Klotho-FGF23轴调控Wnt/β-catenin信号通路在CKD-MBD中的研究进展

慢性肾脏病骨矿物质和代谢异常(CKD-MBD)是慢性肾脏病的常见并发症之一。其主要临床表现为继发性甲状旁腺功能亢进、钙磷代谢异常、骨骼成分与结构的改变、血管及软组织的钙化。CKD-MBD对患者的生存质量和长期预后有重要影响,其病理生理过程中的信号调控机制越来越受到关注,成为近年来医学研究的热点。其中,成纤维细胞因子23(FGF23)参与的钙磷代谢调节在CKD-MBD中起重要作用。且Klotho-FGF23轴调控Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路在肾间质纤维化和CKD-MBD的发生、发展中均有重要作用。随着研究的深入,Klotho-FGF23轴调控Wnt/β-catenin信号通路有望成为CKD-MBD治疗的新靶点。

基于调控FGF23/Klotho信号通路分析益肾宁改善慢性肾脏病钙磷代谢紊乱的作用机制

目的:基于调控成纤维细胞生长因子23(FGF23)/Klotho信号通路分析益肾宁改善慢性肾脏病(CKD)钙磷代谢紊乱的作用机制。方法:选取72例CKD 3期钙磷代谢紊乱患者,随机分为对照组和治疗组,每组36例。对照组给予纠正水电解质紊乱,调节血压,优质低蛋白、低磷饮食,口服碳酸钙片等常规治疗,治疗组在对照组基础上给予益肾宁治疗,两组患者均治疗8周。比较两组患者的临床疗效,以及治疗前及治疗4、8周时血清FGF23、Klotho蛋白、血钙(Ca)、血磷(P)、全段甲状旁腺激素(iPTH)、血肌酐(SCr)水平,分析FGF23、Klotho蛋白与血Ca、血P、iPTH、SCr的相关性。结果:治疗组总有效率为80.56%(29/36),对照组总有效率为63.89%(23/36),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗4、8周,两组患者FGF23、血P、iPTH、SCr水平均较治疗前下降(P<0.05),治疗组FGF23、血P、iPTH、SCr水平均低于同期对照组(P<0.05);两组患者Klotho蛋白、血Ca水平均较治疗前升高(P<0.05),治疗组Klotho蛋白、血Ca水平均高于同期对照组(P<0.05)。FGF23与SCr、血P、iPTH呈正相关,与血Ca呈负相关;Klotho蛋白与SCr、血P、iPTH呈负相关,与血Ca呈正相关。结论:益肾宁能改善CKD患者的临床症状及肾功能,并通过调控FGF23/Klotho信号通路改善钙磷代谢紊乱。

益气化瘀通腑法对慢性肾脏病2~3期患者肾间质纤维化、血清FGF23及Klotho蛋白影响

目的:探讨益气化瘀通腑法对慢性肾脏病2~3期患者肾间质纤维化、血清FGF23及Klotho蛋白的影响,并分析其对肾小管间质损伤的保护机制。方法:选择2019年1月至2020年3月94例慢性肾脏病早中期患者进行前瞻性研究,采用随机数字表法将纳入研究的病例分为研究组和对照组各47例,两组患者均接受基础对症治疗和常规西药治疗,研究组在此基础上采取益气化瘀通腑法进行治疗,4周为1个疗程,两组患者均连续治疗3个疗程,疗程结束后统计疗效。对比两组患者治疗前后中医证候积分、血清转化生长因子-1(TGF-1)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、成纤维细胞生长因子23(FGF23)、Klotho蛋白、胱抑素C(Cys-c)和尿N-乙酰-D-葡萄糖苷酶(NAG)含量。结果:经秩和检验显示,研究组疗效分级情况明显优于对照组(P<0.05);治疗后两组中医证候积分相较于治疗前均明显降低,且研究组低于对照组(P<0.05);治疗后两组血清TGF-1、TIMP-1含量相较于治疗前均明显降低,且研究组低于对照组(P<0.05);治疗后两组血清FGF23水平相较于治疗前均明显降低,且研究组低于对照组(P<0.05),治疗后两组血清Klotho蛋白水平相较于治疗前均明显升高,且研究组高于对照组(P<0.05);治疗后两组Cys-c、NAG含量相较于治疗前均明显降低,且研究组低于对照组(P<0.05)。结论:益气化瘀通腑法对慢性肾脏病早中期患者疗效较好,可有效改善患者肾间质纤维化、调节血清FGF23及Klotho蛋白水平,并可能通过纠正钙磷紊乱的作用机制保护肾小管间质。

