二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化形成中门脉压力的动态变化

目的:探讨二甲基亚硝胺(DMN)肝纤维化大鼠门脉压力(Ppv)的动态变化及门脉高压形成的病理组织学基础。 方法:DMN 4 wk12次腹腔注射制作大鼠肝纤维化模型,分别于造模后1、2、4、6和8wk启肠系膜前静脉插管直接测定Ppv,获取肝组织光镜下观察病理学变化,Jamall法测定肝组织羟脯氨酸含量。 结果:造模开始后不同时期大鼠Ppv(kPa),模型大鼠/正常大鼠如下:1 wk:1.48±0.11/1.17±0.12,P<0.05;2 wk∶1.48±0.42/1.01±0.03,P>0.05;4 wk∶1.97±0.19/0.90±0.01,P<0.01;6wk∶1.65±0.23/0.80±0.08,P<0.01;8 wk∶1.15±0.24/0.92±0.05,P>0.05。肝组织学观察,1 wk时可见肝细胞肿胀,少量出血,窦壁细胞增生,肝窦充血,2 wk时肝细胞肿胀、出血性坏死较重,有较粗的纤维间隔向肝小叶伸展。4 wk时可见大面积出血性坏死,汇管区明显增宽,窦壁细胞增生显著,有大量的长梭形细胞附着,窦壁增厚,肝窦甚至扭曲;闭塞。6 wk时窦壁细胞增生较4 wk时减轻,8 wk时肝窦组织结构趋向恢复正常,但6wk、8wk的纤维化仍较显著;模型大鼠的Ppv与肝组织Hyp含量无显著相关性(P>0.05)。 结论:门脉高压是DMN肝纤维化大鼠的显著特征之一,肝窦壁病理变化是该模型门脉高压形成的主要组织学基础。

“益肝浓缩煎剂”与强肝胶囊对肝纤维化形成的预防作用

目的 研究“益肝浓缩煎剂”、强肝胶囊对肝纤维化形成的预防作用。方法 将 6 0只SD雄性大鼠随机分成 4组 :正常组、模型组、“益肝浓缩煎剂”组、强肝胶囊组 ,每组 15只 ,以CCl4 诱导大鼠肝纤维化模型 ,造模前2周给予相应药物进行预防 ,持续 10周 ,测定肝组织羟脯氨酸 (Hyp)、丙二醛 (MDA)含量 ,用光镜、电镜观察肝脏病理形态变化。结果 4组小鼠肝组织Hyp、MDA含量间差别均有显著性意义 (P <0 0 1) ;电镜显示“益肝浓缩煎剂”组、强肝胶囊组的胶原纤维增生均明显受到抑制 ,“益肝浓缩煎剂”组肝细胞及细胞器接近正常。此外 ,两组α-平滑肌肌动蛋白表达明显减少。结论 “益肝浓缩煎剂”、强肝胶囊对肝纤维化具有预防作用 ,在保护肝细胞方面 ,“益肝浓缩煎剂”作用较为明显。

PPARγ在大鼠肝纤维化形成过程中的动态变化

研究表明，PPARγ在肝脏代谢功能方面发挥重要调节作用，其功能改变与一些肝脏疾病的发生发展有某种相关性。本研究针对大鼠正常肝组织及不同程度的肝纤维化组织中PPARγ的表达进行观察，旨在进一步研究PPARγ与肝纤维化发生机制的关系。

大鼠免疫性肝纤维化形成中MMP-1和TIMP-1表达的动态变化

目的:研究MMP-1,TIMP-1在肝纤维化发生发展中的作用.方法:SD大鼠48只,体质量120-150g,随机分成正常对照组8只和肝纤维化组40只.肝纤维化动物模型制备按BlackWell方法稍加改进,予HSA致敏大鼠后再予尾静脉攻击注射.在攻击注射0,2,4,6,8wk后取肝.应用肝组织羟脯氨酸(HYP)的测定和HE,嗜银及VG染色监测肝纤维组织增生情况,ELISA方法测定MMP-1,TIMP-1的蛋白表达,半定量RT-PCR方法测定MMP-1,TIMP-1基因表达.结果:HYP随着HSA的不断注射逐渐升高,纤维组织增生逐渐加重,显示HSA所致的免疫性肝纤维化逐步形成.正常肝组织有MMP-1蛋白表达,在肝纤维化发展过程中以及肝硬化阶段,其蛋白表达没有显著性变化(P>0.05);而TIMP-1蛋白表达水平逐渐增加(4wk后,与0wk比较有统计学差别:P<0.01),到肝硬化阶段达到高峰(8wk时接近0wk的4倍).在肝纤维化形成的进展中,MMP-1mRNA表达无明显变化(P>0.05),而TIMP-1mRNA表达随着时间的推移而逐渐增高(4wk后与0wk比较,P<0.01).在肝纤维化发生发展中,MMP-1/TIMP-1蛋白表达比值逐渐降低,尤其是4wk以后,分别与0wk比较有显著差异(P<0.01).按肝纤维化增生程度分组,随着肝纤维化程度的加重,TIMP-1的表达逐渐升高,MMP-1/TIMP-1比值逐渐减小.结论:在大鼠免疫性肝纤维化进程中,TIMP-1进行性升高,使MMP-1活性受到抑制.MMP-1及TIMP-1比例逐渐失调并持续存在,加速了肝纤维化的进程.

