1例生痰二氧化碳嗜纤维菌脑膜炎合并肾功能亢进患儿的抗感染治疗实践

目的:探讨临床药师在儿童细菌性脑膜炎抗感染治疗中的作用。方法:临床药师通过参与1例由生痰二氧化碳嗜纤维菌引起的儿童细菌性脑膜炎患者的多次药学会诊,与医师通力合作,对患儿治疗效果欠佳的原因进行分析,结合患儿存在肾功能亢进这一特殊生理病理特点及抗菌药物药动学/药效学(PK/PD)理论,优化抗感染治疗方案并实施药学监护。结果:临床药师提出的治疗方案被医师采纳,患儿临床症状改善、脑脊液恢复正常并顺利出院。结论:临床药师对临床上罕见致病菌引起的特殊部位感染,应充分发挥药学专业特长,进一步提高抗感染药物的临床疗效。

生孢噬纤维菌内切葡聚糖酶的异源表达及CBM6对其酶学性质的影响

内切葡聚糖酶是纤维素酶系的重要组分之一,但大部分内切葡聚糖酶酸碱耐受性较差。为挖掘新型内切葡聚糖酶,本研究从生孢噬纤维菌CX11基因组中克隆了一个内切葡聚糖酶基因Sm_1350。该基因大小为2 196 bp,编码732个氨基酸,编码蛋白包含一个分泌信号肽、GH5催化结构域、6家族碳水化合物结合模块(CBM6)和一个C末端结构域(CTD)。利用实时荧光定量PCR技术对Sm_1350在不同碳源条件下的相对表达水平进行了分析,结果表明,Sm_1350在纤维二糖和滤纸培养基中的表达水平均显著高于在葡萄糖培养基中的表达水平,推测其在CX11降解纤维素过程中发挥一定作用。本研究构建了Sm_1350及其3种截短突变体,分别为Sm_1350、Sm_1350-GH5-CBM6、Sm_1350-GH5和Sm_1350-CBM6,并在大肠杆菌中进行异源表达。结果表明,去除CTD结构域明显提高了目的蛋白的可溶性表达水平。以CMC为底物时,Sm_1350-GH5-CBM6与Sm_1350-GH5酶活力分别为(7 000.00±50.00)U/g和(2 542.73±35.03)U/g,表明去除CBM6降低了Sm_1350-GH5对可溶性多糖的水解能力。酶学性质分析结果显示,Sm_1350-GH5-CBM6与Sm_1350-GH5均有较好的pH稳定性,去除CBM6结构域只改变了Sm_1350-GH5的最适温度,对最适pH以及温度稳定性没有产生影响。此外,Sm_1350-CBM6具有较强的几丁质结合能力,在蛋白纯化方面具有良好的应用前景。

生痰二氧化碳嗜纤维菌血流感染及文献复习

目的总结分析生痰二氧化碳嗜纤维菌血流感染患者的临床特点及易感因素,提高临床诊治水平。方法回顾性分析北京医院收治的1例生痰二氧化碳嗜纤维菌血流感染患者的临床资料,并进行相关文献复习。中文以“生痰二氧化碳嗜纤维菌”为检索词,英文以“Capnocytophaga sputigena”为检索词,检索PubMed/Medline、Embase、中国期刊网数据库(CNKI)、万方数据库(Wanfang)、维普网(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)等数据库,纳入文献范围为2021年10月10日前发表的所有中文及英文文献。结果患者男,22岁,左侧颌面部肿瘤3程化疗后,第4程化疗前出现发热寒颤,白细胞及中性粒细胞升高,血培养需氧瓶及厌氧瓶均为生痰二氧化碳嗜纤维菌。文献检索共检索国内外病历报道37例,其中34例报道了明确的治疗方案。结合本例患者,共35例,其中女性18例,男性16例,未知性别1例,年龄介于0~94岁。感染部位方面,20例患者为血流感染,其中4例同时合并其它部位的感染。除1例患者流产后没有给予任何药物治疗外,34例患者接受了基于β-内酰胺类药物的治疗方案,有5例患者同时接受了外科手段干预。在随访过程中,5例患者死亡。结论生痰二氧化碳纤维菌引起的感染临床少见,美国临床和实验室标准化协会(CLSI)并未对生痰二氧化碳嗜纤维菌推荐药敏试验方法及折点范围,临床中多经验性使用基于β-内酰胺类药物的治疗方案。疾病预后较好。

