肿瘤ECM纤维生成与肿瘤转移研究进展

肿瘤转移是恶性肿瘤最为重要的生物学特征之一,同时也是影响预后及导致治疗失败的主要因素。近年来研究表明,肿瘤微环境中的胞外基质(extracellular matrix,ECM)纤维生成在肿瘤转移过程中发挥极为关键的作用。肿瘤ECM纤维生成会形成相互交联的网状结构,这种网状结构不仅对肿瘤细胞起到支持和营养作用,同时对肿瘤的生长和浸润也起到相当重要的作用。因此,阻断肿瘤组织ECM纤维生成有可能对肿瘤转移产生抑制作用,这使得ECM纤维生成作为治疗靶标,备受人们关注。该文对肿瘤ECM纤维生成与肿瘤转移研究进展进行综述,并对靶向肿瘤ECM纤维生成进行肿瘤转移治疗的策略进行探讨,为后续研究及指导临床提供重要参考。

人肌原纤维生成调节因子-1的研究进展

人肌原纤维生成调节因子-1(myofibrillogenesis regulator 1,MR-1)是一个新近报道的人类功能基因,定位于2q35,mRNA全长755bp,编码一段142个氨基酸组成的蛋白质,在心肌、骨骼肌、肾和肝中高表达。该基因与稍迟报道的发作性非运动源性运动障碍(paroxysmal nonkinesigenic dyskinesia,PNKD)基因三条转录剪接异构体中最短的PNKD-3在定位和序列上几乎完全一致。较长的剪接异构体MR-1L(PNKD-1)只在中枢神经系统中特异性表达,位于该亚型1号外显子上的碱基突变是导致PNKD的直接原因;MR-1S(PNKD-3)则被发现参与了心肌肥大的发生,其机制可能与调节肌肉收缩相关装置有关。

积雪草煎剂联合曲尼司特治疗纤维生成异常性皮肤病临床研究

目的:观察积雪草煎剂联合曲尼司特治疗纤维生成异常性皮肤病的临床疗效。方法:96例纤维生成异常性皮肤病患者按随机数字表法平均分为对照组和观察组。对照组48例予以曲尼司特治疗,观察组48例在对照组治疗基础上给予积雪草煎剂。比较两组患者临床相应指标、血清学指标及基质金属蛋白水平,同时比较临床疗效及并发症状况。结果:对照组有效率72.92%低于观察组有效率91.67%,差异具有统计学意义(P<0.05);与治疗前比较,两组治疗后临床相应指标、血清学指标及基质金属蛋白水平均发生变化,观察组治疗后温哥华瘢痕量表评分、瘢痕厚度、瘢痕面积、疼痛视觉模拟评分及瘙痒视觉模拟评分低于对照组,观察组治疗后转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)低于对照组,碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)高于对照组,观察组治疗后基质金属蛋白酶-2(matrix metallo preteinases-2,MMP-2)MMP-2、MMP-9水平低于对照组,MMP-2水平高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组间不良反应轻微,可以耐受,对研究未产生影响。结论:积雪草煎剂联合曲尼司特治疗纤维生成异常性皮肤病疗效确切,能降低成纤维细胞TGF-β1,增加b FGF合成,减少IL-6表达。

胆结石症患者纤维生成肝细胞的超微结构变化

目的探讨胆结石症患者肝细胞纤维生成的超微结构变化。方法收集10例胆结石症患者手术时提取的肝脏活体组织检查标本，在电子显微镜下观察其超微结构变化并作记录。结果6例肝细胞的细胞质内有局限性和弥漫性生长的胶原微纤维，甚至长入细胞核内。7例肝细胞出现较多的巨线粒体。其中的包涵物往往呈微纤维样，并能不断生长，穿越巨线粒体包膜。1例肝细胞中的微体能够生成胶原微纤维。1例肝细胞边缘出现类似成纤维细胞的囊泡。结论纤维化的肝细胞可成为肝纤维组织增生的一部分。

高膳食纤维低血糖生成指数的饮食指导对2型糖尿病患者血糖和BMI指数的影响

目的探讨高膳食纤维低血糖生成指数的饮食指导对2型糖尿病患者血糖和BMI指数的影响。方法选取2017年1月至2019年1月收治的93例2型糖尿病患者为研究对象,随机将其分为研究组47例和对照组46例,对照组给予常规护理,研究组在对照组的基础上实施高膳食纤维低血糖生成指数的饮食指导。比较两组患者血糖和BMI指数的改善情况。结果研究组空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组患者BMI指数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论2型糖尿病患者应用高膳食纤维低血糖生成指数的饮食指导,可有效控制患者血糖相关指数和BMI相关指标,值得临床推广应用。

