多西环素在纤维连接蛋白诱导髓核细胞退变过程中的作用

背景:多西环素在阻止间盘退变方面有一定的作用,但是其在椎间盘中抑制基质金属蛋白酶的机制并未完全阐明。目的:从分子内信号传导角度采用细胞实验来阐明多西环素抑制间盘内基质金属蛋白酶的作用机制。方法:体外培养人间盘髓核细胞,在培养液中加入相对分子质量为45 000纤维连接蛋白片段制造退变模型。在退变模型中按照不同作用时间及不同作用浓度分组,均通过Western blot方法检测各组Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶13蛋白的表达情况。然后在10 mg/L多西环素作用24 h后,Western blot方法测定各组ERK1/2、p-ERK1/2、P38、p-P38、JNK、p-JNK蛋白表达水平,并根据以上实验结果选择ERK及JNK通路抑制后,Western blot检测多西环素对MAPK通路蛋白表达的影响。结果与结论:(1)纤维连接蛋白可以诱导髓核细胞退变,表现为基质金属蛋白酶13表达增加、Ⅱ型胶原表达降低。多西环素可以抑制纤维连接蛋白诱导的退变髓核细胞基质金属蛋白酶13的表达,但并不呈时间依赖性和剂量依赖性;(2)多西环素作用于经纤维连接蛋白诱导的髓核细胞后可以抑制其ERK1/2及JNK磷酸化,双重抑制有效地阻断了ERK1/2及JNK在髓核细胞中的激活,与多西环素或MAPK抑制剂单独作用相比,这种联合作用协同地增强了对ERK及JNK磷酸化的抑制作用。因此多西环素可能通过阻断ERK1/2及JNK在髓核细胞中的激活来抑制金属基质蛋白酶表达,进而减少细胞外基质降解,具有预防和治疗间盘退变的潜在作用。

纤维连接蛋白EDA片段拷贝数变异在乳腺癌诊断及预后评价中的意义

目的:探讨纤维连接蛋白EDA片段拷贝数变化在乳腺癌诊断及预后评价中的意义。方法 :选取100例乳腺癌手术患者的癌灶及癌旁组织标本,采用AccuCopy TM多重基因拷贝数检测技术进行纤维连接蛋白EDA片段拷贝数检测。结果:76%癌灶呈EDA片段多拷贝状态,只有2%癌旁组织呈多拷贝状态。依据淋巴结转移情况将患者分为无转移、1~3枚转移、≥4枚转移3组,癌组织标本EDA片段多拷贝比例分别为21.4%、68.8%、94.4%,差异有统计学意义(P<0.05);依据Ki67表达情况将患者分为≤20%、20%~50%、>50%3组,癌组织标本EDA片段多拷贝比例分别为20.0%、79.2%、94.6%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:纤维连接蛋白EDA片段拷贝数检测可以辅助诊断乳腺癌,对患者预后有一定指导意义。