鸡胚胎期肌纤维形成相关miRNAs的筛选与分析

研究旨在挖掘鸡胚胎期肌纤维形成相关miRNAs,为进一步探究miRNA在肌肉发育过程中的调控机制提供理论基础。研究采集玫瑰冠鸡、科宝鸡胚胎期第8天(E8)和第14天(E14)腿肌组织进行HE染色和small RNA测序,通过生物信息学分析差异表达miRNAs,随机选择14个差异表达的miRNAs进行荧光定量PCR(qRT-PCR)验证结果的准确性。结果显示,玫瑰冠鸡、科宝鸡E8的肌纤维直径和横截面积极显著小于E14(P<0.01),E8的肌纤维密度极显著高于E14(P<0.01)。通过生物信息学分析,在12个测序文库中共鉴定出2455个已知miRNAs和329个新的miRNAs,其中在E8和E14(C8TvsC14T_R8TvsR14T)中筛选出499个差异表达miR-NAs。GO富集结果显示,差异miRNA靶基因在细胞迁移、代谢过程、细胞增殖、细胞发育和小分子结合等GO条目中显著富集。KEGG富集分析发现,大量的靶基因富集到与细胞周转和代谢相关的信号通路中,同时富集到TGF-β、Notch、Hedgehog、Wnt、FoxO等与肌肉发育相关的信号通路。miRNA-mRNA联合分析结果表明,miR-3594-3p-APOBEC2、miR-1635-FHL3/MEF2D、miR-193-3p-HDAC3、miR-1724-PRKAG3、miR-1698-PRKAG3等互作对可能是调控鸡胚胎期肌纤维形成和肌肉发育的重要因子。研究表明,鸡胚胎期肌纤维形成受到多种miRNAs和信号通路的调控,筛选出miR-3594-3p、miR-1635、miR-193-3p、miR-1724、miR-1698等miRNAs可能在肌纤维形成过程中发挥重要作用。

蜕皮甾酮体外抑制β-淀粉样蛋白的纤维形成及神经毒性(英文)

目的 处于聚集及纤维丝状态的 β 淀粉样蛋白片段 1 - 4 2 (Aβ1 -4 2 )具有神经毒作用 ,可导致阿尔茨海默病 (AD)。本文观察蜕皮甾酮体外对Aβ1 -4 2 的聚集、纤维丝形成及其神经元毒性的影响 ,旨在为蜕皮甾酮防治AD提供依据。方法 透射电镜观察蜕皮甾酮及维生素E(VitE)对试管内Aβ1 -4 2 聚集和纤维丝形成的影响 ;MTT法及乳酸脱氢酶 (LDH)活性法检测培养的胚胎大鼠大脑皮层神经元存活率及神经元受损情况。结果 ① 1 0 0 μmol·L-1 Aβ1 -4 2 分别与磷酸盐缓冲液 (PBS)、1 0 0 μmol·L-1 蜕皮甾酮和 1 0 0 μmol·L-1 VitE孵育 3d时 ,各组均无纤维丝形成 ;孵育 7d时 ,各组均见纤维丝形成 ,但蜕皮甾酮和VitE组的纤维丝形成较PBS组明显减少 ,尤以蜕皮甾酮组更明显。2 0 μmol·L-1 的蜕皮甾酮和 2 0 μmol·L-1 VitE对Aβ1 -4 2 的聚集及纤维丝形成无明显影响。② 1 0 0μmol·L-1 的Aβ1 -4 2 作用 2 4h ,神经元存活率明显下降。蜕皮甾酮或VitE 1 0～ 1 0 0 μmol·L-1 预处理 30min,再与 1 0 0 μmol·L-1 的Aβ1 -4 2 作用 2 4h ,神经元的存活率呈剂量依赖性增加 ,LDH活性呈剂量依赖性降低。结论 离体条件下 ,蜕皮甾酮可直接抑制Aβ1 -4 2 的聚集及纤维丝形成 ,减轻Aβ1 -4 2 对神经元的毒性 ,?

