参与组织修复与瘢痕形成的效应细胞成纤维细胞增殖的影响,以及对细胞凋亡基因Fas和细胞凋亡抑制基因Bcl-2表达的影响。方法:实验于2003-01/05在昆明医学院第一附属医院临床医学实验研究中心完成。对5例瘢痕标本(患者知情同意)进行体外成纤维细胞培养,将培养的细胞分为实验组和对照组,每组设6个平行孔。实验组分别加入不同终浓度的的重组人白细胞介素2(100,250,500,750,1000U/mL)50μL;对照组加相同容积的无血清Dulbecco改良的Eagle培养基培养液。于培养24,48,72h观察成纤维细胞增殖情况采用四甲基偶氮唑盐测定各组吸光度(A)值,与对照组比较,A值越大表示细胞增殖越强;成纤维细胞DNA含量、Fas和Bcl-2表达情况应用流式细胞仪检测。结果:①体外培养的成纤维细胞增殖结果:实验组加入重组人白细胞介素2后72h,其中250,500,750U/mL浓度组显著高于与对照组(0.706±0.037,0.744±0.051,0.738±0.059,0.612±0.063,P<0.01),其增殖效果呈浓度依赖性反应,但1000U/mL的浓度组对成纤维细胞增殖无明显影响(P>0.05),对照组细胞48～72h进入增殖状态,但其增殖结果与实验组比较差异显著(F=28.16,P<0.01)。②成纤维细胞DNA含量结果:DNA合成期-DNA合成后期-分裂期细胞百分率明显升高,从58.8%～67.7%。③成纤维细胞Fas及Bcl-2蛋白表达结果:两者表达量均增高。结论:实验结果提示,重组人白细胞介素2对成纤维细胞的作用呈现浓度依赖性效应,再增加浓度并不能使其效应与之成正比,推测可能是因为其效应途径为配体和受体的结合,当受体被占据后,再增加配体的浓度也不能发挥起效应。该实验验证了重组人白细胞介素2促进成纤维细胞生物学活性的客观、直接的结果。

小鼠纤维介素蛋白2微小RNA表达质粒的构建及其对体内外相应基因的干预效应

目的:探讨小鼠纤维介素蛋白2(fgl2)的miRNA(微小RNA)表达质粒在体外对相应基因表达的干预效应及在体内对重型肝炎小鼠的治疗作用。方法:分别构建产生小鼠fgl2-miRNA的表达载体(P-mfgl2-miRNA),将其转染到中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中。实验分组:将P-mfgl2-miRNA与小鼠fgl2的表达质粒(pcDNA3.1-mfgl2)共转染到CHO细胞作为干预组,无关序列miRNA表达质粒(irrelevant P-miRNA)与pcDNA3.1-mfgl2共转染为非相关对照组,仅转染pcDNA3.1-mfgl2为阳性对照组,未转染任何质粒为空白对照组。通过实时荧光定量PCR及Western blot观察fgl2在基因转录水平及蛋白水平表达量的改变。建立重型肝炎小鼠模型,通过尾静脉高压注射P-mfgl2-miRNA者为治疗组,注射irrelevant P-miRNA者为非相关组,注射相同剂量生理盐水者为阴性对照组,观察P-mfgl2-miRNA对重型肝炎小鼠的治疗作用。结果:成功构建了针对小鼠fgl2的miRNA。在CHO细胞中,干预组fgl2在RNA水平及蛋白水平的表达均较非相关对照组显著降低。P-mfgl2-miRNA可提高重型肝炎小鼠生存率至8.3%。结论:Fgl2可作为重型肝炎基因治疗的靶点,利用miRNA沉默fgl2基因将有利于重型肝炎的治疗,为后续的进一步研究奠定了基础。

