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同源重组构建表皮葡萄球菌纤维蛋白原结合基因缺失突变菌株 被引量:1
1
作者 赵旭 朱德妹 +2 位作者 张婴元 郑兆鑫 严维耀 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2006年第3期154-158,共5页
目的构建表皮葡萄球菌(表葡菌)纤维蛋白原结合基因(fbe基因)缺失突变菌株,为fbe基因功能研究提供实验工具。方法采用同源基因重组技术。构建质粒ΔpBT2(含fbe::ermB基因),将其电转化进入金葡菌RN4220,再次抽提后电转化进入fbe基因阳性... 目的构建表皮葡萄球菌(表葡菌)纤维蛋白原结合基因(fbe基因)缺失突变菌株,为fbe基因功能研究提供实验工具。方法采用同源基因重组技术。构建质粒ΔpBT2(含fbe::ermB基因),将其电转化进入金葡菌RN4220,再次抽提后电转化进入fbe基因阳性表葡菌(HB)中。将含有质粒ΔpBT2的表葡菌HB在5mg/L红霉素平板42℃经多次传代,使质粒ΔpBT2裂解,fbe::ermB基因同源重组到表葡菌HB的染色体上,通过红霉素耐药、氯霉素敏感等特性筛选出含有fbe::ermB基因的新表葡菌HB-ermB。结果经酶切鉴定后确认质粒ΔpBT2构建成功以及成功转导入金葡菌RN4220和表葡菌HB中,经PCR方法以及测序确认表葡菌HB的fbe基因缺失突变菌株HB-ermB构建成功。结论采用同源重组的方法完成了表葡菌HB的fbe基因缺失突变菌株的构建。 展开更多
关键词 表皮葡萄球菌 纤维蛋白原结合基因 同源重组
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血小板纤维蛋白原结合试验及应用 被引量:1
2
作者 韩悦 王兆钺 +2 位作者 朱明清 耿美菊 阮长耿 《江苏医药》 CAS CSCD 2000年第10期818-819,共2页
关键词 血小板纤维蛋白原结合试验 血小板无力症 诊断
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表皮葡萄球菌纤维蛋白原结合基因分布的研究 被引量:2
3
作者 赵旭 朱德妹 张婴元 《中国抗感染化疗杂志》 2004年第2期89-92,共4页
目的 :研究不同来源的表皮葡萄球菌 (表葡菌 )以及其他葡萄球菌中纤维蛋白原结合基因 (fbe基因 )的分布情况。 方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)方法检测表葡菌临床分离株或健康人群寄植株以及其他类型葡萄球菌的 fbe基因 ,并对fbe全基因... 目的 :研究不同来源的表皮葡萄球菌 (表葡菌 )以及其他葡萄球菌中纤维蛋白原结合基因 (fbe基因 )的分布情况。 方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)方法检测表葡菌临床分离株或健康人群寄植株以及其他类型葡萄球菌的 fbe基因 ,并对fbe全基因序列进行了测序。结果 :临床分离的表葡菌中 fbe基因阳性率达到 84 .2 % ,健康人群来源的表葡菌中 fbe基因阳性率达92 .6 % ,而其他类型葡萄球菌中均未扩增出fbe基因 ;表葡菌 337# fbe基因全长序列为 345 7bp ,与国外文献报道对比有95 %同源性。结论 :fbe基因在表葡菌中广泛存在 ,fbe全基因序列与国外报道的结果相似。 展开更多
关键词 表皮葡萄球菌 纤维蛋白原结合基因 生物膜
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猪链球菌2型的纤连蛋白/血纤维蛋白原结合蛋白基因的序列分析
4
作者 孙理云 范红结 陆承平 《微生物与感染》 2006年第1期28-31,38,共5页
目的为确定猪链球菌2型(SS2)江苏分离株9801是否具有纤连蛋白/血纤维蛋白原结合蛋白基因(fbps)。方法根据已发表的SS2 fbps序列,设计并合成1对引物,以SS2江苏分离株的基因组为模板,采用聚合酶链反应(PER)方法扩增fbps,克隆于pMD-T18载... 目的为确定猪链球菌2型(SS2)江苏分离株9801是否具有纤连蛋白/血纤维蛋白原结合蛋白基因(fbps)。方法根据已发表的SS2 fbps序列,设计并合成1对引物,以SS2江苏分离株的基因组为模板,采用聚合酶链反应(PER)方法扩增fbps,克隆于pMD-T18载体。测定阳性质粒插入序列。利用DNAstar软件,比较所测序列与不同来源SS2的fbps和FBPS与链球菌属其他种同源蛋白的同源性。结果扩增的fbps为1 938 bp,江苏分离株与猪源致病性SS2荷兰分离株的fbps序列有5个碱基不同,与ATCCA3765株有3个碱基不同,同源性均达99.99%以上。推导的氨基酸序列比较,分别有4个和2个氨基酸不同,同源性均为99%以上。纤连蛋白结合蛋白(FBPS)无前导序列,无锚定序列,与链球菌属其他种的同源Fn结合蛋白的同源性为68.8%~76.0%。结论FBPS是一种无锚的黏附素。 展开更多
关键词 纤连蛋白/血纤维蛋白原结合蛋白基因 猪链球菌2型 克隆 序列测定
