真空干燥球孢白僵菌纯孢粉的活孢率、毒力与贮存期

采用真空冷冻干燥法 (冻干 )和真空室温干燥法 (抽干 )对球孢白僵菌 (Beauveriabassiana)原菌粉进行了干燥工艺的比较。在固体产孢基质上生产的新鲜纯孢粉 (原菌粉 )含水量达 5 8 65 % ,经 36h冻干或抽干 ,孢子粉的含水量分别降至 3 97%和 4 2 6% ,含孢量分别为 1 2 9× 1 0 1 1 孢子 /g和 1 2 5× 1 0 1 1 孢子 /g ,活孢率分别为 99 0 %和 97 9%。冻干粉和抽干粉之间的活孢率无显著差异 ,但萌发速度不同。原菌粉、抽干粉及冻干粉对桃蚜(Myzuspersicae)在接种后第 7d的LC50 分别为 1 1 5 ,5 89和 2 95× 1 0 4 个孢子 /mL ;在 1 0 6 个孢子 /mL的剂量下对桃蚜的LT50 分别为 3 6d、 4 4d和 3 9d。从生产成本低得多 ,抽干法比冻干法在白僵菌纯孢粉的生产中更有应用前景 ,尽管冻干粉的质量略优于抽干粉。在4℃和 2 0℃下贮存冻干粉并进行为期一年的孢子萌发率和毒力检测。结果显示 ,冻干粉在2 0℃下贮存至 2 5 5d时完全失活而丧失染虫能力 ,而在 4℃下贮存一年后的活孢率仍达90 2 % ,LT50 仅从初始的 3 9d延长至 4 7d。这说明仅通过降低含水量以延长白僵菌孢子粉在常温下的贮存期仍是不可能的。

不同含水量和温度下贮存中球孢白僵菌分生孢子活力与内贮营养的衰变

将球孢白僵菌(Beauveriabassiana)BBSG8702的未干燥孢子粉(含水量58.9±1.6%)和真空冷冻干燥孢子粉(含水量7.4±0.9%)置于4℃和20℃下贮存1个月,每隔5d取样测定活孢率和孢子内贮总糖和蛋白含量,发现含水量和贮存温度交互影响孢子的活力以及内贮总糖和蛋白质的代谢水平,各组合中的活孢率一般与内贮总糖和蛋白质代谢水平均存在显著或极显著相关性.在1个月的贮存期间,4℃下冻干粉总糖含量下降13.4%,蛋白质含量下降39.2%,清水中的萌发率下降32.0%,营养液中的萌发率仅下降6.7%,而未干燥孢子粉的相同指标分别下降42.4%、66.3%、96.4%和99%;在20℃下,冻干粉的上述指标分别下降了14.1%、38.2%、55.8%和 10.4%,而未干燥孢子粉则分别下降了 43.2%、65.4%、99.4%和98.4%. 显然,含水量影响活孢率和内贮营养衰变的幅度,而温度影响衰变的速度,但内贮营养的耗尽并不立即引起孢子失活,在供给外源营养之后孢子仍能萌发.将含水量降至4.0±0.9%的冻干粉贮存1年,4℃下活孢率由初始的99.0%下降至90.2%,而20℃下贮存的前165d活孢率下降较为缓慢,但此后急剧下降,至第240d时几乎全部失活.模拟分析表明,低含水量冻干粉在4℃和20℃下贮存的半衰期(即活孢率减少一半所需的时间)分别为1006d和197d.这些结果说明。