涎腺肌上皮瘤中纤维形成的组织学及电镜组织化学研究

目的 研究涎腺肌上皮瘤细胞之间及粘液样区域中纤维的形成机制及纤维的类型。方法 采用胶原纤维及弹性纤维的组织学特殊染色方法及鞣酸 -电镜组织化学技术观察 4例涎腺肌上皮瘤。结果 组织学染色表明 ,在肌上皮瘤细胞之间及粘液样区域内分布有红染的胶原纤维 (苦味酸 -酸性品红法 )和呈深蓝黑色的弹性纤维 (间苯二酚品红法 )。鞣酸电镜组织化学研究结果显示 ,在肌上皮瘤细胞周围分布有数量不等的胶原原纤维和弹性纤维团块。在肌上皮瘤细胞的胞浆内 ,可见两种类型的高尔基复合体来源的分泌囊泡。一种着色深黑 ,电子密度均匀 ,内含致密的前弹性蛋白分子 ;另一种着色浅灰 ,电子密度不均匀 ,内含微丝状结构的前胶原蛋白分子。肌上皮瘤细胞通过胞吐作用将这些物质释放到细胞外 ,形成胶原纤维和弹性纤维。结论 肌上皮瘤细胞具有合成前胶原蛋白及前弹性蛋白的能力 ,构成肿瘤细胞外及粘液样区域中的胶原纤维和弹性纤维。

细胞因子与内眼术后纤维形成的关系

细胞因子与内眼术后纤维形成的关系安徽省立医院顾宝文综述安徽省立医院刘广进审校许多患者在内眼手术以后，都有不同程度的纤维蛋白渗出，严重者常形成纤维团块或膜状纤维组织。这种现象常见于白内障摘除人工晶体植人手术、青光眼滤过手术、糖尿病性视网膜病变和增殖性视...

无巨核细胞条件下促血小板生成素对骨髓基质细胞纤维形成的影响

目的:观察无巨核细胞存在的条件下促血小板生成素能否刺激骨髓基质细胞纤维形成。方法:用改良Dexter培养法进行体外不同浓度促血小板生成素(TPO)作用下的基质细胞培养,在培养过程中检测基质细胞相对增殖指数,纤维连接蛋白、层粘素和Ⅳ型胶原的表达,以及Ⅲ型前胶原蛋白的合成。结果:TPO可刺激基质细胞增殖,相对增殖指数随TPO浓度增加而增强,但不随作用时间延长而增强;纤维连接素、层粘素和Ⅳ型胶原在对照组与实验组均有阳性表达,但实验组强于对照组,但阳性强度不随培养时间的延长而增强;标记的Ⅲ型前胶原蛋白平均荧光强度实验组高于对照组,差异明显,但这种作用的强弱与TPO浓度相关性不强。结论:无巨核细胞存在的条件下,TPO可直接刺激骨髓基质细胞产生细胞外基质和胶原,促进其纤维形成。

细胞因子与内眼术后纤维形成的关系

许多患者在内眼手术后常伴有限内纤维形成，明显地影响手术效果，甚至导致手术失败。过去，许多学者将预防术后纤维形成的药物应用于临床，取得了一定的临床效果，但是也发生了许多并发症，甚至还相当严重。近些年来，随着分子细胞学及分子生物学的发展，许多细胞园子被提纯，并证实它们与伤口愈合、纤维形成之间有着密切的关系，从而为临床上预防、治疗内眼术后纤维形成带来了希望。本文就过去防止内眼术后纤维形成的药物作一回顾，并重点阐明细胞因子与内眼术后纤维形成之间的关系。现分述如下。

凝溶胶蛋白对小鼠成肌细胞分化及肌纤维形成的影响研究

为了研究凝溶胶蛋白(gelsolin,GSN)对成肌细胞分化及肌纤维形成的作用及其作用机制,试验采用蛋白导入试剂将人血浆凝溶胶蛋白导入C2C12细胞中;通过倒置显微镜定性观察细胞分化的形态学变化并应用间接免疫荧光染色法检测凝溶胶蛋白的导入情况;利用TaqMan实时定量RT-PCR方法定量分析分化前导入凝溶胶蛋白对细胞骨骼肌肌动蛋白表达水平的影响。结果表明:外源凝溶胶蛋白改变了C2C12小鼠成肌细胞的形态,使其形成发达的片状伪足或丝状伪足,分化形成的多核肌管更多;细胞分化前导入凝溶胶蛋白上调骨骼肌肌动蛋白的表达。体外试验证明C2C12小鼠成肌细胞分化前导入凝溶胶蛋白可促进肌细胞的分化及肌纤维的形成。

