大鼠杏仁核的外侧核和基底外侧核神经肽 Y免疫阳性纤维的起始(英文)

用间接免疫荧光技术和逆行示踪法探讨了杏仁核的外侧核和基底外侧核神经肽 Y免疫阳性纤维的起始。结果证明 :将逆行示踪物荧光金注射到杏仁核的外侧、基底外侧核之后 ,在同侧的杏仁前区出现了许多荧光标记细胞 ;免疫荧光的染色显示部分细胞同时呈神经肽 Y免疫反应阳性 ;损毁杏仁核前区引起同侧杏仁核的外侧核和基底外侧核神经肽 Y纤维的减少。这些发现提示 ,杏仁前区的神经肽 Y免疫阳性细胞投射到同侧杏仁核的外侧核和基底外侧核。此外 ,现在的研究显示 ,出现于杏仁核的外侧核和基底外侧核的神经肽 Y免疫阳性神经元是内在性的 ,因为损毁杏仁前区后在以上的部位仍可观察到相当数量的神经肽 Y免疫阳性纤维 ;并且横断两条主要的杏仁核传出通路 -终纹和腹侧杏仁核传出通路 ,未能引起神经肽

陆地棉无短绒突变体GZnn的纤维发育及其基因表达分析

【目的】利用棉花无短绒突变体GZnn为材料,分离与棉花纤维发育相关的重要基因,从而揭示棉花纤维发育的分子机理。【方法】通过扫描电镜观察GZnn与其近等基因系TM-1在纤维发育上的差别;采用差异显示RT-PCR方法寻找GZnn与TM-1之间的差异表达片段,并进行相应分析。【结果】用扫描电镜观察突变体GZnn与TM-1的胚珠表面纤维细胞起始发生的情况,发现GZnn不仅在纤维细胞发生和延伸上延迟,而且纤维细胞总数也明显减少。利用差异显示PCR进行比较筛选,获得了12个差异表达的EST片段,其中,DS3只特异性地在GZnn开花前(-3～0DPA)的胚珠中特异表达,而在其近等基因系TM-1中没有表达,推测DS3可能是一个纤维启动过程中的MYB类负调控转录因子。【结论】本研究利用棉花无短绒突变体GZnn发现,棉纤维细胞在早期分化和形态建成过程中大量基因表达,对其中的关键基因的表达模式和功能开展深入研究将有助于阐明棉纤维分化发育的分子机理,为棉花遗传改良提供理论基础。

陆地棉无绒突变体miRNA的鉴定及其靶标基因分析

【目的】棉花纤维突起影响纤维的产量和品质,挖掘纤维起始相关的小RNA及其靶基因对于研究纤维起始机制至关重要。【方法】本研究以新乡小吉的野生型(Wild type,WT)及其无绒有絮突变体(Fuzzless mutant,FLM)开花当天的胚珠为材料,构建6个小RNA文库并进行高通量测序,以陆地棉(Gossypium hirsutum L.)基因组序列作为参考。【结果】共发现459个mi RNA,包括301个保守的mi RNA和158个新mi RNA。共得到13个差异表达的mi RNA,预测并分析了它们的靶基因。通过对靶基因的生物信息学分析结果显示,预测的这些靶基因侧重于编码HD-ZIP (Homeodomain-leucine zipper)、GRAS (Gibberellic acid insensitive,Repressor of GAI,Scarecrow)、AP2 (APETALA2)家族的转录因子,功能集中在转录和转录后调控阶段。对靶基因进行Gene Ontology (GO)注释发现,它们参与细胞分化、花药发育、花器官发育等生物学过程。随机选出4个mi RNA进行荧光定量PCR验证,结果证实了测序数据的可靠性。【结论】mi RNA通过负调控靶标转录因子和激素相关基因来影响纤维细胞的起始发育。