老年骨质疏松与血浆Klotho蛋白、FGF23蛋白水平的相关性

目的研究血浆Klotho蛋白、成纤维细胞生长因子(FGF)23蛋白水平与老年骨质疏松(OP)的相关性。方法年龄≥60岁OP患者92例为研究组,年龄、男女比例一致、无OP老年人92例为对照组,应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血浆Klotho蛋白、FGF23蛋白水平,分析其与老年OP的相关性。结果研究组血浆Klotho蛋白、FGF23蛋白水平明显低于对照组,女性患者比例明显高于对照组(P<0.01)。两组年龄、体质指数(BMI)、血脂异常、糖尿病患者无统计学差异(P>0.05)。Logistic多因素回归分析提示低血浆Klotho蛋白水平是老年OP的独立危险因素(P=0.000)。结论低血浆Klotho蛋白水平与OP发病有关,推测其作用机制可能与FGF23通路有关,监测血浆Klotho蛋白水平对OP预防、诊断及预后判断有重要临床意义。

益气健脾补肾方对脾肾气虚证慢性肾炎患者肾功能及FGF23-Klotho轴的影响

目的:探究益气健脾补肾方对脾肾气虚证慢性肾炎患者肾功能及成纤维细胞生长因子23(FGF23)-Klotho轴的影响。方法:便利抽样法选取2017年08月—2019年10月我院收治的脾肾气虚证慢性肾炎患者93例,按照随机字母表分组,对照组采用常规西医治疗,观察组在对照组基础上给予益气健脾补肾方,对比两组临床疗效、肾功能指标、FGF23、Klotho蛋白水平及安全性。结果:观察组总有效率89.13%高于对照组70.21%(P<0.05);治疗后,观察组24 h尿蛋白定量、血尿酸(UA)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组FGF23水平(328.86±31.73)pg/ml低于对照组(350.09±27.51)pg/ml,Klotho蛋白水平(4.29±1.36)ng/ml高于对照组(3.57±1.42)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.05);两组均无不良事件发生。结论:益气健脾补肾方治疗脾肾气虚证慢性肾炎效果确切,可有效改善患者肾功能,进而下调FGF23水平,促进Klotho蛋白表达,且安全性较高。

Klotho蛋白通过Wnt／β-catenin信号通路下调高磷诱导的大鼠成骨细胞分泌成纤维细胞生长因子23

成纤维细胞生长因子23（FGF23）升高的CKD患者全因死亡率增加，左室射血分数降低，是左室肥厚的独立危险因素，而可溶性Klotho蛋白与血清FGF23呈负相关。本研究拟通过重组小鼠Klotho蛋白干预高磷刺激的成骨细胞，观察Klotho蛋白对大鼠成骨细胞分泌FGF23的影响，并对其作用机制做初步探讨。

Klotho基因调控的FGF23/FGFR1信号通路对人肾小管上皮细胞羟化酶表达的影响及肾元颗粒的干预作用

目的:探讨Klotho/FGFR1/FGF23信号通路对人肾小管上皮细胞(HK-2)羟化酶表达的影响及肾元颗粒含药血清的干预作用。方法:以重组人FGF23加入HK-2细胞培养液建立细胞模型,分为正常组、模型组、FGFR1阻断剂组、ERK阻断剂组及肾元颗粒组。干预48h后,采用Western Blot及RT-PCR检测Klotho、FGFR1、Egr1、CYP24、CYP27B1蛋白及mRNA表达水平,Western Blot分析各组细胞ERK及磷酸化ERK(p-ERK)水平,免疫共沉淀检测法分析Klotho与FGFR1、FGF23与FGFR1抗体复合物。结果:与模型组比较,肾元颗粒组Klotho蛋白及mRNA的表达显著升高(P<0.05),FGFR1的表达差异无统计学意义,Egr1、CYP24蛋白及mRNA的表达显著升高(P<0.05),p-ERK水平显著升高(P<0.05),CYP27B1蛋白及mRNA的表达显著降低(P<0.05);免疫共沉淀显示肾元颗粒组Klotho与FGFR11免疫复合物、FGF23与FGFR1免疫复合物较模型组均显著升高(P<0.05)。结论:外源性FGF23颗粒能增强HK-2细胞表达Klotho/FGFR1/FGF23复合物,诱导Egr1及CYP24表达,抑制CYP27B1表达,肾元颗粒含药血清能显著增强FGF23诱导的这一信号通路的表达,推测肾元颗粒改善CKD钙磷代谢的机制与调节这一信号通路有关。