成纤维细胞生成因子23在慢性肾脏病中的作用及其对预后的影响

成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor-23,FGF-23)是新近发现的调磷因子,它在体内的磷代谢过程中发挥着重要作用。慢性肾脏病患者常常出现钙、磷代谢紊乱,引发甲状旁腺功能亢进、骨矿化障碍、软组织钙化等表现,这些病理生理改变可降低患者的生活质量。近来研究发现,FGF-23与上述病理生理改变有关,影响慢性肾脏病,特别是终末期肾病患者的预后。

超脉冲CO_(2)点阵激光联合外用重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗痤疮凹陷性瘢痕疗效观察

目的:观察超脉冲CO_(2)点阵激光与外用重组人碱性成纤维细胞生长因子联合使用治疗痤疮凹陷性瘢痕的临床效果。方法:选取86例痤疮凹陷性瘢痕患者为研究对象,按治疗方式不同分为对照组(43例)和治疗组(43例),对照组患者应用超脉冲CO_(2)点阵激光进行治疗,治疗组在对照组基础上外用重组人碱性成纤维细胞生长因子喷雾,观察并比较2组患者临床疗效及2组治疗后的水肿时间、红斑持续时间、愈合时间及不良反应。结果:86例患者凹陷性瘢痕治疗后均有明显效果,治疗组总有效率(97.67%)与对照组(90.70%)比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗组水肿时间[(1.89±0.26)h]短于对照组[(3.27±1.19)h],红斑持续时间[(2.84±0.83)h]短于对照组[(6.13±1.58)h]、愈合时间[(8.04±0.76)d]短于对照组[(11.15±1.47)d],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:超脉冲CO_(2)点阵激光与外用重组人碱性成纤维细胞生长因子联合使用治疗面部痤疮凹陷性瘢痕安全有效,明显缩短了恢复时间。

环氧合酶-2在CCl_4诱导大鼠肝纤维化形成中的作用

目的探讨环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化形成过程中的作用。方法用50%CCl4经腹腔注射,每周2次共8周诱导雄性S-D大鼠肝纤维化模型。将S-D大鼠随机分3组:正常对照组给橄榄油腹腔注射;罗非昔布组在CCl4诱导肝纤维化模型的同时给予选择性COX-2抑制剂罗非昔布(按10 mg.d-1.kg-1体重溶于10 mL生理盐水中灌胃);模型对照组在CCl4诱导肝纤维化模型的同时给予同等体积的生理盐水灌胃。第8周末处死大鼠,病理组织学观察肝纤维化严重程度并评分,并通过Masson三色染色法将胶原染成蓝色,用图像分析仪自动分析胶原面积。用Western blot检测肝组织COX-2表达和Ⅳ型胶原。计数肝窦内α-SMA阳性的细胞数来观察肝星状细胞的活化。结果与肝纤维化模型组相比,罗非昔布干预组肝组织纤维化严重程度明显减轻(平均积分分别为:4.00±0.00vs2.89±0.60,P<0.05)、胶原面积也减少(分别为:30.7±8.9vs23.5±6.5,P<0.05)、肝窦内平均α-SMA阳性细胞数明显减少(分别为:12.5±1.3vs7.4±1.4,P<0.01);Western blot分析提示:与肝纤维化模型组相比,罗非昔布能降低Ⅳ型胶原表达、对COX-2表达无明显影响。结论COX-2在肝纤维化的形成过程中发挥重要作用,选择性COX-2抑制剂罗非昔布具有减轻或阻止肝纤维生成的作用。

人肌纤生成调节因子-1抗体的制备、鉴定及其在乳鼠心肌细胞中的应用

目的:制备抗人肌纤生成调节因子-1(hMR-1)的多肽抗体,并对其纯度、特异性、效价及适用性进行检测和鉴定。方法:TMHMM、DNAstar等软件分析hMR-1蛋白序列,选取2段优势抗原序列合成多肽并与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联,混合后免疫家兔。抗血清经过免疫亲和层析法纯化得到多克隆抗体。用ELISA法检测效价,Western blotting和细胞免疫荧光(immunocytofluorescent,ICF)法鉴定其特异性和适用范围,并观察其在乳鼠心肌细胞中的应用情况。结果:(1)抗体效价达1∶105,Western blotting检测到与预测分子量17kD相符的条带,ICF图像背景低,阳性结构清晰。(2)乳大鼠心肌细胞实验发现荧光信号浓集于核周,过表达hMR-1后荧光强度明显高于空载对照和正常对照。结论:制备的抗hMR-1多肽抗体效价及特异性可用于Western blotting及ICF实验,可识别人源性和大鼠源性抗原表位,该工作将为进一步深入研究新基因hMR-1的功能奠定基础。