来源于生孢噬纤维菌的新型β-葡萄糖苷酶SmBgl3A的性质研究

通过表达水平分析比较,从生孢噬纤维菌Sporocytophaga sp.CX11基因组中筛选出在菌株降解纤维二糖过程中起关键作用的β-葡萄糖苷酶基因Sm Bgl3A。该基因含有2283 bp碱基对,编码760个氨基酸,其编码蛋白质与来源于Bacteroides ovatus的β-葡萄糖苷酶Bo GH3B同源性为46.76%。将该基因在大肠杆菌中进行异源表达,粗酶液经Ni-NTA亲和层析一步纯化得到电泳级纯度的酶蛋白Sm Bgl3A,重组蛋白质相对分子质量与理论值(8.12×10^(4))一致。酶学性质表征结果表明,Sm Bgl3A最适温度和p H分别为35℃和6.5;p H在5.0~7.0、温度在40℃以下时,稳定性较好,同时有着较好的Na Cl耐受性。Sm Bgl3A的最适底物为p NPG,以p NPG为底物时的比活力高达14.74 U/mg;K_(m)值为10.88 mmol/L,k_(cat)值为46.72 s^(-1)。Sm Bgl3A作为一种新型的、酶学性质优良的β-葡萄糖苷酶,进一步扩展了β-葡萄糖苷酶的种类,为该酶在纤维素降解、食品工业等领域的应用奠定基础。

多重耐药牙龈二氧化碳噬纤维菌性角膜溃疡1例

目的分析1例牙龈二氧化碳噬纤维菌感染引起的角膜溃疡病例,为该病原菌的分离鉴定和诊断治疗提供经验。方法回顾并分析1例山东中医药大学附属眼科医院收治的牙龈二氧化碳噬纤维菌感染角膜溃疡患者的临床资料、辅助检查结果以及治疗方案。结果患者为61岁女性,因“左眼红痛伴视力下降2月”于2022年9月28日入院,患者角膜溃疡较重,左侧角膜中央有灰白色溃疡灶,直径约10 mm,周围角膜水肿浸润,角膜缘新生血管长入角膜约2 mm。角膜刮取物培养出二氧化碳噬纤维菌属,该菌目前无临床折点,根据体外培养和药敏试验结果,使用全身注射亚胺培南和局部滴眼抗感染治疗,结合角膜羊膜移植术,治疗24 d,患者症状改善后出院。结论结合样本涂片镜检和药敏结果,评估患者病情,及时给予合理治疗,采取有效的手术方法,对改善牙龈二氧化碳噬纤维菌引起的角膜溃疡患者的预后有重要意义。

苯酚降解纤维菌的分离鉴定及降解特性研究

采用液体富集培养的方法,从唐山污水处理厂附近植物根际土中分离得到一株苯酚降解菌11-256,对菌株进行了鉴定及苯酚降解试验。结果表明,菌株可以在以苯酚为唯一碳源和能源的无机盐培养基中生长,能够耐受最高质量浓度为2000mg/L的苯酚。该菌株为革兰阳性菌,呈短杆状、长杆状或球形,在ISP2培养基上形成圆形隆起菌落,菌落颜色由乳白到黄白色,在马铃薯浸汁和察氏琼脂培养基上产生可溶性浅黄色色素。菌株生长的温度范围为20-40℃,pH值范围为5.0-10.0,不能利用乳糖和甘油,能利用色氨酸为氮源,硝酸盐还原阳性,明胶液化阴性,H2S产生阴性。结合菌株16S rRNA基因序列同源性分析结果,鉴定菌株11-256为纤维化纤维菌（Cellulosimi-crobium cellulans）。在温度为28-32℃,pH值为6.5-8.5时,菌株对初始质量浓度500-1 500 mg/L的苯酚均能有效降解。研究表明,该菌株具有较强的环境适应能力和苯酚降解能力。

生孢噬纤维菌的一个新菌株

以滤纸纤维素为唯一碳源 ,从土壤中分离筛选出一株好氧性纤维素降解细菌 ,通过对其形态学及生理生化特性的研究 ,该菌株被鉴定为生孢噬纤维菌 (Sporocytophaga)

