纤维蛋白原相关蛋白1-淋巴细胞活化基因3与长链非编码RNA-T细胞免疫球蛋白黏蛋白3共调控增强CD8^(+)T细胞抑制肝细胞癌肿瘤生长

目的体外研究协同抑制纤维蛋白原相关蛋白1(FGL1)-淋巴细胞活化基因3(LAG-3)与长链非编码RNA(lncRNA)-T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim3)双免疫逃逸通路,联合增强T淋巴细胞活性,显著抑制HCC肿瘤细胞恶性增殖和肿瘤生长的效用及机制。方法构建敲除、稳定转染的5组人肝癌细胞株HepG2、HepG2-FGL1-KO、HepG2-FGL1-KO-Tim3(-)、HepG2-LAG-3-KO、HepG2-LAG-3-KO-Tim3(-),并以此构建5组细胞株移植瘤免疫系统人源化小鼠成瘤模型。通过质量细胞计数法测定淋巴细胞CD8+T亚群表达水平,并测定肿瘤生长大小体积变化。采用t和χ^(2)检验。结果实验期间,5组中位肿瘤生长速率分别为149、136、81、75、68 mm^(3)/d。5组中位肿瘤体积分别为1.18、0.91、0.37、0.45、0.29 g。与HepG2组比较HepG2-FGL1-KO组和HepG2-LAG-3-KO组动物瘤体积显著小于HepG2组(t=7.582,P<0.05),HepG2-FGL1-KO-Tim3(-)和HepG2-LAG-3-KO-Tim3(-)组动物肿瘤体积又显著小于单独敲除组(t=3.953,P<0.05)。同时,5组中位CD8+T细胞亚群表达量分别为2.1×107、2.9×107、3.8×107、7.7×107、13.2×107。HepG2-FGL1-KO-Tim3(-)和HepG2-LAG-3-KO-Tim3(-)组CD8+T细胞亚群表达活性显著高于FGL1和LAG-3单抑制组(t=2.988,P<0.05),而两个单抑制组的CD8+T细胞亚群表达活性又显著高于HepG2对照组(t=6.416,P<0.05)。结论单一免疫检查点的抑制对于遏制肿瘤逃避免疫杀伤存在局限性,多个免疫检查点因子信号通路联合抑制相较于单一通路的单控,将显著调控细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的激活和对肿瘤细胞的敏感性毒性表达。

血清DKK-1、LAG-3和SII在分化型甲状腺癌诊断中的临床价值

目的观察血清重组人Dick-kopfx相关蛋白-1(DKK-1)、淋巴细胞活化基因-3(LAG-3)和系统性免疫性炎症指数(SII)在分化型甲状腺癌诊断中的临床价值。方法选取2018年1月至2019年12月在该院就诊的98例分化型甲状腺癌患者作为分化型甲状腺癌组,另选取同期在该院就诊的75例良性甲状腺结节患者作为甲状腺结节组,45例健康体检者作为健康对照组。比较分化型甲状腺癌组、甲状腺结节组和健康对照组血清DKK-1、LAG-3水平和SII,观察手术前后血清DKK-1、LAG-3水平和SII变化情况,观察各指标的相关性,以及对分化型甲状腺癌的诊断效能。结果分化型甲状腺癌组患者血清DKK-1水平和SII均明显高于甲状腺结节组,手术后血清DKK-1水平和SII均较术前明显降低,甲状腺结节组患者DKK-1水平和SII均明显高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);分化型甲状腺癌组患者血清LAG-3水平明显低于甲状腺结节组,手术后血清LAG-3水平较术前明显升高,甲状腺结节组患者LAG-3水平明显低于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。分化型甲状腺癌患者血清DKK-1、LAG-3水平和SII与淋巴结转移和TNM分期有明显关系(P<0.05);而与性别、年龄、病理类型、肿瘤最大径和腺外浸润无明显关系(P>0.05)。分化型甲状腺癌患者血清LAG-3水平与DKK-1水平(r=-0.642,P<0.05)和SII(r=-0.716,P<0.05)均呈负相关,DKK-1水平和SII呈正相关(r=0.784,P<0.05)。血清DKK-1、LAG-3和SII诊断甲状腺癌具有较高的诊断效能,联合检测灵敏度为88.8%,特异度为96.0%,受试者工作特征曲线下面积为0.965,明显高于DKK-1、LAG-3和SII单独检测(P<0.05)。结论血清DKK-1、LAG-3和SII参与了分化型甲状腺癌的发生和发展过程,对诊断分化型甲状腺癌具有较高的诊断效能。

淋巴细胞活化基因-3参与银屑病发病机制展望

银屑病是皮肤科常见的免疫相关性疾病,多种效应T细胞与调节性T细胞等参与银屑病的发生发展。共抑制受体免疫淋巴细胞活化基因-3(lymphocyte activation gene-3,LAG-3)在银屑病皮损中的表达上调,其通过与配体特异性结合影响细胞因子的分泌和细胞增殖,从而发挥抑制T细胞功能的作用。近年来随着研究深入和新型主要配体的发现,LAG-3多维度参与银屑病发病愈发受到关注。本文主要从LAG-3的免疫学功能及配体研究现状,以及LAG-3参与银屑病发病机制的进展进行综述。

甘草酸对缺血/再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响及机制探讨

目的观察甘草酸对缺血/再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组及甘草酸低、中、高剂量组5组,各10只。后四组制备缺血/再灌注大鼠模型,假手术组只穿线不结扎左冠状动脉降支,甘草酸低、中、高剂量组在缺血前半小时分别于股静脉注射30、60、90 mg/kg的甘草酸,假手术组与模型组注射同体积生理盐水。取各组心肌组织,采用TUNEL染色法测算心肌细胞凋亡率,Western blotting法检测MKK/JNK信号通路蛋白[丝分裂原活化蛋白激酶4/7(MKK4/7)、c-Jun氨基末端激酶1/2/3(JNK1/2/3)、磷酸化MKK4/7(p-MKK4/7)、磷酸化JNK1/2/3(p-JNK1/2/3)]及凋亡相关蛋白[天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)8、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Caspase-3]的表达,同时观察心肌组织病理改变情况。结果与假手术组相比,模型组细胞凋亡率高,p-MKK4/7、p-JNK1/2/3、Caspase-8、Bax、Caspase-3表达高而Bcl-2表达低(P均<0.05)。与模型组相比,甘草酸中剂量组及甘草酸高剂量组细胞凋亡率低,p-MKK4/7、p-JNK1/2/3、Caspase-8、Bax、Caspase-3表达低而Bcl-2表达高(P均<0.05)。模型组较假手术组大鼠心肌组织中出现较多变性坏死心肌细胞,有较多炎性细胞浸润;甘草酸低、中、高剂量组较模型组心肌细胞水肿程度轻且炎性细胞少。结论甘草酸可减少缺血/再灌注大鼠心肌细胞凋亡及心肌组织损伤;其机制可能为抑制MKK/JNK信号通路中MKK4/7和JNK1/2/3磷酸化,降低Caspase-8、Bax、Caspase-3表达,升高Bcl-2表达。