纤维网状细胞通过促进线粒体凋亡对脓毒症急性肾损伤改善作用的研究

目的探讨纤维网状细胞(FRC)通过促进线粒体凋亡对脓毒症急性肾损伤(AKI)的改善作用。方法取10~12周龄的C57BL/6雄性小鼠分别进行小鼠原代肾小管上皮细胞(TECs)及小鼠肠系膜脂肪组织来源的FRC的分离培养,采用流式细胞术鉴定FRC和原代TECs、免疫荧光检测TECs AQP1的表达、油红染色鉴定FRC的干细胞特性。将TECs分为NC组、LPS组与LPS-FRC组,采用流式细胞术检测3组TECs JC-1单体百分比、qRT-PCR检测炎症因子[白细胞介素(IL)-1和IL-6]mRNA表达水平、Western Blot检测自噬相关蛋白(Pink1、PARKIN)及氧化应激蛋白(HO-1)表达水平、CCK-8试剂盒检测TECs活力并进行比较。结果成功分离并鉴定FRC及小鼠原代TECs。LPS组IL-6、IL-1的mRNA表达水平和JC-1单体百分比均高于NC组及LPS-FRC组,LPS-FRC组IL-6、IL-1的mRNA表达水平均高于NC组(P<0.05)。LPS组OD值低于NC组,LPS-FRC组OD值高于LPS组(P<0.05)。和NC组比较,LPS组Pink 1、PARKIN、HO-1蛋白表达水平均增高;和LPS组相比,FRC-LPS组细胞Pink 1和PARKIN蛋白表达水平增加,HO-1蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论FRC可促进TECs的线粒体自噬,改善脓毒症AKI。

小鼠脾脏成纤维网状细胞的分离、培养及鉴定

目的建立小鼠脾脏基质细胞培养的方法 ,分离出成纤维网状细胞并对其进行鉴定。方法取健康C57小鼠脾脏,胶原酶消化后,用磁珠分选出CD45-脾脏基质细胞,接种于α-MEM培养基,传代培养待其稳定生长。流式细胞仪进一步分选出成纤维网状细胞(gp38+CD31-),并用PCR、免疫荧光的方法检测其趋化因子表达。结果利用磁珠分离出脾脏的基质细胞培养后可以稳定传代,成功的分选出小鼠脾脏成纤维网状细胞(gp38+CD31-),并检测到其CCL19和CCL21的表达。结论成功分离培养脾脏基质细胞,并分选出有功能的成纤维网状细胞,为实验研究提供稳定的细胞来源。

紫外线诱导下的真皮成纤维细胞亚型改变及硅酸锌生物陶瓷对光损伤皮肤的修复作用

目的紫外线B(Ultraviolet B,UVB)对皮肤的损害包括破坏皮肤屏障功能、引发皮肤疾病以及促进恶性肿瘤的发生。真皮层的成纤维细胞(Fibroblasts,Fb)可分为真皮乳头层成纤维细胞(Papillary fibroblasts,Fp)与真皮网状层成纤维细胞(Reticular fibroblasts,Fr),在皮肤再生过程中扮演重要角色。本研究阐明光损伤会导致不同亚型Fb的改变,并针对这一靶点,寻找一种可以修复光损伤的治疗策略。方法构建皮肤光损伤小鼠模型,采集生物样本进行HE和Masson染色评估组织结构,DHE染色检测组织中活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平,γH2AX染色标记DNA损伤的细胞,荧光染色Lrig1及Dlk1定性定量不同Fb亚型。另外,UVB诱导下培养Fb,流式细胞术检测Fb的表面标志物,qPCR检测胶原纤维合成分泌相关mRNA表达。在体外试验及体内光损伤模型中,分别应用ZnCS配制的离子溶液及装载ZnCS的微针贴片干预,进行Lrig1和DHE、γH2AX荧光染色。结果急性光损伤皮肤真皮层炎症细胞浸润,胶原纤维排列紊乱,ROS表达水平在表皮及真皮浅层显著增加,伴有真皮浅层Fp的DNA损伤更甚。与对照小鼠相比,光损伤皮肤真皮层Lrig1+Fb显著减少,Dlk1+Fb没有明显差异。Fb经UVB辐照后,流式检测示Fb中Lrig1+Fb比例明显减少,同时COL1A1表达下调,MMP3和MMP9表达上调;最后,硅酸盐生物陶瓷(ZnCS)促进Fp的增殖,ZnCS干预后,光损伤皮肤的ROS生成和损伤情况明显减轻。结论本研究首次发现Fp减少与光损伤进展有关;同时,对Fp增殖有促进作用的ZnCS对光损伤皮肤具有显著修复作用。