翘嘴鳜对柱状嗜纤维菌免疫反应的初步研究

从患细菌性烂鳃病的翘嘴鳜分离的柱状嗜纤维菌制作的酚灭活菌苗，接种翘嘴鳜３周后，受免鱼体血清中凝集抗体效价上升到１：２５６～２０４８；血液中白细胞的吞噬活性显著地高于对照鱼（Ｐ＜０．０５）；毒力攻击结果表明免疫保护力达到１００％。

柱状嗜纤维菌对抗生素的敏感性测定

测定了１７种抗生素对２０株柱状嗜纤维菌的最小抑菌浓度（ＭＩＣ）和最小杀菌浓度（ＭＢＣ）。发现从湖北省各地患病鱼上分离的菌株对大多数供试药物都高度敏感，而从广东省中山的患病翘嘴鳜和斑鳢上分离的菌株则对四环素类、氨基甙类和大环类酯类的部分抗生素显示出高度耐药性。推测这是由于无序使用抗生素的结果。

不同血清型柱状嗜纤维菌脂多糖蛋白质成分及其对鳜的免疫原性影响的研究

从 3种不同血清型的柱状嗜纤维菌中提取菌体脂多糖 (LPS) ,测定了其中蛋白质含量及其成分的变化 ,并分别作为免疫原接种翘嘴鳜 ,对LPS的免疫原性进行了比较。结果表明 ,不同血清型的柱状嗜纤维菌菌体LPS中蛋白质含量没有明显差别 (t测验 ,P >0 .0 5 ) ,而其中蛋白质成分则有明显的血清型特异性。不同血清型的菌体LPS对翘嘴鳜的免疫原性没有明显差别 (t测验 ,P >0 .0 5 )

1例生痰二氧化碳嗜纤维菌的实验室鉴定及药敏试验

目的全面鉴定1株尿毒症患者血液中分离的生痰二氧化碳嗜纤维菌。方法用血培养仪对尿毒症患者静脉血标本进行需氧和厌氧培养,分离培养阳性培养物,用生化鉴定卡进行生化鉴定,用质谱分析及16S rRNA基因序列分析进行补充鉴定,并用E-test法进行药敏试验。结果该菌为革兰阴性长梭状杆菌,常规方法无法鉴定至种。结合质谱分析及16S rRNA基因序列分析结果,鉴定为生痰二氧化碳嗜纤维菌。该菌对阿米卡星最低抑菌浓度(MIC)为64μg/mL,对其他药物MIC值较低。结论质谱分析和16S rRNA基因序列分析为常规方法无法鉴定至种的细菌鉴定提供了可靠依据,成功将本例细菌鉴定为生痰二氧化碳嗜纤维菌。

生痰二氧化碳嗜纤维菌血流感染1例

生痰二氧化碳嗜纤维菌是人类口腔内的正常菌群,系条件致病菌。该菌与青少年和成人的牙周炎有关,可造成正常或免疫缺陷(主要是粒细胞减少症)患者血流及其他部位感染[1]。由于该菌生长缓慢且对营养要求高,分离培养较困难,鲜见其引起感染的报道。

柱状噬纤维菌免疫后兴国红鲤免疫细胞数量变化的研究

用柱状噬纤维菌灭活菌苗免疫兴国红鲤 ,于免疫后 2周、4周分别对其外周血液和胸腺、脾脏、头肾和体肾中的免疫细胞数量变化进行了测定。结果显示 :外周血液中 ,淋巴细胞有显著的增加 ,粒细胞和单核细胞有明显的下降。胸腺中淋巴细胞数目略有增加。脾脏中淋巴细胞有显著的增加 ,而粒细胞和单核细胞正相反。头肾中淋巴细胞有较多的增加 ,粒细胞数目增加不明显 ,单核细胞有大幅下降。体肾中 ,粒细胞和淋巴细胞大幅上升 ,单核细胞下降。

培养时间对柱状嗜纤维菌脂多糖蛋白质成分和免疫原性的影响

从培养不同时间后的柱状嗜纤维菌中提取菌体脂多糖 (LPS) ,测定了其中蛋白质含量及成分的变化 ,并分别作为免疫原接种翘嘴鳜对其免疫原性进行了比较。结果表明 ,培养时间对菌体LPS中蛋白质含量没有明显影响 ,对其蛋白质成分则有一定影响 ,而菌体LPS中蛋白质成分与其免疫原性有关 ,从培养

