防御素基因在乌金猪与约大乌猪组织中的表达及东亚飞蝗抗菌活性物质对防御素基因表达的调节作用

本试验旨在检测β防御素-1（p BD-1）、β防御素-2（p BD-2）和β防御素-3（p BD-3）基因在乌金猪和具有乌金猪血缘的约大乌猪不同组织中的表达,并探讨东亚飞蝗抗菌活性物质（LAAS）对猪胎儿皮肤成纤维细胞（PFSF）免疫应激参数和防御素（p BDs）基因表达的调节作用。采用实时荧光定量PCR方法检测2月龄乌金猪与约大乌猪心脏、肝脏、肺脏、肾脏、空肠、回肠、十二指肠、皮肤、肌肉、胰腺、睾丸或卵巢这12种组织中p BD-1、p BD-2和p BD-3基因的表达差异;采用培养至第4~5代的PFSF,通过脂多糖（LPS）诱导建立免疫应激模型,在DMEM/F12培养液中添加不同浓度（0、75、150、300、600和1 200μg/m L）的LAAS,考察LAAS对PFSF免疫应激参数和p BD-1、p BD-2、p BD-3基因表达的影响。结果表明：1）乌金猪血清溶菌酶（LSZ）活性、免疫球蛋白G（Ig G）含量显著高于约大乌猪（P〈0.05）,血清一氧化氮（NO）含量极显著低于约大乌猪（P〈0.01）。2）约大乌猪大多数组织中p BD-1、p BD-2和p BD-3基因的表达量高于乌金猪;2个品种猪的p BD-1和p BD-3基因均在皮肤和卵巢中表达量较高,p BD-2基因在肝脏和肾脏中表达量较高。3）300μg/m L LAAS极显著降低了培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活性（P〈0.01）;LAAS极显著增加了培养液中NO含量（除75μg/m L组正常细胞外）（P〈0.01）,正常细胞和应激细胞均在LAAS浓度为600μg/m L时达到最高;LAAS浓度为0、75和150μg/m L时应激细胞一氧化氮合酶（NOS）活性显著或极显著高于正常细胞（P〈0.05或P〈0.01）;添加1 200μg/m L LAAS可极显著降低培养液中的LSZ活性（P〈0.01）,LAAS浓度为150、300、600和1 200μg/m L时应激细胞与正常细胞中LSZ活性差异显著或极显著（P〈0.05或P〈0.01）。4）应激细胞p BD-1、p BD-2和p BD-3基因的表达量均高于正常细胞;当LAAS浓度为150μg/m L时,p BD-1、p BD-2和p BD-3基因的表达量最高。结果提示,乌金猪和约大乌猪防御素基因的表达存在明显的品种差异性和组织特异性,适宜浓度的LAAS能够降低PFSF中LDH活性,提高NO含量及NOS、LSZ活性,上调应激细胞与正常细胞防御素的表达量。

云南乌金猪与约大乌猪低氧适应性的研究

旨在探明云南高原乌金猪与约大乌猪低氧适应差异。采集60日龄乌金猪与约大乌猪各30头(公母各半)血样,检测乌金猪和约大乌猪血液血红蛋白含量(HGB)、红细胞压积(HCT)、红细胞数目(RBC)、平均血红蛋白含量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)和氧饱和度生理表征参数。屠宰60日龄乌金猪与约大乌猪各12头(公母各半),采用Real-time PCR方法检测心、肝、肺、肾、空肠、回肠、十二指肠、皮肤、肌肉、胰腺、睾丸或卵巢12种组织中HIF-1α、VEGF、EPO基因的表达。结果显示,乌金猪HGB和RBC极显著(P<0.01)高于约大乌猪,而HCT和MCH低于约大乌猪,乌金猪氧饱和度高于约大乌猪,但差异不显著(P>0.05)。在乌金猪与约大乌猪的各个组织中均检测到HIF-1α、VEGF、EPO基因mRNA的表达;在低氧适应基因中,HIF-1α基因在肝、肺、胰腺、肾和皮肤组织表达量最高,VEGF基因在肝、肺和胰腺表达量最高,EPO基因在肾和肝表达量最高;HIF-1α、VEGF、EPO基因在两猪种中的表达量趋势一致,约大乌猪组织中的总体表达量高于乌金猪的表达量;母猪低氧适应基因的总体表达量显著高于公猪。乌金猪低氧适应生理表征参数明显高于约大乌猪,在多数组织约大乌猪低氧适应基因的表达高于乌金猪。但对其高原低氧适应性机制有待进一步研究。