淋巴结纤维母细胞性网状细胞肿瘤2例临床病理分析

目的分析纤维母细胞性网状细胞肿瘤(fibroblastic reticular cell tumour,FRCT)的临床病理学特征。方法回顾性分析2例淋巴结FRCT的临床病理资料,并复习相关文献。结果 2例患者均行肿大淋巴结活检术。镜检:淋巴结结构破坏,大量梭形细胞增生,呈结节状或膨胀性生长。梭形细胞呈席纹状排列,瘤细胞之间常穿插纤细的胶原纤维,并可见大量炎性细胞浸润。梭形细胞较肥胖,细胞边界不清,空泡状核,核膜薄且有褶皱,核仁明显,核分裂可见。免疫表型:例1瘤细胞actin、SMA和CD68均阳性,S-100弱阳性,CD30、PAX-5、ALK、desmin、CK(AE1/AE3)、CD21、CD35、CD23和CD1a均阴性,EBER原位杂交检测阴性;例2瘤细胞CK(AE1/AE3)、desmin、CD68和SMA均阳性,CD21、CD35、CD23和CD1a均阴性,EBER原位杂交检测阳性。结论 FRCT是一种罕见的肿瘤,多发生于淋巴结,可分为CK阳性和CK阴性两类,其诊断主要依赖于病理学形态和免疫表型,例2EBER原位杂交检测阳性,提示FRCT的发生可能与EBV感染有关。

纤维母细胞性网状细胞肿瘤的临床病理学特征分析

目的分析纤维母细胞性网状细胞肿瘤的临床病理学特征。方法对1例淋巴结纤维母细胞性网状细胞肿瘤的临床资料进行回顾性分析,同时结合相关文献进行复习。结果患者左侧颈部肿块间歇性增大3年。取左侧颈部淋巴结活检。光镜下淋巴结结构破坏,可见异型肌纤维母细胞样细胞呈条束状、席纹状排列,瘤细胞呈卵圆形、梭形,胞质粉染,边界不清,空泡状核,见1～3个小核仁,核分裂偶见(平均10/10HPF),可见病理性核分裂像。免疫组织化学结果:瘤细胞Vim、α-SMA、Desmin、CD68弥漫强阳性;Calponin、S100弱阳性,Ki-67阳性率约20%,余抗体LCA、CD20、CD3、AE1/AE3、EMA、CD30、CD15、CD1α、HMB45、MelanA、CD34、ALK、CD21和CD35阴性。结论纤维母细胞性网状细胞肿瘤极为罕见,其生物学行为很难判断。临床上需与滤泡及交指状树突细胞肿瘤等鉴别。

扁桃体纤维母细胞性网状细胞肿瘤1例并文献复习

目的探讨纤维母细胞性网状细胞肿瘤(fibroblastic reticular cell tumor,FRCT)的临床病理学特点、诊断及鉴别诊断。方法回顾性分析1例扁桃体FRCT的临床病理学特征并复习相关文献。结果患者行右侧扁桃体肿物活检,镜下见扁桃体正常结构被破坏,肿瘤细胞增生,肿瘤细胞梭形、多边形、圆形或卵圆形,呈束状、漩涡状或席纹状排列,肿瘤细胞间可见多量散在的嗜酸性粒细胞和中性粒细胞,肿瘤细胞边界不清,细胞核呈空泡状,核膜光滑或不规则,细胞核有轻~中度异型性,可见核仁,核分裂易见(>10/50 HPF)。免疫表型:肿瘤细胞Kp-1、vimentin均阳性,CK(AE1/AE3)和SMA均灶状阳性,S-100蛋白弱阳性,CD20、ALK、CD3、CD23、CD21、CD35、CD34、desmin、p63、CK5/6和CKL均阴性,EBER原位杂交检测阴性。结论 FRCT临床较少见,发生于扁桃体者更为少见,诊断主要依赖病理学及免疫表型。