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肝病患者纤维蛋白原结合唾液酸水平的测定及其临床意义
5
作者 李健 周玉贵 《医师进修杂志》 2000年第8期20-21,27,共3页
目的:探讨纤维蛋白原结合唾液酸(FSA)在肝病患者中的意义及其对凝血酶时间的影响。方法:应用饱和硫酸铵制备纯化纤维蛋白原,硫代巴比妥酸法测定22例正常人,133例肝病患者血浆FSA水平,并对血浆和纯化纤维蛋白原脱唾液... 目的:探讨纤维蛋白原结合唾液酸(FSA)在肝病患者中的意义及其对凝血酶时间的影响。方法:应用饱和硫酸铵制备纯化纤维蛋白原,硫代巴比妥酸法测定22例正常人,133例肝病患者血浆FSA水平,并对血浆和纯化纤维蛋白原脱唾液酸化前后的凝血酶时间和纤维蛋白单位聚合浊度进行测定。结果:肝硬化患者FSA水平显著高于正常对照组及其他肝病组(P〈0.01); 展开更多
关键词 纤维蛋白原结合 唾液酸 肝硬化 测定 诊断
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纤维蛋白原结合唾液酸的测定及临床意义
6
作者 王传芳 刘昌元 《中原医刊》 2003年第1期50-51,共2页
关键词 纤维蛋白原结合唾液酸 含量测定 纤维蛋白 唾液酸
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表皮葡萄球菌体外与纤维蛋白原的结合力研究 被引量:1
7
作者 郭蓓宁 李胜利 +1 位作者 王英明 张婴元 《中国抗感染化疗杂志》 2003年第4期211-213,共3页
目的 :比较纤维蛋白原结合基因 (fbe)阳性和纤维蛋白原结合基因阴性的表皮葡萄球菌 (表葡菌 )体外与纤维蛋白原结合力的差异 ,探讨 fbe基因在表葡菌致异物感染中的致病作用。 方法 :采用ATB鉴定临床分离菌 ,聚合酶链反应 (PCR)方法检测... 目的 :比较纤维蛋白原结合基因 (fbe)阳性和纤维蛋白原结合基因阴性的表皮葡萄球菌 (表葡菌 )体外与纤维蛋白原结合力的差异 ,探讨 fbe基因在表葡菌致异物感染中的致病作用。 方法 :采用ATB鉴定临床分离菌 ,聚合酶链反应 (PCR)方法检测有无 fbe基因 ,采用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定并比较 fbe基因阳性和 fbe基因阴性表葡菌体外与纤维蛋白原的结合力。结果 :6 2株临床分离菌中有 4 6株为表葡菌 ,表葡菌中 fbe基因阳性的菌株为 34株 ,阳性率为 73.9% ,其他葡萄球菌均不含该基因 ;fbe基因阳性菌株和fbe基因阴性菌株体外与纤维蛋白原的结合力差异有显著性 (P <0 .0 1 )。 结论 :fbe基因阳性菌株和fbe基因阴性菌株体外与纤维蛋白原的结合力存在差异 ,提示 fbe基因可能为表葡菌致异物感染的致病因素之一。 展开更多
关键词 表皮葡萄球菌 纤维蛋白原结合基因 纤维蛋白 结合
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ELISA测定血小板膜结合纤维蛋白原的临床价值
8
作者 吴惠毅 杨新玲 +4 位作者 杨晋 姜建东 赵绍林 刘安定 陶爱华 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期99-102,共4页
目的 建立一种适合于临床常规开展的血小板膜结合纤维蛋白原 (PFig)测定方法 ,探讨缺血性脑卒中患者PFig含量变化的临床价值。方法 建立PFig测定方法 ,用超声波破碎血小板 (Plt) ;观察 82例缺血性脑卒中患者、89例对照组血小板膜结合... 目的 建立一种适合于临床常规开展的血小板膜结合纤维蛋白原 (PFig)测定方法 ,探讨缺血性脑卒中患者PFig含量变化的临床价值。方法 建立PFig测定方法 ,用超声波破碎血小板 (Plt) ;观察 82例缺血性脑卒中患者、89例对照组血小板膜结合纤维蛋白原含量 ,采用抗人血小板表面颗粒膜蛋白质 14 0 (GMP 14 0 )特异性单克隆抗体 ,放射免疫法测定血小板活化状态。结果 方法的线性范围为 0 .10~ 1.5 0 μg/ml(10 6plt)血小板 ,检测下限 0 .0 5 μg/ml;批内CV9.6 8%~ 11.0 6 % ;批间CV11.97%~ 13.94 %。急性脑梗死患者PFig、GMP 14 0与对照组比较显著升高 ;PFig含量与血小板聚集率呈正相关 ,r =0 .87。急性脑梗死患者治疗后PFig比治疗前明显降低。结论 建立的方法可靠 ,适合于临床常规开展。PFig含量高低与疾病的严重程度及复发有密切关系 ,测定PFig为临床判断病情提供了特异。 展开更多
关键词 ELISA测定 血小板膜结合纤维蛋白 脑梗死 缺血性脑卒中
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肌原纤维蛋白结合态羧甲基赖氨酸的体外消化特性 被引量:1
9
作者 齐小敏 任晓敏 +1 位作者 李梅 徐怀德 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2020年第11期10-16,共7页