CCl_4大鼠肝纤维化形成与消减过程中肝组织蛋白质组的动态变化及扶正化瘀方的干预作用

目的:通过大鼠纤维化肝组织高亲水性蛋白质分子差异展示及扶正化瘀方干预作用,寻找与扶正化瘀方治疗肝纤维化相关的蛋白质分子。方法:通过皮下注射大鼠CCl4,分别持续4、8、12周,对大鼠肝纤维化过程进行动态观察,并在不同时期进行扶正化瘀方干预,治疗从第12周始至16周止。采用蛋白质分步抽提方法,提取肝组织蛋白质,分别进行二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2DE)分离、凝胶银染,显示各组蛋白质分子的差异表达的蛋白质分子。结果:在各组银染凝胶图谱上,可辨识的蛋白质斑点达1000～1400个左右,蛋白质表达中除有肝组织看家蛋白质,模型组也有特异蛋白质表达,且在不同时期蛋白质分子表达也有差异,特异表达蛋白质分子为100至300多个不等,在不同阶段表达是不相同的,经质谱鉴定确定了有几类功能不同的蛋白质分子。结论:扶正化瘀方抗肝纤维化作用机制是多方面的,其干预作用与多种蛋白质分子相关。

肝纤维化形成与血清HA、LN、Ⅳ型胶原相关性的实验研究

目的 :研究肝纤维化形成过程中形态学与血清学的相关性。方法 :取雄性Wistar大鼠 ,随机分成 5组 ,即对照组和 4个中毒组 ,中毒组腹腔注射 DMN( 1 0 μl/kg) 1周连续注药 3d,持续 4周 ,制作大鼠的肝纤维化模型 ;对照组注射同样剂量的生理盐水。大鼠分别在 7、1 4、2 1、2 8d心脏取血 ,用 ELISA法测定在肝纤维化形成过程中血清 HA、LN、 型胶原动态变化。取其肝脏 ,动态观察在肝纤维化形成过程中的形态学变化 ,并对血清学与形态学进行相关分析。结果 :随造模时间的延长 ,DMN模型组大鼠 HA、LN和 型胶原的含量随时间的增加而增加 ,并且其含量间有显著性差异 ,形态学观察随造模时间的延长DMN模型组大鼠肝纤维化逐渐形成并加重。结论 :肝纤维化形成过程中血清 HA、LN、

肝窦内皮细胞在肝纤维化形成中的作用

肝窦内皮细胞（1iver sinusoidal endothelial cell，LSEC）是肝窦壁的主要组成细胞，其独特的结构、免疫表型及功能在肝脏的生理和病理过程中发挥重要作用；正常LSECs表面有窗孔，内皮下缺乏基底膜，是肝细胞与肝窦血液间物质交换的重要通道；慢性肝病中，LSECs失窗孔，内皮下出现基底膜，形成类似连续型毛细血管的结构，这一过程称为肝窦毛细血管化；肝窦毛细血管化的形成导致肝细胞损伤、细胞外基质（ECM）沉积、肝脏微循环障碍等一系列病变，促进肝纤维化、肝硬化的发生发展。

NO在肝纤维化形成中对肝脏微循环的影响

目的探讨外源性一氧化氮 (nitricoxide ,NO)对肝脏微循环障碍的影响和在肝纤维化发生发展中的作用。方法将大鼠分为3组 :正常对照组 (normalcontrol,NC) :以正常饮食喂养 ;采用复合因素致肝纤维化组 (hepaticfibrosis,HF) :同时用生理盐水1.5ml·只 -1·d -1灌胃 ;HF +Arg组 :以肝纤维化对照组为基础 ,同时予L -精氨酸 (L-arginine,L -Arg)100mg·Kg-1·d-1灌胃。于实验4周末 ,观察血浆内毒素(lipopolysaccaride ,LPS)、NO、丙二醛 (malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶 (superoxidedismutase ,SOD)水平 ,观察各组肝组织纤维增生程度 ,用台盼蓝原位灌流肝脏来观察肝脏微循环的改变。结果血浆内毒素水平在HF组均明显高于NC组 ,HF +Arg组内毒素水平虽比NC组高 ,但差异无显著性 ;NO水平HF +Arg组明显高于HF组 ;血浆MDA水平各实验组均明显高于NC组 ;血浆SOD活性HF组明显低于NC组和HF+Arg组 ;肝脏纤维组织目标面积HF组明显大于HF +Arg组 ;用台盼蓝原位灌流肝脏发现HF组灌流时间最长 ,HF +Arg组与NC组比较差异无显著性。结论外源性NO可能通过改善肝脏微循环 ,防止肝脏缺血和炎性细胞介质诱导的氧化损伤 ,延缓肝纤维化的发展。

