应用纤连蛋白片段建立椎间盘退变动物模型

目的:探讨应用N端30kDa纤连蛋白片段(Fn-f)建立模拟人类椎间盘退变规律的椎间盘退变动物模型的可行性,为椎间盘退变的防治提供实验模型及实验依据。方法:选取雄性6月龄新西兰大白兔28只,麻醉后使用30G微量注射针和微量注射器,在透视引导下经皮将25μl 1.5μmol/L Fn-f(Fn-f组)或25μl磷酸缓冲液(PBS,0.01mol/L,pH值7.2;PBS组)随机分别注射入不同节段的腰椎间盘中心区。分别于注射4、8、12、16周后获取椎间盘,对椎间盘进行组织学检测(HE、Masson三色及番红O染色),并以RT-PCR法对椎间盘聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的基因表达水平进行分析。结果:与注射PBS椎间盘相比,注射Fn-f椎间盘造模后4周时椎间盘的髓核、纤维环结构以及胞外基质蛋白聚糖等无明显差别;8周时髓核细胞数量减少、细胞簇状分布,被胞外基质分隔开来,纤维环层状结构排列部分出现紊乱,蛋白聚糖染色变浅;12和16周时髓核细胞数量明显减少,细胞变圆,呈明显的成簇聚集分布,纤维环排列明显不规整,各层间出现裂隙,甚至断裂,蛋白聚糖染色明显变浅,甚至部分未见染色。Fn-f组椎间盘聚集蛋白聚糖mRNA表达水平在8、12和16周3个时间点均明显低于PBS组(P<0.05);Ⅱ型胶原mRNA表达水平在12和16周时明显低于PBS对照组(P<0.05)。结论:透视引导下兔椎间盘内注射N端30kDa Fn-f可诱导椎间盘产生渐进性退行性病变,该法建立的动物模型可作为研究椎间盘退变的发病机制及防治的实验模板。

动脉粥样硬化程度与患者血清中趋化素和纤连蛋白EDA水平的相关性

目的分析动脉粥样硬化(AS)程度与患者血清中趋化素(chemerin)和纤连蛋白EDA片段(EDA-FN)水平的相关性。方法 102例颈AS患者根据病症的严重程度分为轻度AS组(轻度硬化组,颈内动脉收缩期峰值流速在125~230 cm/s,动脉内径缩小<30%)和重度AS组(重度硬化组,颈内动脉收缩期峰值流速>230 cm/s,动脉内径缩小>70%),采用ELISA方法测定患者血清中趋化素和EDA-FN的含量,并收集患者的相关临床资料。结果重度硬化组患者血清趋化素含量和EDA-FN水平显著高于轻度硬化组(P<0.05,或P<0.01),AS程度与血清趋化素含量呈正相关(r=0.212,P<0.01),与EDA-FN水平呈正相关(r=0.283,P<0.01)。结论 AS程度与血清中趋化素和EDA-FN水平有相关性。