纵隔纤维母细胞性网状细胞肿瘤1例

患者女,32岁。因口腔糜烂伴疼痛27天,加重3天就诊。查体:口腔黏膜可见红斑、糜烂、结痂,眼结膜充血,可见渗出物,躯干四肢散在红斑水疱,手掌红斑。

细胞角蛋白阳性淋巴结间质网状细胞肿瘤临床病理观察

目的探讨细胞角蛋白阳性淋巴结间质网状细胞肿瘤（CIRCT）的临床病理学特征、组织发生、生物学行为及预后。方法应用光镜、免疫组化染色及电镜观察1例男性患者腹膜后CIRCT的组织病理学特点，并结合文献进行讨论。结果光镜下淋巴结结构大部分破坏，代之以大量呈席纹状、束状或不规则排列的梭形瘤细胞；瘤细胞胞膜不清，胞质淡伊红染，核轻度异型，核膜清晰，呈空泡状，核仁明显，可见病理性核分裂象0～2个／10HPF。瘤细胞vimentin、CK8／18、SMA和EGFR（＋），CD21＋35、clusterin、CD1a、desmin、S-100、CD68和ALK-1（-）。电镜下瘤细胞表面有纤细的胞质突起，相互交错排列，细胞间见发育不良的桥粒样结构，单个细胞外或细胞巢间有基底膜样物质和长间距胶原围绕。结论CIRCT起源于淋巴结辅助树突状细胞中的纤维母细胞性网状细胞（FBRC），非常少见，易被误诊为其他辅助树突状细胞肿瘤甚至转移癌，免疫组化检查是确诊的主要依据，电镜检查也极具参考价值。

不同亚型的真皮成纤维细胞在皮肤再生发育与稳态维持中作用的研究进展

真皮层成纤维细胞分为两种不同的亚型,即真皮浅层的乳头状成纤维细胞(Papillary Fibroblasts,Fp)与真皮深层的网状成纤维细胞(Reticular Fibroblasts,Fr),在细胞功能、分化潜能等方面均存在明显差异,在创伤愈合、毛囊形成与再生以及皮肤老化中的作用亦有不同。本文对两种细胞的形态、功能、来源、分化及特异性表达等方面的不同,以及两者在皮肤再生与稳态维持中的作用进行综述。

淋巴间质细胞及其亚群

次级淋巴器官（SLOs）形成一个网状系统（结构和功能特异的组织），包括脾、淋巴结、肠道集合淋巴结和其他类型的粘膜伴随淋巴组织（MALT），这些组织器官构成了一个过滤和监视系统，用于捕获病原体和病原体的抗原及提呈抗原给适当的免疫细胞。次级淋巴器官的微结构是由内皮细胞系统和间充质的间质细胞组成的。我们对间质细胞的了解远不及对造血细胞的了解。在这篇综述中，我们探讨次级淋巴器官中的许多间质细胞和各种间质细胞亚群，以及它们表达的因子和可能发挥的作用。

细胞角蛋白在淋巴结固有细胞中的表达

目的研究细胞角蛋白在淋巴结非上皮细胞中的表达,以阐明用角蛋白染色检测微转移的特异性。方法用免疫组化方法检测AE1/AE3、AE1、AE3和CK8在肠梗阻和Crohn病患者肠系膜淋巴结的表达。结果AE3和CK8染色中分别有29枚(45.3%)和64枚(100%)淋巴结出现阳性细胞,AE1/AE3和AE1染色中均未观察到阳性细胞;同时CK8染色中血管内皮细胞也出现阳性表达。结论淋巴结的纤维型网状细胞也可出现细胞角蛋白表达,用免疫组化检测微转移时AE1/AE3是可选择的抗体,但同时需结合细胞的组织形态学。