氟伐他汀对小鼠肝脏胶原纤维形成的抑制作用

目的 研究氟伐他汀对小鼠肝脏胶原纤维生成的抑制作用。 方法 对昆明系小鼠用 2 0 %四氯化碳橄榄油溶液 5ml/kg皮下注射 ,每 5天一次 ,药物组于造模开始加氟伐他汀 30mg/kg或 10mg/kg每天一次灌胃给药。于 12周末所有小鼠断头处死剖腹取肝 ,部分做病理检查 ,HE染色观察肝纤维化程度 ,评判肝纤维化分数 ,部分测定肝组织中羟脯氨酸 (Hyp)含量。 结果 模型组在 3个月时已形成明显的肝纤维化征象 ;肝纤维化分数为 (2 .2 8± 0 .4 4 ) ,肝组织中羟脯氨酸含量为 (14 .3± 0 .4 6 ) μg/mg ;药物组肝纤维化分数分别为 1.6 6± 0 .38、1.95± 0 .32。肝组织中羟脯氨酸含量分别为 (10 .2 3± 1.34) μg/mg、(11.98± 1.5 6 ) μg/mg。药物组肝组织羟脯氨酸含量较模型组明显减少 (P <0 .0 5 ) ,差异有显著意义。 结论 氟伐他汀可使四氯化碳诱导的肝纤维化程度减轻 ,降低肝内羟脯氨酸含量 。

法舒地尔干预百草枯肺纤维形成机制的探究

百草枯(PQ)属于一种季铵盐除草剂,可经消化道、呼吸道或破损的皮肤被人体不完全吸收导致中毒,其中口服是导致中毒的主要途径。经口进入体内的百草枯在胃肠道吸收率为5~15%,约2小时后达到其血浆浓度的峰值,并通过血液循环造成多器官不同程度的损伤,其中以肺脏损伤为著,这可能与肺脏II型肺泡上皮细胞有关[1]。未被吸收的百草枯以粪便、尿液、乳汁等形式排出,尿液是其排出的最主要方式。统计学分析发现在百草枯中毒大鼠模型中,其死亡率高达80%[2]。

PGRN通过TGF-β1调控皮肤损伤后纤维形成

瘢痕是皮肤损伤愈合的必然产物,前期研究表明,沉默内源性颗粒蛋白前体(PGRN)促进胶原沉积和纤维形成。本研究继续应用小鼠皮肤孔状切除模型,在创口及其周围皮下注射Si-m-PGRN和/或LV3-TGF-β1敲减PGRN和/或TGF-β1,研究TGF-β1在PGRN调控皮肤损伤愈合纤维形成中的作用。结果显示,LV3-TGF-β1和Si-m-PGRN可以较好的敲减TGF-β1和PGRN,敲减TGF-β1逆转了PGRN对纤维形成的调控,同时逆转PGRN对下游smad3信号通路的调控。提示PGRN可通过TGF-β1调控其下游信号通路影响皮肤损伤后纤维形成。

大鼠软骨Ⅱ型胶原体外胶原原纤维的形成

建立了Ⅱ型胶原的提取和纯化方法,观察大鼠软骨Ⅱ型胶原体外胶原原纤维形成的动力学、胶原原纤维的稳定性和超微结构。结果表明,Ⅱ型胶原静止期、增长期分别为15、120min,增长期凝胶化速率0.0060,凝胶可复性13.58％,胶原原纤维呈典型的具有64nm周期横纹的自然纤维结构,但纤维直径较体内增长。这些对研究体内胶原原纤维的形成过程及调节机制具有重要意义。