利用荧光显微镜、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、三甲基甘氨酸-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(tricine-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel e... 利用荧光显微镜、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、三甲基甘氨酸-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(tricine-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,Tricine-SDS-PAGE)和粒径分析仪研究肌原纤维蛋白结合态羧甲基赖氨酸[myofibrillar protein-bound Nε-(carboxymethyl)lysine,MP-bound CML]在体外模拟胃肠系统消化过程中水解产物的变化情况,并利用超滤对胃肠消化后的水解产物进行分级(>5 kDa、3 kDa^5 kDa、1 kDa^3 kDa、<1 kDa),用高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(high performance liquid chromatography-triple quadrupole-tendem mass spectrum,HPLC-QQQ-MS/MS)仪测定各分子量组分中CML含量及占总CML的百分比,明确MP-bound CML在胃肠消化道中的消化特性。结果表明:随着体外模拟胃肠消化时间的增加,MP-bound CML粒径逐渐减小,当肠液消化360 min时MP-bound CML水解液粒径在100 nm^1000 nm范围内,分子量主要在17 kDa以下;MP-bound CML水解液中分子量小于5 kDa的结合态CML比例为68.5%,其中分子量小于1 kDa的结合态CML比例为8.9%,这为探究食品中蛋白结合态晚期糖基化终末产物(advanced glycation end-products,AGEs)的肠道吸收机制提供了一定的理论基础支撑。 展开更多
关键词 纤维蛋白结合态羧甲基赖氨酸 体外模拟胃肠消化 羧甲基赖氨酸含量 分子量分布 微观形态
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猪链球菌2型MRP-FBP串联表达蛋白对小鼠的免疫保护力 被引量:4
10
作者 王宝松 李明义 +1 位作者 单虎 曾巧英 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期522-526,共5页
针对猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)和纤维蛋白原结合蛋白(FBP)抗原性较强的基因片段,分别设计了1对引物,用PCR扩增出了mrp基因和fbp基因的片段。利用这些片段分别构建了原核表达载体pET32a-mrp、pET32a-fbp和pET32a-mrp-fbp。将... 针对猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)和纤维蛋白原结合蛋白(FBP)抗原性较强的基因片段,分别设计了1对引物,用PCR扩增出了mrp基因和fbp基因的片段。利用这些片段分别构建了原核表达载体pET32a-mrp、pET32a-fbp和pET32a-mrp-fbp。将这些表达载体分别转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行了表达。SDS-PAGE分析表明,表达的MRP、FBP、MRP-FBP的分子质量分别为47、52、80 ku。Western-blot分析表明,重组蛋白MRP-FBP可被SS2阳性血清所识别。免疫保护试验表明,串联表达的融合蛋白MRP-FBP对BALB/c小鼠的保护率达80%,是目前筛选到的制备SS2亚单位疫苗保护力最高的短片段串联免疫原。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 溶菌酶释放蛋白基因 纤维蛋白原结合蛋白基因 黏附素疫苗
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猪链球菌2型MRP与FBPS部分片段串联基因的原核表达
11
作者 王宝松 单虎 +1 位作者 曾巧英 李明义 《中国动物检疫》 CAS 2009年第4期37-39,共3页
