氨基胍对CTGF在大鼠纤维化肺成纤维细胞中表达的影响及其作用机制探讨

目的探讨氨基胍对结缔组织生长因子(CTGF)在大鼠纤维化肺成纤维细胞中表达的影响及其作用机制。方法采用细胞培养、免疫组化、流式细胞术等方法,检测氨基胍对CTGF在大鼠纤维化肺成纤维细胞中表达的影响。结果 TGF-β可诱导肺成纤维细胞分化为肌成纤维细胞,并使CTGF的表达增强(P<0.05),氨基胍可以抑制TGF-β的诱导作用(P<0.05),单独应用氨基胍对CTGF在大鼠纤维化肺成纤维细胞中的表达无影响。结论氨基胍可能是通过与TGF-β发生作用,从而抑制CTGF在大鼠纤维化肺成纤维细胞中的表达。

JAK-STAT通路参与CTGF诱导人胚肺成纤维细胞转分化的研究

目的研究JAK-STAT信号通路在重组人结缔组织生长因子(recombinant human,CTGF)诱导人胚肺成纤维细胞(HFL-I)转分化过程中的作用。方法将体外培养的HFL-I分为正常对照组、CTGF组及CTGF+JAK-STAT特异性抑制剂通路抑制剂AG490组,选取不同时相点,Western blotting测定平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、磷酸化蛋白(p-STAT3)和总蛋白STAT3的蛋白表达,RT-PCR检测STAT3 mRNA表达。结果正常体外培养的HFL-I有微量的p-STAT3、α-SMA表达,加入20ng/ml CTGF诱导15min后p-STAT3水平明显升高(P<0.05),30min时升至顶峰后逐渐减弱;诱导24h后α-SMA表达显著升高(P<0.05)。AG490 50μmol/L预处理60min,p-STAT3和α-SMA表达明显抑制(P<0.05或P<0.01)。结论 CTGF诱导HFL-I转分化为肌成纤维细胞,JAK-STAT通路参与上述过程,其特异性抑制剂AG490可有效抑制该效应。

特发性肺纤维化病人肺成纤维细胞过度表达单核细胞趋化蛋白-1

目的研究凝血酶对正常人肺成纤维细胞(normalhuman lung fibroblasts,N-LF)和特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)病人肺成纤维细胞(F-LF)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响。方法 N-LF和F-LF细胞分别培养于96孔培养板内,凝血酶诱导4和24h后,收集上清液并用ELISA方法检测MCP-1蛋白水平。结果凝血酶可诱导N-LF和F-LF细胞释放MCP-1,但F-LF细胞的MCP-1分泌水平远远高于N-LF细胞。结论人肺成纤维细胞在肺纤维化过程中过度合成和释放MCP-1,凝血酶可进一步促进其过度表达MCP-1。