儿童胸腔纤维母细胞性网状细胞肿瘤一例并文献复习

目的:探讨儿童胸腔纤维母细胞性网状细胞肿瘤(FRCT)的临床特征、病理学特点、治疗及预后。方法:对郑州大学第一附属医院1例儿童胸腔FRCT患者的临床资料进行回顾性分析,并结合相关文献进行复习。结果:患儿,男性,9岁,主要表现为消瘦、胸闷,CT示右侧胸腔巨大占位;病理形态学检查结果为梭形细胞间叶源性肿瘤,免疫组织化学检查确诊为FRCT。经序贯化疗、手术切除、化疗,最终仍出现肿瘤复发伴全身多发转移,放弃治疗。结论:儿童FRCT极为罕见,诊断主要依赖典型细胞形态学及免疫组织化学检查。目前FRCT没有标准治疗方案,化疗、手术效果均不理想,预后不良。

SFTS病毒感染脾脏网状成纤维细胞系的建立

目的分离、纯化、培养和永生化小鼠脾脏原代网状成纤维细胞（fibroblastic reticular cells, FRCs），筛选和鉴定永生化的FRCs克隆，证明永生化FRCs可用于SFTS病毒（SFTSV）体外感染研究。方法使用磁珠和流式细胞分选等技术分离、纯化和培养小鼠脾脏FRCs；使用SV40永生化FRCs，筛选单克隆并培养50代以上，使用转录组测序（RNA Sequencing, RNA-seq）和激光共聚焦技术对原代和永生化的FRCs进行比较和鉴定；用SFTSV体外感染的永生化的FRCs。结果成功得到4个永生化的FRCs克隆；鉴定结果显示Clone02符合FRCs表型，且纯度均达到了99%；转录组测序相关性分析显示Clone02细胞株基因表达与原代FRCs接近；基因表达分析和激光共聚焦实验证实Clone02的表型和原代FRCs相同；SFTSV在MOI值0.5的条件下即可成功感染Clone02细胞。 结论永生化的FRCs Clone02细胞保持了原代细胞的形态学、免疫学特征，与原代FRCs基因表达谱接近，可被SFTSV体外感染，是一个新的有潜力的SFTSV体外研究的细胞平台。

纤维母细胞性网状细胞肿瘤一例及文献复习

患者，女，62岁，因“全身多部位淋巴结渐进性肿大8月余，发热7d”入院，患者8个月前发现双侧下颌、颈部、腋窝及腹股沟等多处出现肿大结节，尤以右下颌明显，最大者约为4cm ×1．5cm 大小，呈无痛性，当时未予注意，入院前7d突发高热，体温最高时可升至39．5℃，于当地诊所行抗生素静滴，疗效欠佳，仍高热不退，为求进一步治疗于本院血液科就诊，发病以来，无夜间盗汗，无恶心呕吐及腹痛腹泻，自诉伴有明显消瘦，体重下降约11kg，其余未见明显异常。查体：慢性病容，双侧下颌、颈部、腋窝、腹股沟等处均可触及肿大的浅表淋巴结，最大者约为4cm ×2cm，质硬，活动度欠佳，无红肿及压痛，表面皮肤无溃破，心肺腹及其他查体未见明显异常。辅助检查：⑴全身浅表淋巴结＋腹腔深部淋巴结彩超：右颈部淋巴结肿大，大者约为29．3mm ×17．8mm，左颈部大者为42．3mm ×15．6mm；双腋窝可见数个淋巴结，右侧最大者约为18．4mm ×8．6mm，左侧大者为17．7mm ×8．3mm，双侧腹股沟见数个淋巴结，右侧最大者约为29．9mm ×12．3mm，左侧大者31．8mm ×12．2mm，肝门区见多个淋巴结，大者约为23．3mm ×15．1mm。⑵免疫组化：A：CK（－） CD3（＋）CD20（滤泡＋）Pax-5（＋）CD38（＋）CD138（＋） S-100（－）CD1a（－）SMA（＋），desmin（＋），Ki-67（10％～20％）CD30（－）CD68（＋）CD（滤泡＋）Bcl-2（＋）CD34（血管＋）CD5（灶状＋）。⑶体部 PET／CT：双侧颈部、双侧锁骨上、左侧锁骨下、纵隔内、右肺门、双侧腋窝及双侧腹股沟淋巴结影，部分肿大，代谢增高，考虑恶性病变可能性大。⑷骨髓活检及形态学检查：除骨髓增生低下外，未见其他明显异常。病理诊断意见：（切除之腹股沟淋巴结）淋巴组织异型增生（以间区为主），结合免疫组化结果，考虑为纤维母细胞性网状细胞肿瘤。