几种细胞因子对骨髓基质成纤维细胞集落形成的影响及意义

目的 :观察细胞因子粒 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)、干细胞因子 (SCF)、白细胞介素 3(IL 3)、肿瘤坏死因子 (TNF)及其联合应用对骨髓基质成纤维细胞集落生成单位 (CFU F)形成的作用。方法 :应用体外骨髓基质细胞贴壁培养的方法 ,分别加入不同的细胞因子 ,进行培养 2周时的CFU F计数和培养 4周时贴壁细胞的增殖状态观察。结果 :GM CSF、SCF及TNF对骨髓基质细胞的增殖有明显的促进作用。结论 :体外加入某些细胞生长因子对骨髓基质细胞具有明显的扩增作用 ,提示基质细胞在体外适当细胞因子作用下扩增后进行回输 。

碱性成纤维细胞生长因子对海马伞切断大鼠海马神经细胞增殖的影响

目的 探讨碱性成纤维细胞生成因子 (bFGF)对海马伞切断造成的阿尔茨海默氏病 (AD)模型大鼠海马齿状回神经细胞增殖的影响。方法 AD处理组及AD对照组大鼠单侧海马伞切断制造阿尔茨海默病模型 ;正常对照组注射生理盐水。AD处理组造模后每天侧脑室注射bFGF共 7天 ;AD对照组及正常对照组同时间注射生理盐水。BrdU标记增殖细胞。TUNEL方法标记DNA片段 ,原位检测凋亡细胞。计数海马齿状回各区域BrdU阳性细胞与凋亡细胞数。结果 AD处理组大鼠与AD对照组大鼠相比 ,海马齿状回BrdU阳性细胞增加明显 (P <0 .0 1 ) ,而凋亡细胞差异不显著 (P >0 .0 5)。AD对照组大鼠与正常对照组大鼠相比 ,海马齿状回BrdU阳性细胞数及凋亡细胞数差异均不显著 (P >0 .0 5)。结论 bFGF可促进AD模型大鼠海马神经细胞的增殖。

成纤维细胞生长因子对2型糖尿病患者拔牙并发感染的预防作用

目的 探讨成纤维细胞生长因子对2型糖尿病患者拔牙并发感染的预防作用。方法 本研究中用碱性成纤维细胞因子进行感染预防的患者76例,对照组90例患者,患牙总颗数324颗。干预组接受碱性成纤维细胞生长因子预防处理,使用重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶进行预防,常规处理组使用常规漱口液进行消毒预防感染。随访观察1w后感染情况。结果 使用碱性成纤维细胞因子组术后随访一周有2例患者出现感染,感染率2.63%,低于对照组,但无统计学差异。同时测定感染相关基础指标,使用碱性成纤维细胞因子组术后1w白细胞总数（6.67±1.08）×109/L,显著低于对照组（P〈0.05）。CRP水平为（90.33±12.95）mg/L,也显著低于对照组水平（P〈0.05）。男性中使用碱性成纤维细胞因子组感染发生率为2.7%,对照组为6.38%,虽然未发现统计学差别,但是2组患者的白细胞总数和CRP水平差异明显（P〈0.05）,使用碱性成纤维细胞因子进行感染预防干预组的白细胞总数和CRP水平均显著低于对照组的水平（P〈0.05）。在女性中也发现了类似的结果。结论 牙齿拔除手术后,预防术后感染,进而预防控制干槽症等的发生,应用成纤维细胞生长因子取得了满意的效果。

碱性成纤维细胞生长因子在正常及不同类型腰椎间盘突出组织中的表达及其意义

目的:研究碱性成纤维细胞生成因子在不同类型的椎间盘组织中的表达及其意义,以期探讨腰椎间盘退行性变分子生物学机制。方法:中南大学湘雅二医院2002-12/2003-05手术中所获得的椎间盘组织标本54例,其中41例来源于腰椎间盘突出症患者手术中取得的椎间盘组织(包含型17例,非包含型24例),13例来源于脊柱侧凸前路手术及腰椎骨折前路手术所获得的椎间盘组织。将这些椎间盘组织作苏木精-伊红染色及碱性成纤维细胞生长因子免疫组化检测,并作对照分析。结果:对照组中椎间盘组织碱性成纤维细胞生长因子表达为阴性,突出椎间盘组织中包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性表达率为47%(8/17),非包含型为83%(20/24),包含型及非包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性率均高于对照组(P<0.01)。包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性表达率低于非包含型(P<0.05)。非包含型中病程在1年以上的碱性成纤维细胞生长因子阳性率明显低于病程在1年之内者(P<0.05)。结论:突出椎间盘组织可以诱导产生碱性成纤维细胞生长因子且与突出类型、病程相关,提示碱性成纤维细胞生长因子在腰椎间盘组织退变、自发性吸收中有重要的促进作用。

