沉积物中多氯联苯分析的纯化条件优化研究

比较了各种填料层析柱和洗脱液的差别,并根据有机溶剂使用量较少的样品纯化方案,建立了适用低有机质含量水体表层沉积物中不同极性多氯联苯(PCBs)的分析方法。结果表明,该方法检测限在0.11 ng/g^0.35 ng/g(干重)之间,对主要多氯联苯同族体的回收率是77.9%~112.1%。用该法分析了长江中下游水体表层沉积物中的PCBs,质控结果表明,该纯化方法的效果理想。

重组人sBLyS表达纯化条件的优化、理化特征及生物功能研究

构建了原核表达质粒pET 30a(+) sBLyS ,转化大肠杆菌BL2 1(λDE3) ,IPTG诱导表达的重组蛋白以可溶部分和包涵体两种形式存在 ,为了提高可溶部分重组蛋白的比例 ,确定 16℃为诱导表达的温度 ,最佳表达时间为 12h。在此条件下大规模诱导表达 ,经Ni2 +亲和层析获得重组人sBLyS。重组蛋白的等电点约为 7 1～ 7 3,活性状态时是非共价连接的同源三聚体。MTT法测重组人sBLyS对B淋巴细胞的增殖作用结果表明 ,B细胞经抗IgM原血清活化后 ,它的增殖程度在一定的重组人sBLyS浓度范围内随其浓度的增加而提高 ,sBLyS刺激时间对B细胞增长也有显著影响 ,sBLyS以 2 μg mL刺激

藏灵菇源嗜热链球菌Tx菌株胞外多糖的纯化研究

为获得藏灵菇嗜热链球菌Tx菌株胞外多糖(EPS)的纯品,探索了EPS粗品的纯化方法。利用Sepharose CL-6B进行凝胶分级纯化,并对EPS纯品采用紫外全波长扫描、凝胶色谱鉴定及EPS纯度测定。结果表明:最佳纯化条件为:采用0.05～0.06mol/L氯化钠溶液梯度洗脱,流速为0.25ml/min,样品上样浓度为1.0mg/ml,上样量为1.0ml。在最佳纯化条件下得到的EPS纯度为98.01%,是纯化前的1.4倍,为今后进一步研究EPS结构与功能提供了实验基础。

大孔吸附树脂纯化黑穗醋栗花色苷研究

文章选择了八种大孔吸附树脂,分别测定它们对黑穗醋栗花色苷粗提液的吸附率及解吸率,确定了AB-8为最佳树脂。通过Langmuir及Freundlich吸附等温方程对20℃条件下的试验数据进行拟合分析,结果表明,平衡浓度范围在0.056-1.00mg·100mL^-1,遵循Freundlich吸附等温方程;平衡浓度范围在1.00-7.05mg·100mL^-1,遵循Langmuir吸附等温方程,由Langmuir吸附等温式拟合结果得到AB-8大孔吸附树脂在给定试验条件下的单层饱和吸附量是15.92mg·g^-1。根据AB-8大孔吸附树脂吸附特性的研究,得出最佳纯化条件为：选择pH1.0-2.0、浓度19.15mg·100mL^-1的黑穗醋栗花色苷粗提液,以1.0mL·min^-1的流速上样,经0.1%盐酸溶液洗涤后,用pH2.5的60%乙醇作为洗脱剂,在洗脱流速为0.5BV·h^-1的情况下,得到的花色苷产品,纯度约为91.76%。

N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲溶解度的测定及其纯化工艺的优化

[目的]:测定N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲在不同溶剂中的溶解度,并对其纯化工化艺进行优化。[方法]:应用气相色谱法(GC)测定N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲在石油醚、乙酸乙酯、无水乙醇、水中的溶解度,以改良快速干柱柱层析及重结晶法对大量合成的N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲进行纯化。[结果]:N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲在石油醚、乙酸乙酯、无水乙醇、水中的溶解度分别为0.7087、2.216、0.8107、0.0002 mg/m L。以改良快速干柱柱层析及重结晶法可以得到大量高纯度的N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲,产率为65.5%,纯度为99.45%。[结论]:获得大量高纯度N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲的方法为改良快速干柱柱层析与重结晶法并测定N,N’-二环己基-N-山嵛酸酰脲在不同溶液中的溶解度。