人真皮网状层成纤维细胞在瘢痕疙瘩皮损组织中的表达与分布

目的探讨人真皮乳头层成纤维细胞(Fp)、网状层成纤维细胞(Fr)和肌成纤维细胞(MFB)在瘢痕疙瘩皮损组织中的表达与分布。方法2019年5-12月在武汉大学人民医院皮肤科门诊确诊的15例瘢痕疙瘩患者,男8例,女7例,年龄20~50岁,取皮损组织,以15例年龄匹配的女性乳房整形术正常皮肤组织为对照。采用双重免疫荧光染色法检测成纤维细胞活化蛋白(FAP)、CD90和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中的分布。从3例正常皮肤和3例瘢痕疙瘩组织中分离成纤维细胞原代培养,采用10 ng/ml转化生长因子β1(TGF-β1)体外处理两组细胞0~48 h,观察细胞表型的变化,荧光定量RT-PCR和Western印迹检测FAP、CD90和α-SMA mRNA和蛋白表达。两组间差异比较采用t检验。结果免疫荧光结果显示,正常皮肤组织中,FAP+/CD90-细胞主要分布在真皮浅层,FAP-/CD90+细胞集中在真皮深层,CD90+细胞几乎不表达α-SMA;瘢痕疙瘩组织深层可见大量FAP+和CD90+细胞,大量CD90+细胞同时表达α-SMA。双重免疫荧光染色显示,正常皮肤成纤维细胞几乎不表达α-SMA,瘢痕疙瘩成纤维细胞表达α-SMA;TGF-β1处理24 h时,正常成纤维细胞和瘢痕疙瘩成纤维细胞α-SMA+细胞荧光强度(21.058±0.709、27.112±0.097)均高于未处理组(11.312±0.636、21.306±0.464),t值为22.430、13.370,P<0.05。RT-PCR和Western印迹显示,TGF-β1处理48 h时,瘢痕疙瘩成纤维细胞FAP、CD90、α-SMA mRNA相对表达水平(92.610±3.667、1.366±0.105、3.240±0.141)与蛋白表达水平(0.652±0.073、1.046±0.119、0.946±0.117)均高于处理前(均P<0.05)。结论瘢痕疙瘩组织真皮深层的CD90+(Fr)细胞异常增生,提示针对真皮深层异常增殖活跃的FAP-/CD90+(Fr)细胞群进行定向干预可能提高瘢痕疙瘩治疗疗效。

FRCs调控淋巴结微环境的研究进展

成纤维网状细胞(fibroblastic reticular cells,FRCs)是淋巴结内一类特殊的基质细胞。近年来大量研究发现,FRCs通过构建导管网络支撑淋巴结的三维结构,还产生细胞外基质,分泌细胞因子和趋化因子,参与调控淋巴结微环境的免疫稳态。FRCs在炎症、肿瘤和其他免疫性疾病的发生发展过程中发挥重要作用。文章介绍了FRCs在淋巴结内的分化、分布及功能,阐述了FRCs调控淋巴结微环境的相关机制及意义。