根据猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)和纤维蛋白原结合蛋白(FBPS)的基因序列,选取可能含有抗原决定簇的两片段,各设计合成一对引物,使之含有共同的酶切位点。通过T4DNA连接酶串联两片段,构建原核表达载体pET32a-mrp-fbps,重组质粒... 根据猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)和纤维蛋白原结合蛋白(FBPS)的基因序列,选取可能含有抗原决定簇的两片段,各设计合成一对引物,使之含有共同的酶切位点。通过T4DNA连接酶串联两片段,构建原核表达载体pET32a-mrp-fbps,重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),经不同时间、不同温度,不同浓度IPTG诱导表达,经SDS-PAGE电泳,表达约为80kD的融合蛋白。Westernblot结果表明重组蛋白可被SS2阳性血清所识别。证实串联表达的融合蛋白具有良好的免疫原性,是重要的保护性抗原,本试验为进一步研究猪链球菌亚单位疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 溶菌酶释放蛋白 纤维蛋白原结合蛋白 串联表达
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肝素诱导的血小板减少症诊断和治疗进展 被引量:10
12
作者 阙斌 聂绍平 马长生 《中国心血管病研究》 CAS 2006年第5期389-391,共3页
关键词 血小板减少症 肝素诱导 治疗进展 纤维蛋白原结合 血小板计数 诊断 肝素类药物 血小板激活 大剂量肝素 血栓形成
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盐酸替罗非班对活动平板运动试验ST段抬高患者TIMI血流分级的影响 被引量:5
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作者 夏豪 胡波 +1 位作者 周桃 谭安安 《微循环学杂志》 2007年第3期48-49,52,共3页
目的:观察盐酸替罗非班对平板运动试验中ST段抬高患者TIMI血流分级的影响。方法:将平板运动试验ST段抬高患者35例按就诊顺序随机双盲分为受试组(n=18)和对照组(n=17),受试组在对照组给予阿司匹林、氯吡格雷、肝素等基础治疗上加用盐酸... 目的:观察盐酸替罗非班对平板运动试验中ST段抬高患者TIMI血流分级的影响。方法:将平板运动试验ST段抬高患者35例按就诊顺序随机双盲分为受试组(n=18)和对照组(n=17),受试组在对照组给予阿司匹林、氯吡格雷、肝素等基础治疗上加用盐酸替罗非班,所有患者疗程结束后均行选择性冠状动脉血管造影(SCA)检查,观察两组患者治疗后TIMI血流情况。结果:与对照组相比,受试组应用盐酸替罗非班后TIMI血流分级提高,达2级血流者比例高于对照组(44.44%比11.76%,P<0.05);受试组完全闭塞者比例明显低于对照组(5.56%比35.29%,P<0.05)。结论:盐酸替罗非班可以改善平板运动试验中ST段抬高患者TIMI血流分级。 展开更多
关键词 活动平板运动试验阳性 盐酸替罗非班 血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂 ST段抬高 血流分级 TIMI GPⅡb/Ⅲa受体 纤维蛋白原结合
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PCI术后应用替罗非班致极重度血小板减少1例 被引量:3
14
作者 张丽颖 郭富蒸 +1 位作者 于浩南 陈丽娟 《中国实验诊断学》 2018年第1期176-177,共2页
血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂(GPIs)被广泛用于急性冠脉综合征患者经皮冠状动脉介入治疗的全过程,替罗非班是一种可逆性非肽类GPIs,可选择性与血小板膜上糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体结合,阻止血小板与纤维蛋白原结合,从而达到抑制血小板聚集... 血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂(GPIs)被广泛用于急性冠脉综合征患者经皮冠状动脉介入治疗的全过程,替罗非班是一种可逆性非肽类GPIs,可选择性与血小板膜上糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体结合,阻止血小板与纤维蛋白原结合,从而达到抑制血小板聚集的目的。GPIs最常见的不良反应之一是血小板减少症,本文报道PCI术后应用替罗非班后引起的极重度血小板减少症1例。 展开更多
关键词 重度血小板减少症 替罗非班 术后应用 血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂 PCI 经皮冠状动脉介入治疗 急性冠脉综合征 纤维蛋白原结合
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吸烟与阿司匹林抵抗有关
15
《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期218-218,共1页