成纤维细胞生长因子23的研究进展

成纤维细胞生长因子（fibroblastgrowthfactor，FGF）是由FGF基因家族编码的结构相关的一组蛋白，按蛋白质pH值可分为酸、碱两类，按分泌类型分为旁分泌型和内分泌型。FGF家族目前有23个成员，通过复杂的信号转导通路在细胞代谢、增殖、分化和迁移等方面发挥着作用。内分泌型FGF因随血液循环对整个机体起着重要的调节作用而逐渐引起人们的重视，近来研究表明内分泌型FGF-23在多组织或器官中发挥重要作用。FGF-23在调节机体磷代谢、

肾元颗粒通过调控FGF23/CaMKⅡ信号通路对糖尿病肾病db/db小鼠心肌肥大与凋亡的影响

目的:通过观察db/db糖尿病肾病(DN)小鼠的心肌肥大和心肌损伤,进而探讨肾元颗粒改善DN小鼠心肌肥大和凋亡的可能作用机制。方法:db/db小鼠45只随机分为模型组、厄贝沙坦组和肾元颗粒组,15只同背景野生型(WT)小鼠为空白组。ELISA检测血清成纤维细胞生长因子23(FGF23)和尿微量白蛋白含量;全自动生化仪检测肾功能;小鼠肾脏和心脏病理采用HE和Masson染色;Real-time PCR肾脏Kl和心脏ANP、Bax、Bcl-2 mRNA;Western blot检测肾脏Kl和心脏Bax、Bcl-2蛋白;免疫组化检测心脏ANP、p-CaMKⅡ蛋白含量。结果:与空白组比较,模型组小鼠肾单位出现受损,小球系膜基质增多,基底膜增厚,肾小管上皮细胞肥大,心脏心肌细胞排列紊乱,体积增大,伴有明显的胶原纤维沉积,血清FGF23、BUN、Scr和24h尿微量白蛋白含量增加(P<0.01),肾脏Kl mRNA和蛋白显著减少(P<0.01),心脏ANP mRNA、Bax mRNA和蛋白表达增加(P<0.01),Bcl-2 mRNA和蛋白表达量减少(P<0.01),心脏p-CaMKⅡ蛋白含量增加;灌胃12周后,肾元颗粒组和厄贝沙坦组肾脏和心脏病理表现均显著减轻,血清FGF23含量减少(P<0.05,P<0.01),肾脏Kl和心脏Bcl-2mRNA和蛋白含量增加(P<0.01),心脏ANP mRNA和Bax mRNA及蛋白含量减少(P<0.01),心脏p-CaMKⅡ蛋白表达减少。结论:肾元颗粒可通过上调肾脏Kl蛋白表达,降低CaMKⅡ活性,抑制FGF23/CaMKⅡ信号通路来抑制肥大细胞表达,降低凋亡的发生,达到心肌细胞的保护作用。

中医药治疗慢性肾脏疾病矿物质和骨代谢异常相关信号通路研究进展

中医药在治疗慢性肾脏病矿物质和骨代谢异常(CKD-MBD)具有一定优势,近年来出现许多中药复方及中药单体治疗CKD-MBD的研究。通过文献检索发现,中药治疗CKD-MBD相关通路的机制研究中,以中药自拟复方研究为主,作用途径涉及纤维细胞生长因23/Klotho(FGF23/Klotho)信号通路、Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路、核转录因子-κB受体活化因子/核转录因子-κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)系统等多条信号通路,中药能通过调节此系列信号通路改善钙磷代谢、骨代谢紊乱、调控炎症反应、氧化应激、细胞凋亡和自噬,从而治疗CKD-MBD。该文将对这些信号通路和中药治疗CKD-MBD在作用机制领域取得的研究成果进行介绍,以期为中药治疗CKD-MBD的相关研究提供思路和参考。