血压对多态性纤维蛋白原Bβ链基因功能表达的影响

目的:研究血压对多态性血浆纤维蛋白原(Fg)Bβ链-854G/A、-455G/A、-249C/T、-148C/T、448G/A和Bc l-1G/A基因功能表达的影响。方法:选取开滦集团离退休职工1 391人进行体检和问卷调查,受检者清晨抽取静脉血标本测定血浆Fg浓度和纤维蛋白单体聚合反应速率(FMPV)、最大吸光度(Am ax)、FMPV/Am ax等反映Fg聚合功能的指标,然后立即测定血压;应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测Fg Bβ链6个多态性位点的基因型。结果:高血压状态组(HG)与正常血压组(NG)组间6个基因多态性位点等位基因及各基因型的频率分布均无显著差异(P>0.05)。HG与NG的Fg浓度、FMPV/Am ax无显著差异(P>0.05),但HG的FMPV、Am ax低于NG(P<0.05),HG和NG的Bβ-854位点变异基因型组Fg浓度、FMPV、Am ax、FMPV/Am ax均高于野生型(P<0.05),且NG的Bc l-1位点变异基因型的Fg浓度、FMPV高于野生型(P<0.05),但HG的Bβ-854和Bc l-1变异基因型组的Fg、FMPV、Am ax均低于NG(P<0.05)。结论:Fg Bβ-854基因位点是调控Fg功能表达的重要部位,Bc l-1的变异基因型可使血浆Fg浓度和FMPV升高;高血压状态可以明显抑制这种调控作用,并损伤纤维蛋白单体聚合成二聚体的过程,从而导致特殊类型的凝血功能障碍。

纤维蛋白原Bβ链变异基因的体外重组

目的:采用基因重组技术将可能与血栓形成有关的纤维蛋白原Bβ链羧基端的KGD结构置换为EGS结构,提供一种简单方便的构建变异克隆的方法。方法:在含有正常BβcDNA的pMLP质粒(简称p668)的溶液中,加入变异引物、筛选引物和dNTP。在T4聚合酶和T4连接酶的作用下,合成除变异碱基外,其他碱基均与原正常Bβ链互补的变异Bβ链,经过两次在不同菌系的大肠杆菌中的表达与筛选,获取变异克隆。结果:由于变异克隆引入了BstBI这个新的酶切位点,可通过电泳证实变异克隆构建的成功与否,本研究经电泳及DNA序列分析证实重组体确系已含变异EGS结构的克隆。结论:本方法为一构建变异克隆的分子生物学技术,可用于任何克隆的构建。本研究成功地获得了纤维蛋白原Bβ链羧基端KGD转换为EGS的变异体。

纤维蛋白原Bβ链基因启动区2个多态位点与冠心病的相关性

目的研究纤维蛋白原(Fg)Bβ链基因启动区上游-148C/T及-455G/A多态性位点与冠心病(CAD)及血浆Fg水平的相关性。方法90例CAD患者及年龄、性别相匹配的115例正常对照者,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测FgBβ-148C/T及-455G/A基因型,比较两组基因型及等位基因频率分布及不同基因型间血浆Fg水平。结果CAD组-148CC基因型频率较对照组减少;而CT及TT基因型较对照组增加;CAD组C等位基因频率为70.56%,对照组为86.09%(P<0.01)。而-455G/A多态位点频率在两组间无显著差异。-148C/T及-455G/A多态性位点均影响CAD组及对照组血浆Fg水平,但对冠脉受累支数无影响。结论FgBβ-148C/T多态性与中国人群CAD及血浆Fg水平相关,T等位基因可能是中国人群CAD的遗传易患因子。

FgBβ基因多态性与其功能表达和肥胖的相关性研究

目的研究体重超重和肥胖与纤维蛋白原（Fg）Bβ链基因多态性以及血浆Fg功能表达的关系，探讨其发生脑梗死等相关疾病的发病机制。方法选取开滦集团离退休职工939人进行体检和问卷调查，依体重指数将其分为体重正常、超重及肥胖三组，受检者均抽取静脉血测定血液生化及血浆Fg浓度和纤维蛋白单体聚合反应速率（FMPV）、FMPV／Amax等反映Fg分子聚合功能的指标，并应用聚合酶链反应．限制性内切酶片段长度多态性等技术进行FgBβ链七位点基因多态性检测。结果三组间七个位点的等位基因和基因型的频率分布均无统计学差异（P〉0．05）；肥胖组Bβ-993位点突变基因型人群Fg浓度、FMPV、Amax均高于野生基因型人群，N6和345位点突变基因型人群Amax也高于野生基因型（P〈0．05）；超重组和肥胖组的高血压病、脑梗死发病率均高于正常体重组（P〈0．05）；以体重指数为因变量进行多元逐步回归分析，依次筛选出高血压病、年龄、脑梗死病史（P〈0．01），结论在正常体重和超重状态下FgBβ上述7位点基因多态性不影响血浆Fg浓度和功能的表达，而肥胖状态可使FgBβI6、-993和345变异基因型携带者的血浆Fg浓度和综合性纤维蛋白聚合功能明显升高，成为发生血栓性疾病的重要病因，提示体重超重与肥胖状态发生脑梗死等血栓性疾病的危险性和发病机制不同。