阿司匹林及其他抗血小板治疗对预防冠心病、脑卒中有重要意义(Am J Cardiol,2006,98:577-579)。作者检查123名参加者,其中1/3为吸烟者,年龄21~95岁,1/2为妇女,大多数人有高血压、冠心病。抽血测定血小板聚集(以阳离子没食... 阿司匹林及其他抗血小板治疗对预防冠心病、脑卒中有重要意义(Am J Cardiol,2006,98:577-579)。作者检查123名参加者,其中1/3为吸烟者,年龄21~95岁,1/2为妇女,大多数人有高血压、冠心病。抽血测定血小板聚集(以阳离子没食子酸丙酯为血小板激活剂,促使血小板与纤维蛋白原结合),血小板聚集测定血小板聚集后光浊度变化。以血小板反应单位(ARU)≥550为阿司匹林抗血小板作用良好,〈550为阿司匹林抵抗。 展开更多
关键词 阿司匹林抵抗 吸烟者 抗血小板治疗 阳离子没食子酸丙酯 血小板聚集 纤维蛋白原结合 血小板激活剂 抗血小板作用
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血小板膜蛋白结构稳定剂对高原肺心病肺动脉高压治疗作用的研究
16
作者 张庆成 陈广浩 +2 位作者 郑艳 李昕 吴康智 《高原医学杂志》 CAS 2001年第2期15-17,共3页
目的 :探讨抵克利得 (Ticlid,噻氯匹定 )对高原肺心病 (HCP)肺动脉高压(PAHP)的治疗作用及其机理 ;方法 :将HCP患者随机分为抵克利得治疗组 (抵克利得2 5 0mg ,2 /日 ,n =3 0 )和对照治疗组 (常规治疗 ,n =3 0 ) ,全程治疗 4周 ,治疗前... 目的 :探讨抵克利得 (Ticlid,噻氯匹定 )对高原肺心病 (HCP)肺动脉高压(PAHP)的治疗作用及其机理 ;方法 :将HCP患者随机分为抵克利得治疗组 (抵克利得2 5 0mg ,2 /日 ,n =3 0 )和对照治疗组 (常规治疗 ,n =3 0 ) ,全程治疗 4周 ,治疗前后均运用多克隆抗体、流式细胞仪等技术对 60例HCP患者进行血小板膜结合纤维蛋白原 (FG) ,血小板膜糖蛋白 (GP)Ⅲa免疫荧光测定和心功能检查 ;结果 :①抵克利得治疗后血小板膜结合GF和GPⅢa较治疗前有明显降低 ;②抵克利得组肺动脉压和肺动脉阻力 ,治疗后较治疗前有明显降低 ,且明显优于对照治疗组 ;③抵克利得组呼吸功能治疗后较治疗前有明显改善 ;结论 :抵克利得组有明显血小板膜保护作用 。 展开更多
关键词 抵克利得 肺动脉压 血小板膜结合纤维蛋白 血小板膜糖蛋白Ⅲa 肺心病 治疗
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Lack of Association between fbe Gene with Adherence and Biofilm Formation in Staphylococcus epidermidis Clinical Isolates
17
作者 李华林 高谦 +1 位作者 瞿涤 闻玉梅 《Journal of Microbiology and Immunology》 2004年第2期99-105,共7页
Biofilm formation plays a major role in the pathogenesis of nosocomial infections caused by Staphylococcus epidermidis ( S.epidermidis ). It has been suggested that protein encoded by the fbe (fibrinogen binding prote... Biofilm formation plays a major role in the pathogenesis of nosocomial infections caused by Staphylococcus epidermidis ( S.epidermidis ). It has been suggested that protein encoded by the fbe (fibrinogen binding protein) gene of S.epidermidis enhances bacterial adherence to medical devices and biofilm formation by binding to host fibrinogen (Fg). In this study, a 1.7 kb fbe gene fragment was amplified in 111 of 115 strains of S.epidermidis clinical isolates using PCR. Contrary to expectations, only 14 strains showed marginally increased adherence to Fg-coated polystyrene wells compared with BSA coated wells. Quantitative real-time PCR revealed no statistically