成纤维细胞生长因子促“自身血管搭桥”的研究进展

“自身血管搭桥”是人们正在探索的治疗冠心病的新战略。本文就成纤维细胞生长因子促“自身血管搭桥”的研究进展做一综述。

TRAP阳性细胞及HIF-1α、VEGF、FGF-2表达在老年股骨头坏死修复反应中的分布及其意义

目的探讨股骨头坏死的修复反应机制。方法检测51例老年患者(≥60岁)人工关节置换术后股骨头标本的TRAP阳性细胞及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管生成因子(VEGF)、纤维生成因子-2(FGF-2)表达的分布。结果耐酒石酸盐酸性磷酸酶(TRAP)阳性细胞主要存在于全部股骨头坏死修复区的过渡带,并随着放射学分期的进展,沿着修复区的过渡带向中心分布。HIF-1α表达在靠近坏死区的纤维坏死带和过渡带的内皮细胞;VEGF表达在修复区的水肿带;FGF-2则表达在整个修复区的血管壁和骨髓细胞。结论在晚期股骨头坏死的坏死区无HIF-1α、VEGF、FGF-2的表达,而参与修复区的血管生成反应;TRAP阳性细胞则出现在骨塌陷后的新生骨周围,并沿着新生血管向中心分布。

人伴肌动蛋白相关锚定蛋白基因cDNA的克隆与功能分析

小鼠伴肌动蛋白相关锚定蛋白 (N RAP)是已知的与肌纤维生成有关的细胞骨架蛋白 ,但是 ,与此对应的人类N RAP基因的cDNA序列及其功能一直是未知的 .为了明确N RAP基因在人类中所起的作用 ,利用生物信息学分析工具和分子生物学技术 ,成功地克隆了人N RAP基因 .人N RAP基因cDNA序列含有一个 5 0 88bp的开放读码框 ,与小鼠N RAP基因有 86 %的相似性 .染色体定位分析表明 ,人N RAP基因定位于 10 q2 5～q2 6之间 ,编码区由 4 1个外显子组成 ,与HABP2和CASP7紧密连锁 .电子表达谱分析表明 ,肌肉、心脏、脑、脊髓和前列腺有人N RAP基因不同长度的cDNA序列 .人N RAP与小鼠N RAP蛋白质序列有 88%的相似性 ,与人Nebulin有约 6 3%的相似性 ,与小鼠Nebulin有约 5 9%的相似性 .结构域分析发现 ,N端为LIM结构域 ,从第170位氨基酸开始 ,连续出现 4 0个Nebulin相关重复序列 .RT PCR实验表明 ,人N RAP基因在成人脑、骨骼肌和心脏组织中都有表达 ,在骨髓中不表达 .亚细胞定位研究显示 ,人N RAP基因表达于胞浆 .基于序列相似性、结构域分析、表达谱分析和亚细胞定位研究 ,可以推测人N RAP与小鼠N RAP同属Nebulin家族 。

MR-1S融合蛋白的表达、纯化与保存及其抗血清的制备

目的通过人肌纤生成调节因子1(hMR-1S)基因重组表达获得MR-1S-His融合蛋白,纯化后制备抗MR-1S抗血清;同时确定该蛋白保存的稳定体系,为研究MR-1S蛋白理化性质及其功能提供关键的原料。方法利用原核表达载体pET21a(+),构建pET21a-MR-1S重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导MR-1S-His融合蛋白表达,亲和纯化后Western blot鉴定;进一步用该融合蛋白免疫新西兰兔,制备抗MR-1S的多克隆抗体。同时通过在不同温度条件下,对4种不同的稳定体系中保存后蛋白活性测定进行比较,确定最合适的稳定保存体系及条件。结果构建了重组质粒pET21a-MR-1S,并在BL21中进行可溶性表达,经Western blot鉴定确认;免疫新西兰兔获得了抗MR-1S抗血清;确定了合适的稳定体系及保存条件。结论在非变性条件下实现了可溶性MR-1S融合蛋白的表达和稳定保存,进一步制备的抗MR-1S抗血清为研究MR-1S的性质及功能奠定了基础。