一株产壳聚糖酶的噬纤维菌分离及产酶发酵条件优化

从连云港海域中筛选出一株产壳聚糖酶活力较高的菌株M5。根据其形态特征、生理生化以及16S rDNA鉴定,初步认定该菌为噬纤维菌属,命名为Cellulophagasp.M5。通过单因素优化结合正交试验初步确定菌株M5产酶的培养基(g/L)及培养条件:粉末壳聚糖10,酵母提取物3,硫酸铵5,葡萄糖1.0,K2HPO4.3H2O 1.4,NaCl 5,MgSO4.7H2O 1.4,陈海水1 L;发酵起始pH为6.5,250 mL三角瓶中装70 mL培养基,1%接种量,30℃180 r/min培养84 h。经过优化Cellulophagasp.M5发酵产酶由2.67 U/mL提高到6.67 U/mL,产酶活力提高了1.5倍。

不同方法提取的柱状嗜纤维菌脂多糖对鲤免疫活性的比较

采用不同方法提取的柱状嗜纤维菌脂多糖（ＬＰＳ）作为抗原，对鲤注射免疫后，通过测定受免鲤血清中凝集抗体效价、沉降抗体、白细胞吞噬活性和进行强毒攻击的方法，比较了不同方法提取ＬＰＳ的免疫原性，结果表明，Ｂｏｉｖｉｎ法和Ｐｈｅｎｏｌ－ｗａｔｅｒ法较ＥＤＴＡ法提取ＬＰＳ的免疫原性强，而Ｂｉｏｖｉｎ法和Ｐｈｅｎｏｌ－ｗａｔｅｒ法提取ＬＰＳ的免疫原性则没有明显差别。

柱状嗜纤维菌的血清型与其菌苗抗原性的关系

采用不同血清型的柱状嗜纤维菌（Ｃｙｔｏｐｈａｇａｃｏｌｕｍｎａｒｉｓ）Ｇ４，ＣＴＳ５，和Ｍ１５７等３个菌株，分别制备成福尔马林灭活菌苗（ＦＫＣ）和热灭活菌苗（ＨＫＣ），注射接种草鱼４周后，通过测定血清中凝集、交叉凝集抗体效价以及活菌攻毒试验，证明了３个菌株制备的菌苗的抗原性不存在差别。

人牙菌斑中二氧化碳噬纤维菌的分离鉴定

二氧化碳噬纤维菌属(Capnocytophaga,简称Capno)是国外学者近年从人牙菌斑中分离到的新菌属。作者从人的健康和炎性牙周龈下菌斑中分离到615株Capno,其鉴定特点如下:革兰氏阳性细梭纤柔杆菌,仅在厌氧环境和含10％CO_2的空气中生长;在BHI血琼脂表面形成典型的“润湿性”菌落,并产生桔黄色色素和特殊的焦糖气味;在含葡萄糖的PYG肉汤中最终pH值<6,琥珀酸和乙酸为主要的代谢酸产物。根据发酵碳水化合物和还原硝酸盐可鉴定本菌属的三个种。

将云南原小单孢菌转入纤维化纤维菌的多相分类研究

对中国普通微生物菌种保藏中心(CGMCC)保藏的云南原小单孢菌(Promicromonospora yunnanensis)AS4.1333进行的多相分类研究表明,菌株AS4.1333与纤维化纤维菌(Cellulosimicrobium cellulans)DSM43879T关系密切,它们的16S rRNA基因序列相似性为99.6%,DNA同源性为89.3%。胞壁组分、枝菌酸、甲基萘醌、磷酸类脂和DNAG+Cmol%测定等化学分类结果支持了上述结论。在形态和生理生化特性上,菌株AS4.1333与CellulosimicrobiumcellulansDSM43879T之间也表现出非常相似的性状。根据系统发育分析、化学分类、形态和生理生化特性、DNA同源性测定等研究结果,对菌株AS4.1333的分类地位做了修正,将其从原小单孢菌属中排除,认为菌株AS4.1333与Cellulosimicrobium cellulansDSM43879T是同一个种,建议将菌株AS4.1333由云南原小单孢菌(Promicromonosporayunnanensis)转入纤维化纤维菌(Cellulosimicrobium cellulans)。