significant difference in Fbe expression between Fg binding strains and Fg non-binding strains. Furthermore, in the presence of soluble Fg, S.epidermidis biofilm formation decreased in a dose-dependent manner. In contrast, the Staphylococcus aureus ( S.aureus ) strain Cowan Ⅰ and other 5 S.aureus clinical isolates showed a substantial increase in both adherence and biofilm formation in the presence of Fg. The results suggest that in S.epidermidis the fbe gene may not be associated with bacterial adherence and biofilm formation. 展开更多
关键词 Staphylococcus epidermidis Fibrinogen binding protein fbe GENE BIOFILM
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表皮葡萄球菌生物膜形成相关基因在表皮葡萄球菌和白假丝酵母菌混合生物膜形成中的作用研究 被引量:10
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作者 王小燕 陈颖 +5 位作者 黄云超 周友全 赵光强 叶联华 雷玉洁 汤琦 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期63-68,共6页
目的探讨表皮葡萄球菌生物膜形成相关基因——胞间黏附素A(intercellular adhesion A,ica A)基因、纤维蛋白原结合蛋白(fibrinogen binding protein,fbe)基因、聚集相关蛋白(accumulation-associated protein,aap)基因在表皮葡萄球菌和... 目的探讨表皮葡萄球菌生物膜形成相关基因——胞间黏附素A(intercellular adhesion A,ica A)基因、纤维蛋白原结合蛋白(fibrinogen binding protein,fbe)基因、聚集相关蛋白(accumulation-associated protein,aap)基因在表皮葡萄球菌和白假丝酵母菌混合生物膜形成中的作用。方法实验分为3组,用表皮葡萄球菌标准株ATCC35984(表葡组)及白假丝酵母菌标准株ATCC10231(白念组)分别培养及混合培养(混合组),建立表皮葡萄球菌、白假丝酵母菌及二者混合生长的体外生物膜模型。于培养2、4、6、8、12、24、48、72 h,采用结晶紫染色法半定量检测生物膜形成能力,二甲氧唑黄[(2,3 bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)5〔(phenylamino)Carbonyl〕2H-tetrazolium hydroxide assay,XTT]比色法评价生物膜体外生长动力学;24、72 h扫描电镜观察生物膜超微结构。荧光定量PCR分析培养72 h表葡组及混合组ica A、fbe、aap基因表达情况。结果结晶紫染色法生物膜半定量检测示,混合组和表葡组均在培养12 h生物膜明显增厚,72 h混合组超过表葡组,组间比较除72 h外,其余各时间点两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);白念组12 h出现生物膜的生长,在整个培养周期白念组生物膜厚度均低于混合组(P<0.05)。XTT比色法生长动力学检测示,混合组整体生长速度快于白念组,且48 h后超过表葡组;混合组与表葡组除12 h差异有统计学意义(P<0.05)外,其余各时间点比较差异均无统计学意义(P>0.05);混合组培养2、4 h时A值低于白念组,但比较差异无统计学意义(P>0.05);6 h后各时间点A值均显著高于白念组(P<0.05)。扫描电镜观察示,随培养时间延长各组均形成结构复杂、成熟的生物膜。培养72 h荧光定量PCR检测示,与表葡组相比,混合组fbe、ica A、aap基因表达量分别增高1.93、1.52、1.46倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论表皮葡萄球菌和白假丝酵母菌混合生长能形成比单一微生物结构更复杂的混合生物膜;混合生物膜较单一微生物生物膜更厚,可能与表皮葡萄球菌ica A、aap、fbe基因表达增加有关。 展开更多
关键词 表皮葡萄球菌 白假丝酵母菌 混合生物膜 胞间黏附素基因A 纤维蛋白原结合蛋白基因 聚集相关蛋白基因
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