淀粉样蛋白Aβ的插膜作用可以抑制其形成纤维

作为老年性痴呆(AD)患者脑中淀粉样斑块的核心蛋白,β-淀粉样蛋白(Aβ)是从淀粉样前体蛋白(APP)水解而来。该蛋白是多种长度多肽的混合物,其中Aβ40和Aβ42是主要组分。分别研究了膜中胆固醇含量及溶液pH对Aβ40和Aβ42形成纤维的影响。电镜观察发现,含有胆固醇的脂质体几乎可以完全抑制Aβ40的纤维形成,而低pH只能部分地抑制Aβ42的纤维形成。单层膜的实验证明这两种因素都有利于Aβ40和Aβ42的插膜。构象研究表明插膜会诱导Aβ40和Aβ42的二级结构发生不同的变化。结果说明,Aβ40和Aβ42的插膜作用能够在一定程度上抑制蛋白形成纤维,但两者具有不同的抑制机制。

β淀粉样多肽纤维形成与阿尔茨海默病

阿尔茨海默病（AD）是老年性痴呆常见的类型，其主要病理改变之一为老年斑。老年斑是AD患者脑内出现的以β淀粉样多肽（Aβ）为主要成分，含有变性的轴突、神经纤维以及胶质细胞突起的病理性斑块。Aβ是淀粉样蛋白前体（APP）的酶解产物，研究证实大脑及脑脊液中Aβ含量的增高与认知能力下降密切相关。Aβ具有较强的聚集能力，其相互聚集形成的纤维具有毒性，能够促发炎症级联反应、轴突损伤、突触丢失和细胞凋亡等病理改变，是导致神经元变性乃至形成痴呆的重要因素。研究Aβ分子结构及其纤维形成的机制，探讨阻止其聚集的方法，在AD的防治研究中有着重要的意义。

氨基酸序列和时间对短肽纳米纤维形成的影响

蛛丝蛋白非结晶区不同基序插入RADA16-Ⅰ,短肽分别为R1(n-RADARADAGGASRADARADA-c)和R2(n-RADARADAGPGGYRADARADA-c)。采用傅立叶红外光谱(FTIR)、原子力显微镜(AFM)和透射电子显微镜(TEM)技术研究氨基酸序列和组装时间对短肽的二级结构和自组装成的纳米结构的影响。结果表明,随着时间的延长,R1和R2形成的β-折叠片含量升高,纤维变长变宽。R1形成数量少但长达几十微米的纤维,R2形成长约一微米但数量多的纤维。通过改变氨基酸序列,控制组装时间可以达到控制自组装形成的纳米结构的目的。

高品质陆地棉纤维品质形成特点的研究

以常规棉苏棉16为对照,研究了高品质棉渝棉1号、高品质Bt棉科棉1号的纤维发育及品质形成特点。结果表明,与苏棉16相比,科棉1号和渝棉1号纤维快速伸长期略长,快速伸长期内的长度日增长速率较高;比强度快速伸长期较短,但在快速伸长期内的增长速率较高;纤维素含量随着花后天数呈增加趋势,17 d内的增长速率很低,17 d后速率明显加快,至花后24 d呈直线上升趋势,到花后45 d时纤维素含量基本稳定。与苏棉16相比,渝棉1号和科棉1号花后IAA含量较高;花后17 d ABA含量较高,花后24 d的ABA/IAA较高,说明不同基因型纤维发育和品质建成过程的差异与其纤维细胞内的激素变化有关。