芽胞杆菌苎麻脱胶酶—甘露聚糖酶的纯化及酶学性质

研究了苎麻高效脱胶菌株Bacillus subtilisNo.16A甘露聚糖酶的产生条件,纯化过程以及酶学性质。其优化的培养基为魔芋胶30 g/L,蛋白胨9 g/L,酵母膏2 g/L,KH2PO45 g/L,MgSO4.7H2O 0.25 g/L。优化的培养条件为起始pH 8.0,装样量50 mL,接种量10 mL,发酵72 h。进一步通过硫酸铵沉淀、阴离子交换层析、凝胶过滤3步从Bacillus subtilisNo.16A发酵液中纯化了甘露聚糖酶。结果表明,该酶分子量约为38.5ku,最适作用pH为7.0,最适作用温度为60℃,在55℃以下、中性pH（6.0～8.0）范围内稳定,Ca^2＋、Mn^2＋和Al^3＋、Mg^2＋对该酶有激活作用,Cu^2＋、Zn^2＋有抑制作用。

超滤法对绿原酸提取率的影响

目的考察超滤法纯化金银花提取液的最佳条件。方法采用超滤法（分子截留值5000），采用高效液相色谱法测定绿原酸的含量，筛选超滤压力、药液流速、循环时间3个因素的最佳条件。结果压力控制在0．05～0．07MPa，循环流速控制在2d／s左右，循环时间控制在2h内，最终纯化液干浸膏中绿原酸高达44．10mg／g．。结论本法是纯化金银花药材及其制剂的一种快速有效的方法。

Separation and Purification Process of Total Flavones from Litchi Pericarp by Macroporous Absorption Resin

[ Objective] This study aimed to optimize the conditions for purification of total flavones from litchi pericarp by macroporous absorption resin. E Method] The flavones adsorption rates and desorption rates of macroporous absorption resins （AB-8, HPD-600, D101 ） were compared, and the technological parameters of D101 during the purification process were investigated. E Result] D101 macroporous absorption resin was ap- propriate for the purification of total flavonoids from litchi pericarp. The optimal technological conditions were selected .. the pH of sample solution was 5.0; concentration of sample solution was 4 mg/ml, with a volume of 2.5BV; 80% ethanol was used as elution solution, with a volume of 2.0BV. [ Condusion] The content of total flavones achieved 83% after separation by D101 macoporous absorption resin.

甲鱼油中多不饱和脂肪酸的提取与纯化研究

本文研究了甲鱼油中多不饱和脂肪酸的提取与纯化。采用乙酯化法提取甲鱼油中的多不饱和脂肪酸，通过正交实验确定了最佳提取条件：乙醇，甲鱼油比0．73：1，NaON用量3％(油重)，反应温度65℃，反应时间2h；采用尿素包合法纯化多不饱和脂肪酸，考察尿素用量、搅拌时间、包合次数对尿素包合率的影响，通过正交实验确定最佳纯化条件：尿素，乙醇饱和溶液：脂肪酸乙酯=15：1，搅拌时间3h，包合次数1次。实验结果表明，应用乙酯化法与尿素包合法可从甲鱼油中制得高纯度的多不饱和脂肪酸。

血红素纯化技术研究

以粗品血红素为原料，经稀碱、稀酸处理，通过正交实验分析，确定最佳纯化条件为：提取液氨浓度为1.5％，固液比为1:35，提取时间为10min。产品纯度大于96％，回收率大于80％，具有工艺简单、成本低廉、无污染、生产周期短等优点。