转化生长因子-β在肝纤维化形成中的作用及意义

转化生长因子-β(TGF-β)是一类多肽生长因子,最初发现它们能促进成纤维细胞转化,后来认识到它们能调节细胞增殖、细胞外基质合成、血管形成及胚胎发生等。近年来研究认为TGF-β能刺激肝纤维化细胞外基质合成,在肝纤维化形成中起中心作用。 一、TGF-β及其受体 TGF-β是一个大家族,它的成员可分为三大类:TGF-βs。

肥大细胞在大鼠胰腺纤维化形成中的介导作用

目的 动态观察大鼠实验性胰腺纤维化过程中胰腺组织肥大细胞的数量和分布变化 ,并探讨其在胰腺纤维化形成中的可能介导作用。方法 经胆胰管注射 2 %三硝基苯磺酸 (TNBS)诱导大鼠胰腺纤维化模型 ,分别在术后 3d、1周和 4周处死大鼠并留取胰腺标本 ,HE染色观察胰腺组织病理学改变和纤维化程度 ;免疫组织化学染色和硫堇蓝染色观察胰腺星状细胞活化及肥大细胞的数量和分布。结果 HE染色显示 2 % TNBS注射后 3d,胰腺组织病理表现以炎症为主 ,4周时可见明显的胰腺组织纤维化形成。术后 3d组织间质中的肥大细胞数量增加 ,1周后明显增多 (P<0 .0 5 ) ;4周时脱颗粒现象明显增多 ;而在其它区域肥大细胞的数量和分布与 3d时相比未见明显差异 (P>0 .0 5 )。第 4周可见坏死纤维化区域数量较 1周时显著增加 (P<0 .0 1) ,α- SMA在正常组织中呈散在阳性分布 ,术后 3d时呈弱阳性表达 ,1周后阳性明显增强 ,主要位于坏死纤维化区域和胰管周围 ,4周时阳性明显增强 ,多位于纤维化区域。结论 肥大细胞数量增多并活化脱颗粒可能参与了胰腺纤维化的形成过程 ,该作用可能与其脱颗粒释放细胞因子 ,继而刺激胰腺星状细胞活化有关。

高血糖与肝纤维化形成机制的研究

高血糖对肝纤维化形成的影响越来越受到重视。高血糖可以促进肝星状细胞增生及胶原合成，其作用机制可能与自由基的产生、有丝分裂原蛋白激酶的活化、胰岛素抵抗、氧化应激及细胞因子的改变有关。

植物性神经对大鼠肝脏葡萄糖代谢和肝纤维化形成的影响(摘要)

目的:探讨大鼠植物性神经对其肝脏葡萄糖代谢和肝纤维化形成的影响。方法:建立完全去除植物性神经的肝郁气滞大鼠模型(实验组16只),应用免疫组织化学技术连续观测此种模型的去神经过程。并利用此模型测定空腹及进食后不同状态下肝糖原的含量,以及肝脏组织肝纤维化4项指标的水平,另设16只大鼠为对照组。结果:免疫组化结果显示。

肝纤维化形成分子机制及其防治的实验研究

肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化进展的必经阶段,阻断或减轻肝纤维化形成对防治肝硬化具有重要意义.秋水仙碱、青霉胺、冬虫夏草、粉防己碱等药物具有一定抗肝纤维化的作用,但毒副作用较大且疗效不满意,故临床应用受到限制.

肝纤维化形成中相关信号通道的研究进展

肝纤维化是多种慢性肝脏疾病发展成为肝硬化的中间阶段，同时也是必经之路。其特征是以胶原蛋白为主的细胞外基质（ ECM）的大量沉积。在正常的肝脏组织中，ECM 的最主要来源是肝星状细胞（ HSC）。肝纤维化的形成，一方面是HSC的活化及向肌成纤维细胞和成纤维细胞的转化，致使ECM的大量合成；另一方面是ECM的降解减少。研究表明［1］，肝纤维化在一定条件下可被逆转。引起人们对肝纤维化发生级逆转机制的探讨，多条信号通路参与HSC的激活。本文将对纤维化相关信号通道加以阐述。