白细胞介素1β对气道成纤维细胞PGE2EP2及15-PGDH表达的影响

目的研究白细胞介素-1β（IL-1β）对小鼠气道成纤维细胞前列腺素E2（PGE2）、前列腺素E2受体（EP2）及15-羟基前列腺素脱氢酶（15-PGDH）表达的影响，以探讨其在吸人性损伤修复中的作用。方法分离雄性昆明种小鼠的气道成纤维细胞并体外培养，分别收集IL-1p作用后不同时间点和不同浓度的培养上清液及细胞；采用ELISA法测定PGE2水平，western blot测定EP2及15-PGDH蛋白表达。结果①经IL-1β 1ng／mL处理后气道成纤维细胞培养上清液PGE2水平在8、16、24、48h均高于对照组（P〈0．01），其中16h水平最高；而EP2及15-PGDH蛋白表达在8、16、24、48h与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。②不同浓度IL-113处理气道成纤维细胞后，气道成纤维细胞培养上清液PGE，水平在IL-180．1ng／mL组、1ng／mL组和10ng／mL组均高于对照组（P〈0．01），并且三组比较差异有统计学意义（P〈0．01）；而EP2及15-PGDH蛋白表达在IL-1β 0．1ng／mL组、1ng／mL组和10ng／mL组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论炎症介质IL-18可上调气道成纤维细胞PGE2水平，而对EP2、15-PGDH的表达无影响。表明IL-1B并不是通过EP2及15-PGDH蛋白表达来影响PGE2的合成，参与气道吸入性损伤修复过程。

纤维介素蛋白2在HBV感染孕妇中的表达及临床意义研究

目的探讨纤维介素蛋白2(FGL2)在乙型肝炎病毒(HBV)感染孕妇中的表达及临床意义。方法选择2020年7—9月本院收治的HBV感染孕妇80名作为观察组;另选择同期入住本院的无HBV感染孕妇80例作为对照组。所有HBV感染孕妇均口服富马酸替诺福韦酯二吡夫酯片抗病毒治疗,从孕24周开始每日口服300 mg/次,每日1次,持续服用至分娩结束后1个月。采集受试者空腹外周静脉血5 ml,收集血清,采用酶联免疫吸附法测定血清FGL2水平;采用速率法测定丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,采用重氮法测定总胆红素(TBIL)水平。比较两组血清FGL2水平变化,血清ALT、AST和TBIL水平变化;治疗前后血清FGL2水平变化,血清ALT、AST和TBIL水平变化;采用Pearson分析FGL2与ALT、AST和TBIL相关性;采用ROC曲线分析血清FGL2对HBV感染孕妇诊断价值。结果观察组血清FGL2水平高于对照组(P<0.05)。观察组血清ALT、AST和TBIL水平高于对照组(P<0.05)。治疗后血清FGL2水平低于治疗前(P<0.05)。治疗后血清ALT、AST和TBIL水平低于治疗前(P<0.05)。血清FGL2与ALT、AST和TBIL呈线性相关性(P<0.05)。经ROC曲线分析,FGL2对HBV感染孕妇诊断灵敏度为88.68%,特异度为62.96%。结论FGL2在HBV感染孕妇中表达水平明显升高,具有良好诊断灵敏度和特异度,可作为评价HBV感染孕妇诊断和治疗的有效指标,具有重要临床研究价值。

凝血酶和PAR-1受体对成骨细胞白介素-6和成纤维细胞生长因子-2表达的影响

目的探讨凝血酶对小鼠成骨细胞某些因子表达的调节作用。方法使用小鼠颅骨的成骨细胞,通过荧光定量PCR方法和人工合成的PAR-1或PAR-4特异性激活短肽了解受体介导的凝血酶对成骨细胞因子表达的影响。结果凝血酶不影响成骨细胞转化生长因子、血小板生长因子A、胰岛素样生长因子-Ⅰ和-Ⅱ的表达,凝血酶和PAR-1受体激活肽可以显著上调成骨细胞成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)和白介素-6(IL-6)的表达,但对IL-6表达的调节作用,凝血酶远较PAR-1激活肽为强,而PAR-4特异性激活肽并不影响这两种因子的表达。结论凝血酶可以促进小鼠成骨细胞FGF-2和IL-6的表达,此作用可能是通过PAR-1和非PAR-1通路介导的,凝血酶对FGF-2表达的调节可能完全是由PAR-1介导的,而凝血酶对IL-6表达的影响部分是由PAR-1介导的,部分可能是由未知受体介导的。PAR-4并不参与介导凝血酶对FGF-2和IL-6表达的调节作用。

溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的影响

背景:白细胞介素13受体α2与白细胞介素13结合后,不介导白细胞介素13功能,对白细胞介素13起负调控作用。有研究表明,溶血磷脂酸能增加人支气管上皮细胞白细胞介素13受体α2的表达,从而抑制白细胞介素13的作用。目的:验证溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的诱导作用。设计、时间及地点:mRNA水平的观察对照实验,于2007-07/2008-11在南昌大学医学院和江西省医学生物高技术重点实验室完成。材料:人肺成纤维细胞HFL-1购于中科院上海生化和细胞生物研究所。方法:培养HFL-1细胞,行时间依赖和剂量依赖实验。时间依赖实验采用1μmol/L溶血磷脂酸刺激细胞,分别于0,6,12,24h收集细胞。剂量依赖实验分别用0,0.1,1,10μmol/L的溶血磷脂酸刺激细胞,12h收集细胞。主要观察指标:显微镜下观察溶血磷脂酸对HFL-1细胞生长的影响,提取HFL-1细胞总RNA,用反转录-聚合酶链反应及图像分析法检测溶血磷脂酸对HFL-1细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的影响。结果:溶血磷脂酸不影响HFL-1细胞生长。1μmol/L溶血磷脂酸刺激HFL-1细胞,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达增高,并呈时间依赖性。随着溶血磷脂酸浓度的增加,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达明显增加。1μmol/L溶血磷脂酸刺激HFL-1细胞,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达可达高峰。溶血磷脂酸对HFL-1细胞白细胞介素13受体α1的表达无影响。结论:溶血磷脂酸能促进人肺成纤维细胞HFL-1白细胞介素13受体α2 mRNA的表达。

冠心病患者血清可溶性纤维介素2的变化及其与炎症因子的关系

目的探讨冠心病患者外周血清中可溶性分泌型纤维介素2(s FGL2)水平及其与炎症因子的关系。方法选择52例初诊急性冠脉综合征(ACS)患者、50例初诊稳定性心绞痛(SAP)患者和50例冠脉造影正常者作为研究对象,分别测定外周血CD4+CD25+CD127low调节性T淋巴细胞(Treg)、外周血s FGL2、炎症因子白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,RT-PCR测定外周血淋巴细胞膜型纤维介素2(FGL2)mRNA表达量,并进行统计学分析。结果与对照组和SAP组相比,ACS组外周血CD4+CD25+CD127lowTreg百分比及血清s FGL2、IL-10、TGF-β1显著降低(P<0.01),而TNF-α和hs-CRP显著升高(P<0.01)。血清s FGL2与外周血Treg、IL-10、TGF-β1呈正相关性,与TNF-α和hs-CRP呈负相关性。逐步多元回归分析表明,s FGL2与外周血Treg和IL-10呈正相关性。结论 ACS患者外周血s FGL2明显降低,可以反映循环血CD4+CD25+CD127lowTreg数量及血清IL-10水平,s FGL2降低可能参与了ACS发生和发展。

白细胞介素-12通过调整Th1/Th2细胞因子平衡抑制肺纤维化

目的：研究白细胞介素-12（Interleukin-12，IL-12）对博莱霉素（Bleomycin，BLM）致大鼠肺纤维化的治疗作用及机制。方法：采用完全随机设计将雌性Wistar大鼠60只随机分为4组，即BLM模型组（1组）、IL-12干预组（2组）、BSA治疗对照组（3组）及生理盐水（NS）对照组（4组），第1，2，3组经气管注入BLM制备肺纤维化（PF）大鼠模型，第4组给予同等体积的NS．制模后第1～12日腹腔注射干预药物，第2组为IL-12溶液，第3组为牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin，BSA）溶液，制模后第7，14，28日每组各处死5只大鼠，观察其病理改变、肺脏重量、肺组织匀浆中羟脯氨酸（Hydroxyproline，Hyp）水平及肺系数的变化，对病理切片进行肺泡炎和纤维化评分和灰度百分比分析，测定支气管肺泡灌洗液（Bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中白细胞介素4（Interleukin-4，IL-4）、γ-干扰素（Interferon-gamma，INF-1）水平，计算IL4／INF-1比值。结果：（1）与第4组比较，第1组出现明显肺泡炎及纤维化，肺脏重量、肺系数、肺组织匀浆中Hyp含量增加，肺泡炎及纤维化评分增高，BALF中IL-4增加、IL-4／INF-γ比值增高，差异有统计学意义（均P〈0．05）；灰度分析示7，14d深染区百分比增加（P〈0．01），7d时浅染区百分比增加（P〈0．05），但是BALF中INF-γ减少（P〈0．05）；（2）第3组各个指标同第1组比较差异无统计学意义；（3）第2组与第1，3组比较肺泡炎及纤维化程度均减轻，7，14d时的肺泡炎评分、深染区百分比以及28d时肺纤维化评分、浅染区百分比减少，肺脏重量（7d时）、肺系数、Hyp含量，BALF中IL-4含量减少，IL-4／INF-1比值减低，差异有统计学意义（均P〈0．05），但是INF-1含量增加（P〈0．01）。结论：IL-12能通过调整Th1／Th2型细胞因子的平衡而对BLM所致大鼠肺纤维化发挥抗肺纤维化作用。