二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化形成中门脉压力的动态变化

目的:探讨二甲基亚硝胺(DMN)肝纤维化大鼠门脉压力(Ppv)的动态变化及门脉高压形成的病理组织学基础。 方法:DMN 4 wk12次腹腔注射制作大鼠肝纤维化模型,分别于造模后1、2、4、6和8wk启肠系膜前静脉插管直接测定Ppv,获取肝组织光镜下观察病理学变化,Jamall法测定肝组织羟脯氨酸含量。 结果:造模开始后不同时期大鼠Ppv(kPa),模型大鼠/正常大鼠如下:1 wk:1.48±0.11/1.17±0.12,P<0.05;2 wk∶1.48±0.42/1.01±0.03,P>0.05;4 wk∶1.97±0.19/0.90±0.01,P<0.01;6wk∶1.65±0.23/0.80±0.08,P<0.01;8 wk∶1.15±0.24/0.92±0.05,P>0.05。肝组织学观察,1 wk时可见肝细胞肿胀,少量出血,窦壁细胞增生,肝窦充血,2 wk时肝细胞肿胀、出血性坏死较重,有较粗的纤维间隔向肝小叶伸展。4 wk时可见大面积出血性坏死,汇管区明显增宽,窦壁细胞增生显著,有大量的长梭形细胞附着,窦壁增厚,肝窦甚至扭曲;闭塞。6 wk时窦壁细胞增生较4 wk时减轻,8 wk时肝窦组织结构趋向恢复正常,但6wk、8wk的纤维化仍较显著;模型大鼠的Ppv与肝组织Hyp含量无显著相关性(P>0.05)。 结论:门脉高压是DMN肝纤维化大鼠的显著特征之一,肝窦壁病理变化是该模型门脉高压形成的主要组织学基础。

枪弹创纤维蛋白形成能力的免疫组化研究

采用免疫组化PAP染色法，对57例人体枪弹创标本的纤维蛋白形成能力进行检测。结果发现，所有生前枪弹创均有纤维蛋白形成祖创缘邻近皮肤组织内毛细血管内皮细胞以及血管内充盈的红细胞膜上亦呈棕色阳性染色；死后30min内形成的枪弹创均有纤维蛋白形成；死后37min后形成的枪弹创无纤维蛋白形成，说明死后30min，纤维蛋白形成能力仍存在。作者认为，仅根据损伤局部有纤维蛋白形成即判断为生前伤是不恰当的，尚应结合损伤部位、损伤程度、损伤类型以及其它生活反应综合评定，不宜单凭纤维蛋白判断。

“益肝浓缩煎剂”与强肝胶囊对肝纤维化形成的预防作用

目的 研究“益肝浓缩煎剂”、强肝胶囊对肝纤维化形成的预防作用。方法 将 6 0只SD雄性大鼠随机分成 4组 :正常组、模型组、“益肝浓缩煎剂”组、强肝胶囊组 ,每组 15只 ,以CCl4 诱导大鼠肝纤维化模型 ,造模前2周给予相应药物进行预防 ,持续 10周 ,测定肝组织羟脯氨酸 (Hyp)、丙二醛 (MDA)含量 ,用光镜、电镜观察肝脏病理形态变化。结果 4组小鼠肝组织Hyp、MDA含量间差别均有显著性意义 (P <0 0 1) ;电镜显示“益肝浓缩煎剂”组、强肝胶囊组的胶原纤维增生均明显受到抑制 ,“益肝浓缩煎剂”组肝细胞及细胞器接近正常。此外 ,两组α-平滑肌肌动蛋白表达明显减少。结论 “益肝浓缩煎剂”、强肝胶囊对肝纤维化具有预防作用 ,在保护肝细胞方面 ,“益肝浓缩煎剂”作用较为明显。

雷公藤多甙对人工晶体植入术后抑制眼内纤维膜形成的实验研究

27只青紫蓝兔分为后房型人工晶体囊袋内植入术组；术后雷公藤多甙治疗组；术后激素治疗组。通过光镜和透射电镜动态观察术后眼内纤维膜形成的病理学变化，发现雷公藤多甙和激素治疗均能显著降低人工晶体植入术后眼内纤维膜形成，雷公藤多甙治疗优于激素治疗，可能与雷公藤多甙的抗炎作用和免疫抑制作用有关。

PPARγ在大鼠肝纤维化形成过程中的动态变化

研究表明，PPARγ在肝脏代谢功能方面发挥重要调节作用，其功能改变与一些肝脏疾病的发生发展有某种相关性。本研究针对大鼠正常肝组织及不同程度的肝纤维化组织中PPARγ的表达进行观察，旨在进一步研究PPARγ与肝纤维化发生机制的关系。