博莱霉素致肺纤维化大鼠模型的纤溶变化及低分子肝素的作用

目的探讨博莱霉素诱导大鼠肺纤维化过程中纤溶变化与肺纤维化的关系,观察低分子肝素的作用并探讨其机制。方法75只Wistar大鼠分为低分子肝素(LMWH)组、强的松组、低分子肝素和强的松联合用药组、模型组、对照组。应用气管内灌注博莱霉素A5制备大鼠肺纤维化模型,于第15天开始每天给药(低分子肝素或强的松或联合给药),第28、42、56天取肺组织行苏木精-伊红和Masson染色以观察其病理变化,免疫组织化学方法测定纤维蛋白溶解酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)的表达,加钙法测定优球蛋白溶解时间(ELT)。结果模型组PAI-1表达明显升高、ELT延长(均P<0.05),肺纤维化严重,但PAI-1表达与时间无相关性;LMWH组PAI-1表达持续降低,较强的松组显著,ELT明显缩短(均P<0.05),肺纤维化程度减轻;联合用药组肺纤维化程度减轻、PAI-1表达降低、ELT明显缩短(均P<0.05)。结论大鼠肺纤维化出现PAI-1高表达、ELT延长,纤溶活性下降。而LMWH能减轻大鼠肺纤维化,与强的松联合应用效果更明显,可能与抑制PAI-1表达、缩短ELT,提高纤溶活性有关。

PAI-1反义寡核苷酸对肾间质细胞抑制作用的实验研究

目的研究纤维蛋白溶解酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASODN)对大鼠肾间质细胞(NEK293)的抑制作用。方法采用RT-PCR、Western blot检测脂质体介导的PAI-1ASODN目的基因及蛋白的表达;通过细胞生长试验、流式细胞仪检测PAI-1 ASODN转染前后NEK293细胞增殖和凋亡的变化。结果PAI-1ASODN转染后可见NEK293中PAI-1mRNA及蛋白表达明显下调,与对照组相比较,可明显抑制细胞的增殖。诱导其凋亡(P<0.05)。结论PAI-1反义寡核苷酸具有明显抑制肾间质细胞增殖和诱导其凋亡的作用,转染脂质体介导的PAI-1 ASODN有望成为治疗肾纤维化的有效方法。